腸型脂肪酸結(jié)合蛋白和超敏C反應蛋白聯(lián)合檢測在診斷新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎中的意義

楊均秀 謝巧玲 梁林國

【摘要】 目的 探討腸型脂肪酸結(jié)合蛋白（I-FABP）和超敏C反應蛋白（hs-CRP）聯(lián)合檢測在新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎（NEC）診斷中的意義。方法 選取2015年4月～2017年6月在本院新生兒科住院確診為NEC的患兒29例作為NEC組， 選取同期確診為敗血癥的患兒29例（排除合并NEC）作為敗血癥組， 另選同期無NEC及敗血癥臨床癥狀且由實驗室確認無感染的32例新生兒作為對照組。采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測三組血清I-FABP水平， 同時采取動脈血標本送本院檢驗科檢測hs-CRP水平， 比較三組患兒24 h內(nèi)I-FABP水平及不同時間hs-CRP水平。結(jié)果 NEC組I-FABP水平為（36.09±14.78）ng/ml， 敗血癥組I-FABP水平為（22.49±14.36）ng/ml， 對照組I-FABP水平為（11.08±7.85）ng/ml。NEC組I-FABP水平高于敗血癥組和對照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對照組， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。NEC組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（24.09±36.26）、（12.26±10.38）、（3.58±3.67）mg/L;敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（28.24±45.36）、（12.07±13.23）、（3.49±2.58）mg/L;對照組24 h內(nèi)hs-CRP水平為（2.08±0.85）mg/L。NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平比較， 差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)hs-CRP水平均高于對照組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d hs-CRP水平均高于本組6 d， 24 h內(nèi)hs-CRP水平高于本組3 d， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 I-FABP水平可能成為NEC早期診斷的一個預測指標， 雖然hs-CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測卻可以評估疾病的進展情況。

【關(guān)鍵詞】 新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎;腸型脂肪酸結(jié)合蛋白;超敏C反應蛋白

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.11.003

【Abstract】 Objective? ?To discuss the significance of combined detection of intestinal fatty acid binding protein （I-FABP） and hypersensitive C-reactive protein （hs-CRP） in the diagnosis of neonatal necrotizing enterocolitis （NEC）. Methods? ?A total of 29 neonates diagnosed as NEC in our hospital during April 2015 ～?June 2017 were selected as NEC group， 29 neonates with sepsis diagnosed at the same time （excluding the combination of NEC） selected as the sepsis group， and 32 neonates without NEC and clinical symptoms of sepsis confirmed by laboratory as the control group. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect the levels of serum I-FABP in three groups. Meanwhile， artery blood samples were sent to the laboratory of our hospital to detect the levels of hs-CRP. The I-FABP level within 24 h and hs-CRP at different times in three groups was compared. Results? ?NEC group had I-FABP level as （36.09±14.78） ng/ml， which was （22.49±14.36） ng/ml?in sepsis group， and （11.08±7.85） ng/ml in control group. Their difference was statistically significant （P<0.05）. NEC group had hs-CRP level within 24 h， 3 d and 6 d respectively as （24.09±36.26）， （12.26±10.38） and （3.58±3.67） mg/L， sepsis group had hs-CRP level reapectively as （28.24±45.36）， （12.07±13.23） and （3.49±2.58） mg/L and control group had hs-CRP level within 24 h as （2.08±0.85） mg/L. NEC group and sepsis group had no statistically significant difference in hs-CRP within 24 h， 3 d and 6 d （P>0.05）. NEC group and sepsis group had higher hs-CRP level within 24 h than the control group， and the difference was statistically significant （P<0.05）. NEC group and sepsis group had higher hs-CRP level within 24 h and 3 d than those within?6 d， and higher hs-CRP level within 24 h than those within 3 d. Their difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion? ?I-FABP level may be a predictor of early diagnosis of NEC. Although the specificity of hs-CRP is not high， continuous monitoring of its serum level can assess the progress of the disease.

【Key words】 Neonatal necrotizing enterocolitis; Intestinal fatty acid binding protein; Hypersensitive C-reactive protein

新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎（neonatal necrotizing enterocolitis，?NEC）是由圍生期多種致病因素導致的以腹脹、嘔吐、便血為主要癥狀的急性壞死性腸道疾病。其發(fā)病機制尚不完全明確， 多認為與早產(chǎn)、低出生體重、感染、腸黏膜缺氧缺血、喂養(yǎng)不當?shù)纫蛩赜嘘P(guān)。NEC晚期預后差， 存活患兒部分留有短腸綜合征、生長受限、遠期神經(jīng)發(fā)育不良等后遺癥[1]， 因此NEC早期診斷尤為重要。目前， NEC的診斷主要依靠臨床癥狀及腹部X線、B超檢查， 但是NEC的早期臨床表現(xiàn)及腹部X線、B超表現(xiàn)都是非特異性的， 導致NEC的早期診斷困難。因此尋找一種更有效的診斷指標， 對提高NEC的早期診斷率、降低NEC的死亡率有著重要意義。本研究旨在研究I-FABP和hs-CRP聯(lián)合檢測在診斷新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎中的意義。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取2015年4月～2017年6月在佛山市禪城區(qū)中心醫(yī)院新生兒科住院的新生兒作為研究對象， 選取根據(jù)BellNEC臨床診斷標準確診為NEC的患兒29例（全部患兒均為經(jīng)保守治療1周內(nèi)病情好轉(zhuǎn)的患兒， 保守治療失敗的患兒轉(zhuǎn)外院?？浦委煻顺稣n題研究）歸為NEC組;選取同期在新生兒科病房住院的敗血癥的患兒（排除合并NEC）29例歸為敗血癥組， 新生兒敗血癥根據(jù)國際膿毒癥共識（internationaI sepsis consensus）中定義的標準， 該組患兒具有體溫改變、反應不佳、黃疸、喂養(yǎng)不耐受、呼吸暫停等敗血癥臨床癥狀且血培養(yǎng)為陽性， 確診無NEC的患兒;另選同期無NEC及敗血癥臨床癥狀且由實驗室確認無感染的新生兒32例歸為對照組。三組胎齡、性別、體重等一般資料比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）， 具有可比性。見表1。該研究獲得研究對象監(jiān)護人的知情同意， 且已通過本院醫(yī)學倫理委員審查。

1. 2 標本的采集及血清I-FABP水平檢測 NEC組患兒出現(xiàn)可疑的NEC癥狀后24 h內(nèi)采集橈動脈血液標本1.5 ml， 敗血癥組患兒出現(xiàn)癥狀24 h內(nèi)采集橈動脈血液標本1.5 ml， 將所采血液標本經(jīng)3000 r/min離心5 min， 留取上清液0.5 ml置EP管， 并于-80℃冰箱凍存， 定期批量測定。使用I-FABP酶聯(lián)免疫吸附試驗試劑盒（上海凡科維生物技術(shù)有限公司）進行測定。

1. 3 hs-CRP水平測定 NEC組及敗血癥組于出現(xiàn)癥狀的24 h內(nèi)、3 d、6 d送標本至本院檢驗科檢測hs-CRP水平， 對照組僅于24 h內(nèi)送檢1次。

1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;多行多列計量資料采用方差分析;計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組24 h內(nèi)I-FABP水平比較 NEC組I-FABP水平為（36.09±14.78）ng/ml， 敗血癥組I-FABP水平為（22.49±14.36）ng/ml， 對照組I-FABP水平為（11.08±7.85）ng/ml。NEC組I-FABP水平高于敗血癥組和對照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對照組， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表2。

2. 2 三組不同時間hs-CRP水平比較 NEC組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（24.09±36.26）、（12.26±10.38）、（3.58±3.67）mg/L;敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（28.24±45.36）、（12.07±13.23）、（3.49±2.58）mg/L;對照組24 h內(nèi)hs-CRP水平為（2.08±0.85）mg/L。NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平比較， 差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)hs-CRP水平均高于對照組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d hs-CRP水平均高于本組6 d， 24 h內(nèi)d hs-CRP水平高于本組3 d， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

NEC是新生兒時期比較常見的消化系統(tǒng)危重癥， 嚴重者甚至可能危及生命， 臨床癥狀以腹脹、嘔吐、便血為主要癥狀的急性壞死性腸道疾病。傳統(tǒng)的實驗室檢查指標如血清白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)、CRP、糞隱血試驗對NEC早期診斷的敏感度和特異度均較低， 影像學檢查X線片上、胃腸彩超初期亦無明顯改變， 待X線片、彩超出現(xiàn)典型影像時往往表示病情已嚴重。NEC的治療早期以禁食、營養(yǎng)支持、抗感染為主， 晚期出現(xiàn)腸壞死、穿孔時則以外科治療為主， 病死率高， 術(shù)后遠期生存質(zhì)量常受影響。因此NEC的早期診斷尤為重要， 但目前臨床上尚缺乏可靠的生物學診斷指標。因此在發(fā)病早期可以使用的敏感性及特異性較高的實驗室檢測指標對本病的診治有重要意義。

3. 1 I-FABP 脂肪酸結(jié)合蛋白是一種轉(zhuǎn)運脂肪酸的低分子量蛋白質(zhì)， 有很多亞型， 具有組織器官特異性[2]。肪肪酸結(jié)合蛋白家族是脂質(zhì)結(jié)合蛋白超家族成員， 廣泛存在于哺乳動物的小腸、肝、心、腦、骨骼肌等多種細胞內(nèi)。I-FABP是其中的重要成員， 主要局限表達于小腸黏膜細胞和胃黏膜細胞， 具有較好的器官特異性， 對診斷腸道缺血缺氧、炎癥壞死具有較大的臨床價值。正常情況下， 其在血清中含量很少。當腸黏膜受損時， 由于細胞膜的通透性增加， 其在血清中的含量增加， 被認為是NEC早期診斷和疾病嚴重程度預測的潛在生物學標志物[3]。Ng EW等[4]研究顯示， I-FABP區(qū)分NEC的敏感性為50%， 特異性為95%。秦嘉麗等[5]研究認為， 血清I-FABP≥2.165 ng/ml可作為NEC的診斷標準， 其診斷靈敏度為73.1%， 特異度為88.5%。李粹等[6]研究顯示， 患兒在出現(xiàn)NEC可疑癥狀時及2～3 d癥狀無明顯緩解時抽血檢測血清I-FABP濃度， 結(jié)果顯示最后出院診斷為NEC的患兒其濃度在這兩個采血點均明顯高于非NEC組。上述研究均說明血清I-FABP可以作為NEC早期診斷較為理想的生化指標之一。本研究采集患兒發(fā)病后24 h內(nèi)標本測定血清I-FABP水平， 結(jié)果顯示NEC組患兒血清I-FABP水平高于敗血癥組和對照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對照組， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。故血清I-FABP水平可能成為NEC早期診斷的一個有效指標。

3. 2 hs-CRP hs-CRP是監(jiān)測炎癥反應的一個常用指標， 已被廣泛應用于臨床。CRP水平在受損傷后的6～8 h開始升高， 被認為是一種“晚期預警”的生物標志物。雖然CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測卻可以評估疾病的進展情況[7]。CRP為肝臟產(chǎn)生的急性期反應物， 在機體感染、炎癥或組織損傷時可出現(xiàn)水平升高。一般出現(xiàn)在感染后6～8 h開始升高， 與感染程度呈正相關(guān)， 24～48 h達峰值;張愛梅等[8]對NEC患兒進行早期CRP及降鈣素原（PCT）水平的監(jiān)測后發(fā)現(xiàn)， 隨著有效的治療， 病情的恢復， 兩項指標均可顯著下降， 因此對NEC早期診斷、病情演變及隨訪治療效果的評估有重要價值。阿爽等[9]對30例壞死性小腸結(jié)腸炎患兒常規(guī)進行CRP及白細胞（WBC）水平的連續(xù)檢測， 將手術(shù)組及非手術(shù)組兩組數(shù)據(jù)進行比較， 研究認為血清CRP具有重要的臨床價值， 有助于壞死性小腸結(jié)腸炎的早期診斷和病情分期， 有助于觀察療效， 及時掌握手術(shù)時機。但胡曉艷等[10]對60例NEC病例研究中發(fā)現(xiàn)， NEC只有合并感染后PCT及CRP才會相應升高， 但并非所有NEC病例都合并感染， 所以檢測感染指標CRP及PCT的特異性差， 容易造成早期NEC的漏診。

本研究結(jié)果顯示， NEC組I-FABP水平為（36.09±14.78）ng/ml， 敗血癥組I-FABP水平為（22.49±14.36）ng/ml， 對照組I-FABP水平為（11.08±7.85）ng/ml。NEC組I-FABP水平高于敗血癥組和對照組， 敗血癥組I-FABP水平高于對照組， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。NEC組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（24.09±36.26）、（12.26±10.38）、（3.58±3.67）mg/L;敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平分別為（28.24±45.36）、（12.07±13.23）、（3.49±2.58）mg/L;對照組24 h內(nèi)hs-CRP水平為（2.08±0.85）mg/L。NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d、6 d hs-CRP水平比較， 差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)hs-CRP水平均高于對照組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;NEC組與敗血癥組24 h內(nèi)、3 d hs-CRP水平均高于本組6 d， 24 h內(nèi)hs-CRP水平高于本組3 d， 差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。本研究顯示dhs-CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測卻可以評估疾病的進展情況。

綜上所述， 血清I-FABP可成為NEC早期診斷的一個預測指標。雖然hs-CRP的特異性不高， 但是其血清水平的連續(xù)監(jiān)測卻可以評估疾病的進展情況， 本研究未將NEC組進行分期， 在后續(xù)的研究中可進一步測定NEC患兒不同分期的血清I-FABP水平以及其在預測病情的嚴重程度上是否存在價值。

參考文獻

[1] 丁國芳. 新生兒感染與新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎. 中國小兒急救醫(yī)學， 2017， 24（5）：330-333.

[2] 高妍， 張永宏， 李毅， 等. 脂肪酸結(jié)合蛋白研究進展. 動物醫(yī)學進展， 2007， 28（1）：64-67.

[3] Thuijls G， Derikx JP， Van WK， et al. Non-invasive markers for early diagnosis and determination of the severity of necrotizing enterocolitis. Annals of Surgery， 2010， 251（6）：1174-1180.

[4] Ng EW， Poon TC， Lam HS， et al. Gut-associated biomarkers L-FABP， I-FABP， and TFF3 and LIT score for diagnosis of surgical necrotizing enterocolitis in preterm infants. Annals of Surgery， 2013， 258（6）：1111-1118.

[5] 秦嘉麗， 韋紅， 李祿全， 等. 血清腸型脂肪酸結(jié)合蛋白在診斷新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎中的意義. 中華小兒外科雜志， 2013. 34（8）：590-594.

[6] 李粹， 任雪云， 蔡文仙， 等. 細胞因子及腸脂肪酸結(jié)合蛋白在新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎早期診斷中的價值探討. 山東醫(yī)藥， 2013， 53（14）：50-51.

[7] Pourcyrous M， Korones SB， Yang W， et al. C-reactive protein in the diagnosis， management， and prognosis of neonatal necrotizing enterocolitis. Pediatrics， 2005， 116（5）：1064-1069.

[8] 張愛梅， 孫志群， 邱曉梅， 等. PCT及CRP在新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎的早期診斷價值. 濰坊醫(yī)學院學報， 2015， 37（4）：289-291.

[9] 阿爽， 馬少春. C反應蛋白測定在壞死性小腸結(jié)腸炎中的臨床價值. 中國現(xiàn)代醫(yī)生， 2009， 47（1）：106.

[10] 胡曉艷， 周于新， 徐頌周， 等. 降鈣素原檢測在新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎中的臨床價值. 中國綜合臨床， 2016， 32（4）：325-327.

[收稿日期：2018-10-22]