結核分枝桿菌/利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增檢測與痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果比較分析

徐婧　孔維順

doi：10.3969/j .issn.1007-614x.2019.01.092摘要 目的：探討結核分枝桿菌/利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增檢測（Xpert MTB/RIF）與痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果的差異。方法：收治檢測的可疑肺結核患者30例進行Xpert MTB/RIF和痰培養(yǎng)及藥敏試驗。結果：患者30例經(jīng)過跟蹤觀察，確診肺結核21例，排除肺結核9例。痰液涂片抗酸染色：30例患者找到抗酸桿菌10例，陽性檢出率33.30A（10/30），正確診斷率47.6%（10/21）;痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果：痰培養(yǎng)陽性15例，陽性檢出率50.0%（15/30），正確診斷率71.4%（15/21），藥敏試驗利福平耐藥4例，耐藥率19.0% （4/21）。Xpert MTB/RIF：結核分支桿菌陽性21例，陽性檢出率70.0%（21/30），正確診斷率100.0%（21/21）;利福平耐藥3例，耐藥率14.3% （4/21）。結論：結核分枝桿菌/利福平耐藥Xpert MTB/RIF與痰培養(yǎng)及藥敏試驗均是診斷結核病的重要手段，Xpert MTB/RIF檢查更快速，值得臨床推廣。

關鍵詞 結核分枝桿菌;Xpert MTB/RIF：痰培養(yǎng);抗酸染色;藥敏試驗

結核病是由結核桿菌感染引起的慢性傳染病，痰液涂片抗酸染色是診斷結核病的重要依據(jù)，但是痰涂片陽性率低，結核分枝桿菌培養(yǎng)及藥敏試驗條件要求苛刻且耗時長，影響了診斷和治療。結核分枝桿菌/利福平耐藥實時熒光定量核酸擴增檢測（Xpert MTB/RIF）是一項在全球獲得廣泛認可的結核快速診斷技術[1]，近年來在臨床廣泛應用，為探討探討結核分枝桿菌/利福平耐藥XpertMTB/RIF與痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果的差異，2017年1月-2018年1月收治可疑肺結核患者30例進行Xpert MTB/RIF和痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果，現(xiàn)將結果匯報如下。

資料與方法

2017年1月-2018年1月收治可疑肺結核患者30例，對其進行Xpen MTB/RIF和痰培養(yǎng)及藥敏試驗，其中男17例，女13例，年齡15-75歲，平均（43.1±3.2）歲。所有患者均咳嗽1個月以上，咳痰，其中低熱17例、胸悶16例、黃痰14例。

方法：（1）標本的采集：對30例臨床可疑肺結核病患者收集夜間痰液、晨痰和即時痰3份，每份痰標本3 -5 mL。讓患者先用清水嗽口，用力咳出氣管深處的痰液，勿混入鼻咽分泌物。所有患者標本均進行抗酸桿菌涂片鏡檢、痰培養(yǎng)及藥敏試驗和Xpert MTB/RIF監(jiān)測。（2）抗酸桿菌涂片鏡檢：按照2012年版《中國結核病防治規(guī)劃實施工作指南》操作，即取樣制作痰涂片，用萋一那氏染色法后直接鏡檢。（3）痰培養(yǎng)及藥敏試驗：將送檢痰液用4%氫氧化鈉處理后，接種于酸性羅氏（L-J）培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)，3-7d后觀察，以后每周觀察菌落生長情況，若有菌落生長，則進行抗酸染色檢測并做藥敏試驗。（4）Xpen MTB/RIF：將送檢痰液用4%氫氧化鈉處理后，應用Xpert MTB/RIF檢測試劑盒，利用Gene Xpert儀進行檢測。

結果

檢測結果：30例患者經(jīng)過跟蹤觀察，確診肺結核21例，排除肺結核9例。痰液涂片抗酸染色：30例患者找到抗酸桿菌10例，陽性檢出率33.3% （10/30），正確診斷率47.6%（10/21）;痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果：痰培養(yǎng)陽性15例.陽性檢出率50.0%（15/30），正確診斷率71.4%（15/21），藥敏試驗利福平耐藥4例，耐藥率19.O%（4/21）。Xpert MTB/RIF：結核分支桿菌陽性21例，陽性檢出率70.O% （21/30），正確診斷率100.00-10（21/21）;利福平耐藥3例，耐藥率14.3%（4/21）。

討論

結核病是由結核分枝桿菌感染引起的危害人類健康的全球性公共衛(wèi)生問題，1882年科霍發(fā)現(xiàn)了結核病的病原菌為結核桿菌，對結核病有了新的認識，也開創(chuàng)了治療結核病的新篇章。目前，由于不正規(guī)治療等因素，導致耐多藥/廣泛耐藥結核病的出現(xiàn)和蔓延，已成為嚴重的公共衛(wèi)生和社會問題，早期診斷及發(fā)現(xiàn)其中耐藥病例是治療成功的關鍵。

傳統(tǒng)的抗酸桿菌檢查和痰結核菌培養(yǎng)及藥敏實驗由于陽性檢出率低和監(jiān)測需時較長等因素，不能適應臨床的需求。Xpen MTB/RIF檢測試劑盒為美國Cepheid公司開發(fā)的，適用于Gene Xpert儀器，可以在2h內直接時間從患者新鮮痰液或凍存痰液中檢測是否含有結核分枝桿菌及對利福平的耐藥性，整個過程都在一密閉環(huán)境中進行，手動時間短，不超過5 min，對操作者和周圍環(huán)境安全。這種檢查方法既實現(xiàn)對結核病的確診又能得出是否對利福平耐藥，檢測時間短，能快速報告[2]。

本組資料結果顯示，Xpert MTB/RIF適應疑似結核分枝桿菌感染的患者，正確診斷率高，而且可以得知是否對利福平耐藥，本組資料痰培養(yǎng)及藥敏試驗結果利福平耐藥4例，而Xpert MTB/RIF則出現(xiàn)耐藥基因而耐藥3例，說明結核分支桿菌耐藥基因的突變有個過程，雖然沒有形成基因突變，但是臨床上已經(jīng)出現(xiàn)耐藥，藥敏試驗就充分說明了這一點。另外，抗酸桿菌涂片鏡檢雖然陽性率低，但是比較經(jīng)濟，檢查方便，適應于大量排菌患者的檢查，可作為篩查的檢查手段，對于臨床疑似結核病患者，可選擇Xpen MTB/RIF檢查，快速，精準。

綜上所述，結核分枝桿菌/利福平耐藥Xpert MTB/RIF與痰培養(yǎng)及藥敏試驗均是診斷結核病的重要手段，Xpert MTB/RIF檢查勇陜速，值得臨床推廣。

參考文獻

[1] 李妍，張?zhí)烊A，鮮小萍，等.Xpen MTB/RIF技術在MTB檢測中的應用價值[J].檢驗醫(yī)學，2016，12（1）：52-55.

[2]李雪黎，溫海平，桑俊，等.Xpert MTB/RIF在肺結核及耐藥結核檢測中的應用價值分析[J].國際檢驗醫(yī)學雜志，2018，39（1）：100-102.