士酒緩解體力疲勞功能的研究

鞠鳳霞

（吉林工商學(xué)院糧食學(xué)院·吉林長(zhǎng)春·130507）

保健酒已有數(shù)千年的歷史，是中國醫(yī)藥科學(xué)的重要組成部分。中國的歷代醫(yī)藥著作中幾乎無一例外地有藥酒治疾健身的記載。保健酒作為一種傳統(tǒng)的保健食品劑型，溫而味辛，因其能養(yǎng)生健體且滿足口感嗜好而廣受歡迎[1]。本士酒選用人參、鹿茸、麥冬、肉桂、枸杞子等為主要原料，以白酒為基礎(chǔ)酒，在常溫下通過浸泡、攪拌、過濾、調(diào)配等工藝制成，其成品酒精度為35%vol。其中，人參主產(chǎn)地為我國東北地區(qū)，是現(xiàn)階段我國最為珍貴的藥材之一，有“補(bǔ)五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目開心益智”的功效，現(xiàn)代藥理研究表明，人參內(nèi)含人參皂甙，它對(duì)調(diào)節(jié)人的中樞神經(jīng)系統(tǒng)、強(qiáng)心、抗疲勞、調(diào)節(jié)物質(zhì)代謝等有明顯功效[2～4]；鹿茸用于醫(yī)療保健的歷史悠久，應(yīng)用廣泛。鹿茸對(duì)生殖系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、抗疲勞、抗腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)、骨質(zhì)疏松癥等都有一定的作用[5]。麥冬具有潤(rùn)肺清心、養(yǎng)陰生津功效?，F(xiàn)代藥理研究表明，麥冬具有增強(qiáng)免疫、抗疲勞、降血糖、抗衰老等方面的藥理作用[6]。肉桂味甘幸、性大熱。能引火歸源、溫腎助陽、溫中補(bǔ)陽、散寒止痛[7]；枸杞的生物活性成分——枸杞多糖具有調(diào)節(jié)免疫力、清除自由基、抑制腫瘤、降血脂、降血糖、降血壓及抗疲勞等作用[8]。配方中人參、鹿茸、麥冬為可用于保健食品的原料，肉桂、枸杞為藥食兩用原料，配伍安全。通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該士酒的緩解體力疲勞功能。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及儀器

受試物：某公司提供中試產(chǎn)品，受試物為20.83倍濃縮液，折成人體日服用量為：4.80mL/人/日（體重60kg計(jì)）。

動(dòng)物：選用上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司繁殖的SPF級(jí)CI/F1代健康雄性小鼠200只，生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK （滬）2013-0016，合格證編號(hào)：2008001670384。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在溫度為20～26℃、相對(duì)濕度為40%～70%的南京醫(yī)科大學(xué)衛(wèi)生分析檢測(cè)中心屏障環(huán)境中飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(蘇)2015-0009。輻照滅菌飼料由江蘇省協(xié)同醫(yī)藥生物工程有限責(zé)任公司提供，生產(chǎn)許可證：蘇飼證（2014）01008。

儀器與試劑：T-1000型電子天平、JA-2003型電子天平、JJ-100型電子天平、離心機(jī)、水浴鍋、多功能酶標(biāo)儀、SBA-40E生物傳感分析儀、游泳箱 (大小約50cm×50cm×40cm)、鉛絲、計(jì)時(shí)器。血漿尿素測(cè)定試劑盒、肝糖原測(cè)定試劑盒，均由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 劑量選擇與受試物給予方式

受試物為士酒20.83倍濃縮液，該受試樣品的人體推薦量為4.80mL/人/日（體重60kg計(jì)）。設(shè)0.40mL/kg·bw/d、0.80mL/kg·bw/d、2.40mL/kg·bw/d 三個(gè)劑量組 （分別相當(dāng)于受試樣品人體推薦攝入量的5倍、10倍、30 倍），另設(shè)一個(gè)酒基對(duì)照組（0mL/kg·bw/d）和一個(gè)空白對(duì)照組（0mL/kg·bw/d）。酒基對(duì)照組以15%的酒基代替受試物，空白對(duì)照組以無菌水代替受試物。廠家提供95%(v/v)的酒基進(jìn)行各劑量組受試物的配制，調(diào)整各劑量組的乙醇濃度為15%。低、中、高劑量配制濃度分別為4.0%、8.0%、24.0%。經(jīng)口每日一次給予小鼠相應(yīng)劑量的受試物，小鼠灌胃量為0.1mL/10g·bw。連續(xù)灌胃一個(gè)月后測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)

末次給小鼠受試物30min后，置于游泳箱中游泳，水深約35cm，水溫25℃±1℃，鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛絲。記錄小鼠自游泳開始至死亡的時(shí)間，作為小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。

1.3.2 血漿尿素測(cè)定

末次給小鼠受試物30min后，在溫度為30℃的水中不負(fù)重游泳90min，休息60min后立即眼眶采血。血液離心后，吸取20μL血漿，用二乙?！糠y(cè)定血漿尿素值。

1.3.3 肝糖原測(cè)定

末次給小鼠受試物30min后，立即處死，取肝臟經(jīng)生理鹽水漂洗后用濾紙吸干，精確稱取肝臟75mg，加入堿溶液0.225mL，煮沸20min，配制成1%肝勻漿液，取1%肝勻漿液0.1mL，加2mL蒽酮試劑，煮沸5min，冷卻后在620nm波長(zhǎng)比色測(cè)定，根據(jù)所稱取的肝臟重量計(jì)算肝糖原含量。

1.3.4 血乳酸測(cè)定

末次給小鼠受試物30min后眼眶采血。然后不負(fù)重在溫度為30℃的水中游泳10min后停止，立即眼眶采血，休息20min后再眼眶采血測(cè)定小鼠血乳酸含量。SBA-40E生物傳感分析儀測(cè)定乳酸方法：取血20μL加入40μL破膜液中，立即充分振蕩破碎細(xì)胞。直接從乳酸儀上讀數(shù)。實(shí)際值（mmoL/L）=測(cè)得值×3 1.4實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：用SPSS10.0軟件對(duì)各實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，滿足方差齊要求的數(shù)據(jù)資料用單因素方差分析方法中多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理；對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)資料進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。對(duì)非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。 兩組間的比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 士酒對(duì)小鼠體重的影響

由表1可見，基酒對(duì)照組、各劑量組小鼠的初始體重與空白對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明各組動(dòng)物的初始體重是均衡的。

基酒對(duì)照組小鼠的中期體重、結(jié)束體重與空白對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，3個(gè)劑量組小鼠的中期體重、結(jié)束體重與基酒對(duì)照組比較均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響(±s)

表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響(±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動(dòng)物數(shù)(只)Ⅰ組初始體重(g) P Ⅰ組終末體重(g)增長(zhǎng)值(g) P 0(空白對(duì)照) 10 20.65±1.12 0.918 26.91±0.87 6.26±1.56 0.883 0(酒基對(duì)照) 10 20.60±1.02 26.75±1.37 6.15±1.72 0.40 10 20.63±0.94 1.000 26.51±0.93 5.88±1.36 0.938 0.80 10 20.66±0.85 0.998 27.44±0.86 6.78±0.92 0.574 2.40 10 20.66±0.78 0.998 27.56±0.89 6.90±1.07 0.440

續(xù)表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響(±s)

續(xù)表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響(±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動(dòng)物數(shù)(只)Ⅱ組初始體重(g) P Ⅱ組終末體重(g)增長(zhǎng)值(g) P 0(空白對(duì)照) 10 20.66±1.11 0.950 27.44±1.25 6.78±1.58 0.595 0(酒基對(duì)照) 10 20.63±1.00 27.05±1.16 6.42±1.38 0.40 10 20.62±0.93 1.000 26.49±1.18 5.87±1.57 0.727 0.80 10 20.65±0.84 1.000 26.72±1.53 6.07±1.25 0.906 2.40 10 20.66±0.78 1.000 26.91±1.23 6.25±1.53 0.987

續(xù)表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響(±s)

續(xù)表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響(±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動(dòng)物數(shù)(只)Ⅱ組初始體重(g) P Ⅱ組終末體重(g)增長(zhǎng)值(g) P 0(空白對(duì)照) 10 20.65±1.08 0.914 27.54±1.24 6.89±1.73 0.595 0(酒基對(duì)照) 10 20.60±0.95 27.08±1.41 6.48±1.65 0.40 10 20.66±0.87 0.997 26.99±1.41 6.33±1.71 0.994 0.80 10 20.63±0.77 1.000 27.03±1.54 6.40±1.64 0.999 2.40 10 20.64±0.77 0.999 26.31±1.38 5.67±1.70 0.575

續(xù)表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響 (±s)

續(xù)表1 士酒對(duì)小鼠體重的影響 (±s)

劑量(mL/kg·bw/d)動(dòng)物數(shù)(只)Ⅱ組初始體重(g) P Ⅱ組終末體重(g)增長(zhǎng)值(g) P 0(空白對(duì)照) 10 20.63±1.04 0.964 27.05±1.40 6.42±1.91 0.721 0(酒基對(duì)照) 10 20.61±0.94 27.31±1.14 6.70±1.51 0.40 10 20.63±0.85 1.000 26.58±1.30 5.95±1.35 0.444 0.80 10 20.64±0.77 1.000 26.97±0.87 6.33±1.03 0.863 2.40 10 20.64±0.73 1.000 26.53±1.28 5.89±1.31 0.383

2.2 士酒對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響

由表2可見，空白對(duì)照小鼠負(fù)重游泳時(shí)間與酒基對(duì)照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。高劑量組小鼠負(fù)重游泳時(shí)間顯著長(zhǎng)于酒基對(duì)照組（P＜0.05）。

表2 士酒對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(±s)

表2 士酒對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響(±s)

（m L/k g·b w/d）動(dòng)物數(shù)(只) 負(fù)重游泳時(shí)間(秒) P 劑量0(空白對(duì)照) 1 0 4 6 1±1 3 2 0.3 5 9 0(酒基對(duì)照) 1 0 5 1 0±9 6 0.4 0 1 0 5 2 4±1 1 3 0.9 9 1 0.8 0 1 0 6 2 7±1 8 6 0.1 5 8 2.4 0 1 0 6 7 2±1 3 8 0.0 3 2

2.3 士酒對(duì)小鼠游泳后血漿尿素水平的影響

由表3可見，空白對(duì)照小鼠血漿尿素水平與酒基對(duì)照組比較無顯著差異 (P＞0.05)。低、中、高劑量組小鼠血漿尿素水平顯著低于酒基對(duì)照組(P＜0.05)。

表3 士酒對(duì)小鼠游泳后血漿尿素的影響(±s)

表3 士酒對(duì)小鼠游泳后血漿尿素的影響(±s)

（m L/k g·b w/d）動(dòng)物數(shù)(只) 血 漿 尿 素劑量(m m o l/L) P值0(空白對(duì)照) 1 0 9.9 5±1.0 1 0.6 6 8 0(酒基對(duì)照) 1 0 9.7 7±0.8 6 0.4 0 1 0 8.5 3±0.9 3 0.0 0 8 0.8 0 1 0 7.7 3±0.9 4 0.0 0 0 2.4 0 1 0 8.4 5±0.7 6 0.0 0 5

2.4 士酒對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響

由表4可見，空白對(duì)照小鼠肝糖原儲(chǔ)備量與酒基對(duì)照組比較無顯著差異 (P＞0.05)。高劑量組小鼠肝糖原儲(chǔ)備量顯著高于酒基對(duì)照組(P＜0.05)。2.5士酒對(duì)小鼠游泳前后血乳酸值及其曲線下面積的影響

表4 士酒對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響(±s)

表4 士酒對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響(±s)

（m L/k g·b w/d）動(dòng)物數(shù)(只) 肝 糖 原劑量(m g/g肝) P值0(空白對(duì)照) 1 0 2 5.4±3.5 0.5 0 9 0(酒基對(duì)照) 1 0 2 3.7±6.9 0.4 1 0 2 1.6±3.9 0.6 6 3 0.8 0 1 0 2 9.2±5.9 0.0 5 0 2.4 0 1 0 3 2.3±1.7 0.0 0 1

由表5可見，空白對(duì)照小鼠游泳后血乳酸曲線下面積值與酒基對(duì)照組比較無顯著差異(P＞0.05)。中劑量組小鼠游泳后血乳酸曲線下面積值顯著低于酒基對(duì)照(P＜0.05)。

表5 士酒對(duì)小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲線下面積的影響(±s)

表5 士酒對(duì)小鼠游泳后血乳酸(mmol/L)曲線下面積的影響(±s)

劑量（m L/k g·b w/d）動(dòng)物數(shù)(只)安靜血乳酸值運(yùn)動(dòng)后0分鐘血乳酸值運(yùn)動(dòng)后休息2 0分鐘血乳酸值血乳酸曲線下面積值 P值0(空白對(duì)照) 1 0 1.9 9±0.7 3 4.0 0±0.5 8 3.0 1±1.1 6 1 0 0±1 8 0.2 9 3 0(酒基對(duì)照) 1 0 1.7 8±0.5 4 3.7 3±0.7 5 2.6 9±0.4 8 9 2±1 6 0.4 0 1 0 1.6 7±0.7 5 3.3 4±0.6 1 2.0 8±0.2 8 7 9±8 0.0 6 8 0.8 0 1 0 1.3 0±0.4 3 3.0 3±0.6 1 2.1 0±0.3 3 7 3±1 1 0.0 0 4 2.4 0 1 0 1.7 0±0.4 8 3.0 8±0.8 3 2.4 8±0.6 1 7 9±1 2 0.0 7 4

3 討論

體力疲勞即運(yùn)動(dòng)性疲勞，運(yùn)動(dòng)耐力的提高是抗疲勞能力加強(qiáng)的最直接表現(xiàn)，負(fù)重游泳時(shí)間是反映動(dòng)物運(yùn)動(dòng)耐力的重要指標(biāo)[9]。士酒可以顯著地延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳的時(shí)間，說明其具有提高運(yùn)動(dòng)耐力的作用；低、中、高劑量組小鼠血漿尿素水平顯著降低；可以增加小鼠肝糖原的儲(chǔ)備量，降低劇烈體力勞動(dòng)后糖原的消耗；乳酸是糖無氧酵解的產(chǎn)物，長(zhǎng)時(shí)間劇烈運(yùn)動(dòng)使體內(nèi)乳酸堆積而引起運(yùn)動(dòng)性疲勞，運(yùn)動(dòng)停止后糖酵解停止，乳酸被不斷清除，血乳酸則逐漸降低，疲勞得以恢復(fù)。因此，血乳酸水平也是反映機(jī)體疲勞程度的重要指標(biāo)。中劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸含量顯著降低，說明士酒能減少運(yùn)動(dòng)時(shí)動(dòng)物血乳酸的堆積。綜上可知，士酒具有緩解體力疲勞的作用。