4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)小菜蛾及半閉彎尾姬蜂的選擇毒力

盧晶晶，賈變桃，安顥敏，白梅，武國帥，許開南，張諾，閆建全，張嘉倩

(山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 農(nóng)學(xué)院，山西 太谷 030801)

小菜蛾(PlutellaxylostellaLinnaeus)是一種危害白菜、甘藍(lán)、油菜等十字花科蔬菜的世界性遷飛害蟲。具有繁殖能力強(qiáng)、年發(fā)生代數(shù)多、世代重疊嚴(yán)重等特點(diǎn)，單一使用化學(xué)防治致使其抗藥性嚴(yán)重，防治難度加大[1]。近年來，利用生物防治以及與生物防治相適應(yīng)的農(nóng)藥進(jìn)行綜合防治的措施在有害生物的防治中受到越來越多的關(guān)注[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)可以防治小菜蛾的生物類群有100多種，包括寄生性天敵、捕食性天敵和病原微生物、原蟲、線蟲等,其中對(duì)小菜蛾有明顯控制作用的是寄生蜂[3]。半閉彎尾姬蜂(DiadegmasemiclausumHellen)是一種寄生小菜蛾幼蟲的寄生蜂，起源于歐洲，其田間寄生率可高達(dá)74.7%,被許多國家和地區(qū)引進(jìn)用于小菜蛾的防治[4～6]。

魚尼丁受體殺蟲劑是一類作用于昆蟲魚尼丁受體(Ryanodine receptor，RyR)的新型殺蟲劑，可以使昆蟲細(xì)胞內(nèi)鈣離子大量釋放，導(dǎo)致肌肉松馳性麻痹、癱瘓，最終死亡[7]。作為一種對(duì)鱗翅目害蟲高效、對(duì)人畜低毒、與其它殺蟲劑無交互抗性的廣譜殺蟲劑，投入市場便得到迅速推廣。目前已上市的魚尼丁受體殺蟲劑主要有氟苯蟲酰胺、氯蟲苯甲酰胺、溴氰蟲酰胺和四氯蟲酰胺。然而魚尼丁受體殺蟲劑的大量使用也對(duì)環(huán)境非靶標(biāo)生物造成了一定的負(fù)面影響，林濤等[8]研究表明氟苯蟲酰胺、氯蟲苯甲酰胺、溴氰蟲酰胺對(duì)大型溞和家蠶的急性毒力均為劇毒。其它研究表明魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)小菜蛾幼蟲高效[9～11]，但對(duì)小菜蛾幼蟲期寄生蜂半閉彎尾姬蜂的毒力尚不明確。本研究測定了4種魚尼丁受體殺蟲劑氟苯蟲酰胺、氯蟲苯甲酰胺、溴氰蟲酰胺和四氯蟲酰胺對(duì)小菜蛾及其天敵半閉彎尾姬蜂的毒力，評(píng)價(jià)這4種殺蟲劑在小菜蛾和寄生蜂之間的選擇性，為魚尼丁受體殺蟲劑在田間的安全應(yīng)用及小菜蛾綜合治理提供一定理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試?yán)ハx

小菜蛾于2012年10月采集于太谷縣郊區(qū)蔬菜地，在室內(nèi)以未接觸農(nóng)藥的新鮮甘藍(lán)葉飼養(yǎng)。飼養(yǎng)條件：溫度(25±2)℃、相對(duì)濕度70%左右、光周期14(L)∶10(D)。

半閉彎尾姬蜂于2013年5月采集于太谷縣郊區(qū)甘藍(lán)田被寄生的小菜蛾幼蟲，帶回室內(nèi)飼養(yǎng)羽化成蜂后，以室內(nèi)小菜蛾幼蟲飼養(yǎng)。飼養(yǎng)溫度(22±2)℃，相對(duì)濕度和光周期同小菜蛾。

1.1.2 供試藥劑 4種魚尼丁受體殺蟲劑信息

供試藥劑及田間推薦濃度如表1所示。

表1 供試藥劑及田間推薦濃度Table 1 Information of insecticides and field recommended concentrations

1.2 生物測定方法

1.2.1 殺蟲劑對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的毒力測定

參照賈變桃等[12]的浸葉法。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果，將各供試殺蟲劑用清水等比稀釋成5～7個(gè)濃度梯度，以清水作為對(duì)照，所有測定溶液均加入0.02%的Triton X-100。將剪成大小一致的新鮮甘藍(lán)葉片在不同濃度的藥液中浸20 s，自然晾干后放入墊有保濕濾紙的塑料培養(yǎng)皿(d=6.5 cm)中。每皿接入小菜蛾3齡幼蟲10頭，每處理重復(fù)3次。48 h更換新鮮葉片，72 h 后統(tǒng)計(jì)死亡率，以幼蟲不能正常爬行、蟲體明顯發(fā)黑變形、小于對(duì)照蟲體的1/2為死亡。

1.2.2 殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂成蟲的毒力測定

參照洪珊珊等[13]的試管藥膜法。跟據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果，將各供試殺蟲劑用清水等倍稀釋成5～7個(gè)濃度梯度，以清水作為對(duì)照，所有測定溶液均加入0.02%的Triton X-100。將不同濃度的藥液倒入試管(2 cm×8 cm)，停留10 s后在室溫下懸掛晾干，試管底部放置一個(gè)含10%糖水的棉花球供成蜂補(bǔ)充營養(yǎng)。每試管接入6～8頭羽化1～3 d的成蜂，每個(gè)處理重復(fù)4次。24 h后統(tǒng)計(jì)死亡率，以成蜂不能正常爬行或飛行為死亡。

1.2.3 殺蟲劑田間推薦濃度對(duì)半閉彎尾姬蜂成蜂和蛹的活性測定

成蜂的毒力測定采用上述的試管藥膜法。蛹的測定采用浸漬法，參照賈變桃等[14]的方法進(jìn)行測定，統(tǒng)計(jì)蛹的羽化率及羽化成蜂24 h存活率。

1.3 數(shù)據(jù)處理

毒力測定結(jié)果采用PoloPlus 1.0軟件計(jì)算斜率(b)±標(biāo)準(zhǔn)誤、LC50值及其95%的置信區(qū)間。

當(dāng)STR<1時(shí)，表明殺蟲劑具有負(fù)向選擇性；當(dāng)STR=1時(shí)，表明殺蟲劑沒有明顯的選擇性；當(dāng)11 000時(shí)，表明殺蟲劑具有強(qiáng)烈正向選擇性[13]。

殺蟲劑田間推薦濃度對(duì)寄生蜂成蜂和蛹的活性測定數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件處理，計(jì)算均值及標(biāo)準(zhǔn)誤，采用Duncan氏新復(fù)極差法比較各處理之間是否存在顯著性差異(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺蟲劑對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的毒力

4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)小菜蛾3齡幼蟲毒力順序?yàn)樗穆认x酰胺>溴氰蟲酰胺>氯蟲苯甲酰胺>氟苯蟲酰胺。四氯蟲酰胺與溴氰蟲酰胺的毒力相對(duì)較高，LC50分別為0.248、0.433 mg·L-1；氯蟲苯甲酰胺與氟苯蟲酰胺對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的毒力相對(duì)較低，LC50分別為2.563、2.997 mg·L-1(表2)。

表2 4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的毒力Table 2 Toxicity of four ryanodine receptor insecticides to 3 rd larvae of P. xylostella

2.2 殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂成蜂的毒力

4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂成蟲的毒力順序?yàn)殇迩柘x酰胺>四氯蟲酰胺>氯蟲苯甲酰胺>氟苯蟲酰胺。溴氰蟲酰胺對(duì)半閉彎尾姬蜂成蜂毒力最高，LC50值為5.600 mg·L-1，其次為四氯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺，分別為51.310和121.256 mg·L-1，氟苯蟲酰胺對(duì)半閉彎尾姬蜂的毒力最低，LC50>2 000 mg·L-1(表3)。

2.3 殺蟲劑對(duì)小菜蛾與半閉彎尾姬蜂的選擇毒力

4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)小菜蛾與半閉彎尾姬蜂的選擇毒力指數(shù)大小順序依次為氟苯蟲酰胺>四氯蟲酰胺>氯蟲苯甲酰胺>溴氰蟲酰胺。氟苯蟲酰胺的選擇毒力指數(shù)最高，大于667.3，四氯蟲酰胺的選擇毒力指數(shù)為206.8，這2種殺蟲劑都具有高度正向選擇性；氯蟲苯甲酰胺與溴氰蟲酰胺的選擇毒力指數(shù)分別為47.3和12.9，具中度正向選擇性。說明在一定程度上，這4種殺蟲劑對(duì)小菜蛾3齡幼蟲的毒力大于對(duì)半閉彎尾姬蜂成蜂的毒力(表4)。

2.4 殺蟲劑田間推薦濃度對(duì)小半閉彎尾姬蜂成蜂和蛹的生物活性

4種魚尼丁受體殺蟲劑田間推薦濃度對(duì)半閉彎尾姬蜂蛹的羽化沒有明顯影響，對(duì)羽化后24 h成蜂存活率也無明顯影響。但在田間推薦濃度下，溴氰蟲酰胺顯著降低半閉彎尾姬蜂成蜂的存活率，處理24 h存活率只有3.13%，其次為四氯蟲酰胺和氯蟲苯甲酰胺，存活率分別為54.91%和56.70%，氟苯蟲酰胺田間推薦濃度對(duì)寄生蜂成蜂最安全，其存活率與對(duì)照沒有顯著差別(表5)。

表3 4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂成蟲的毒力Table 3 Toxicity of 4 ryanodine receptor insecticides to adults of D. semiclausum

表4 4種魚尼丁受體殺蟲劑對(duì)小菜蛾與半閉彎尾姬蜂的選擇毒力Table 4 Selective toxicity of 4 ryanodine receptor insecticides to D.semiclausum and P.xylostella

表5 4種魚尼丁受體殺蟲劑田間推薦濃度對(duì)半閉彎尾姬蜂成蜂和蛹的活性/%Table 5 Activity of 4 ryanodine receptor insecticides to the adults and pupae of D. semiclausum

注：同列不同小寫字母表示在P<0.05水平上差異顯著。

Note: Different lowercase letters in the same column indicate significant differences at theP<0.05 level.

3 討論與結(jié)論

本研究表明，氟苯蟲酰胺和四氯蟲酰胺具有高度正向選擇性，氯蟲苯甲酰胺與溴氰蟲酰胺具中度正向選擇性，這說明這4種殺蟲劑對(duì)小菜蛾的毒力大于對(duì)寄生蜂的毒力。從選擇毒力指數(shù)來看，氟苯蟲酰胺最高，對(duì)寄生蜂最安全，其田間推薦濃度對(duì)寄生蜂成蜂和蛹的生物活性測定結(jié)果也證明這一殺蟲劑對(duì)小菜蛾高效而對(duì)半閉彎尾姬蜂安全。盡管四氯蟲酰胺、氯蟲苯甲酰胺和溴氰蟲酰胺均具有正向選擇性，但這3種殺蟲劑田間推薦濃度對(duì)寄生蜂成蜂的存活均有一定的副作用，特別是溴氰蟲酰胺，成蜂24 h存活率只有3.13%。因此具有正向選擇性的殺蟲劑不一定對(duì)寄生蜂安全，還需要考慮田間實(shí)際用藥劑量對(duì)天敵的影響。4種殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂的蛹的羽化均無影響，表明寄生蜂蛹比成蜂對(duì)殺蟲劑的耐藥性更強(qiáng)，這在殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂成蜂和蛹的安全性研究中也證明了這一點(diǎn)[15]。

綜合考慮4種殺蟲劑對(duì)半閉彎尾姬蜂的毒力及與小菜蛾之間的選擇毒力，氟苯蟲酰胺選擇性最強(qiáng)，對(duì)寄生蜂最安全，可作為小菜蛾綜合治理的理想藥劑，而其它3種殺蟲劑，由于對(duì)成蜂具有一定的殺傷力，可適當(dāng)調(diào)整用藥時(shí)間，選擇在寄生蜂的蛹期施藥，避開成蜂羽化高峰期，從而起到保護(hù)天敵的作用。