郭 尚 徐莉娜, 李艷婷 周 偉 陳楠 張生萬 李銀生
(1山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所,山西太原030031;2山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山西太原030006;3山西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,山西臨汾041000;4山西省太原市陽曲縣農(nóng)委,山西太原030100)
蛹蟲草(Cordyceps militaris),別稱北蟲草,與野生冬蟲夏草同屬肉座菌目(Hypocreales)[1]。蛹蟲草在我國吉林省長白山以北地區(qū)以及遼寧、陜西、廣西、福建、甘肅等地均有發(fā)現(xiàn);國外主要分布在法國、德國、英國、美國以及加拿大等地。蛹蟲草營養(yǎng)價值豐富,富含多種活性物質(zhì),如蟲草素、蟲草酸、多糖、多酚、氧化酶、腺苷等,在抑制腫瘤、抗疲勞、提高人體免疫力等方面起到重要作用[2,3]。通過對比分析蛹蟲草與冬蟲夏草的化學(xué)成分及營養(yǎng)價值,結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者化學(xué)成分相近,而且蛹蟲草的蟲草素、硒元素、維生素等對人體有益成分含量高于傳統(tǒng)冬蟲夏草,可替代冬蟲夏草進(jìn)行生產(chǎn)和消費(fèi)[4]。
桑蠶(Bombyxmori),即家蠶,屬于鱗翅目蠶蛾科,是一種吐絲昆蟲。桑蠶蛹是桑蠶吐絲上蔟結(jié)繭后經(jīng)過4 d左右形成的紡錘形蛹體。以桑蠶蛹為基質(zhì)栽培蟲草,是代料栽培獲取蟲草子實(shí)體的有效途徑之一,介于蛹體本身的營養(yǎng)價值,桑蠶蛹蟲草較別的代料栽培子實(shí)體營養(yǎng)價值更高[5,6],且培育技術(shù)更易于掌握。
蟲草菌屬中低溫菌,人工栽培季節(jié)可選在春季和秋季。栽培時期選擇一般需滿足以下條件:一是選擇當(dāng)?shù)仄骄鶜鉁?2℃左右時為接種期,二是選擇從接種開始算起的一個月以后的日期為出草期,出草期平均氣溫15℃左右為宜。符合這兩個條件的
時期即可作為栽培季節(jié)。
發(fā)菌室環(huán)境條件要符合光照強(qiáng)度不超過60 lx,溫度20~22℃,室內(nèi)空氣相對濕度65%~70%,二氧化碳(CO2)濃度0.05%~0.03%。
出草室環(huán)境條件要符合光照強(qiáng)度200~400 lx,溫度23℃左右,室內(nèi)空氣相對濕度75%左右。
栽培床選用不銹鋼材質(zhì)。栽培床規(guī)格:床架共4層,長6 m,寬1.1 m,層高0.5 m,底層床距離地面0.3 m。具體床體結(jié)構(gòu)可依據(jù)栽培容器與栽培場地作適當(dāng)調(diào)整。
蛹蟲草菌種可以自行組織分離得到或者到權(quán)威科研機(jī)構(gòu)購買。栽培用種,應(yīng)選擇速生、高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)菌種。
圖1 蛹蟲草母種及液體菌種
3.1.1 母種制作
PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,瓊脂15~20 g,自 來 水 1000 mL,自 然 pH。 制 作 參 照文獻(xiàn)[7]。
圖2 蛹蟲草培育
3.1.2 液體菌種制作
培養(yǎng)基配方:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,蛋白胨1.5 g,KH2PO41.5 g,自來水 1000 mL,自然pH。
制作過程:培養(yǎng)基配制過程同母種培養(yǎng)基一致。培養(yǎng)基配制好后裝入250 mL三角瓶,裝液量150 mL,棉塞封口、包牛皮紙或防潮紙,121~126℃滅菌,時間30 min。滅菌完成后,將母種接種于三角瓶中,靜置24 h,25℃恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng),120 r/min,培養(yǎng)3~5 d,選取菌球圓潤,液體培養(yǎng)基顏色透明無渾濁無異味的液體菌種,4℃保存?zhèn)溆肹7]。
選用500 mL或750 mL罐頭瓶或20 cm×20 cm耐高溫高壓的塑料盒作為栽培容器,高壓蒸汽滅菌后備用。
3.3.1 接種室(箱)消毒
將已滅菌并冷卻的培養(yǎng)基、接種工具、酒精燈、支架、酒精棉球、打火機(jī)等放入接種室(箱)內(nèi),接種室開啟紫外線燈,照射消毒30 min,或用菌室煙霧消毒劑,噴后密閉30 min[7]。
3.3.2 接種方法
接種時蠶蛹現(xiàn)削,選取顏色鮮亮的活體蠶蛹,并用酒精棉擦拭蠶蛹表面消毒。在接種室內(nèi),采用接種槍于蠶蛹頭腹部相連的中心點(diǎn)注入0.3~0.5 mL液體菌種,接種完成后慢慢放入栽培瓶,一瓶10個蛹體;若采用栽培盒,蠶蛹在盒子里平行排列,不翻滾,瓶口用透氣膜封上[7]。
接種后菌瓶或菌盒上架,避光培養(yǎng),發(fā)菌室溫度20~22℃,室內(nèi)空氣相對濕度65%~70%,適當(dāng)打開門窗,以保證培養(yǎng)室內(nèi)空氣清新,二氧化碳(CO2)0.05%~0.03%。培養(yǎng)期間應(yīng)勤檢查,發(fā)現(xiàn)有感染雜菌的蠶蛹要及時剔除。當(dāng)蛹體有菌絲分布發(fā)白時,可在封口膜上扎5~8個小孔,扎孔前發(fā)菌室要消毒,以防雜菌侵入孔內(nèi)。約15 d左右菌絲長透蛹體,轉(zhuǎn)入下一階段管理[7]。
當(dāng)菌絲長滿蛹體并在表面出現(xiàn)一些小隆起時,表明菌絲的營養(yǎng)生長階段已經(jīng)結(jié)束,此時將栽培瓶或栽培盒轉(zhuǎn)入出草室,增加光照,促進(jìn)轉(zhuǎn)色。每天需給予200~400 lx,12~14 h的散射光照射,白天可將房間的窗簾拉開,充分利用自然光。溫度23℃左右,室內(nèi)空氣相對濕度75%左右,保持良好的通氣條件,促進(jìn)菌絲轉(zhuǎn)色,維持3~5 d即可出現(xiàn)橘黃色的原基[7]。
菌絲轉(zhuǎn)色后適當(dāng)降溫到20℃左右,白天自然光照射,空氣相對濕度提至80%以上,適當(dāng)通風(fēng),保持空氣清新,促進(jìn)原基分化。子座形成之后,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)調(diào)整光源方向,保證子座受光均勻。
當(dāng)子座長到5~8 cm,表面有橘黃色粉狀物出現(xiàn)時,即表示蟲草成熟可采收。采收時,用竹鑷子從栽培容器內(nèi)取出蟲草。
采下的蛹蟲草整齊排放于烘盤內(nèi),50~55℃烘箱或烘干室通風(fēng)排濕干燥。
將干燥后的蛹蟲草按照長度、粗細(xì)、色澤不同分級包裝。包裝好的蛹蟲草應(yīng)放在干燥通風(fēng)、避光潔凈的架子上貯藏。
青霉病防治:接種室、培養(yǎng)室用菌室噴煙霧消毒劑,噴后密閉24~48 h;接種時,接種室要保持干燥、低溫;菌種和栽培瓶或栽培盒發(fā)現(xiàn)污染立即棄除,并噴灑40%的多菌靈200倍藥液;控制適宜的培養(yǎng)室溫、濕度,加強(qiáng)通風(fēng)換氣[7]。
木霉病防治:除采用青霉的防治方法外,當(dāng)出現(xiàn)木霉污染時要及時處理污染源,并噴灑石灰水。
螨類:螨類主要危害菌絲,可用蟲螨凈噴殺。
果蠅類:保持培養(yǎng)室內(nèi)外的清潔衛(wèi)生,隨時清除廢料;培養(yǎng)室的通風(fēng)口和門窗要安裝防蟲紗窗;培養(yǎng)料要滅菌徹底;接種室、培養(yǎng)室使用前要熏蒸;黑光燈誘殺[7]。