保鮮參對小鼠耐缺氧、抗疲勞作用的影響

滕 坤，張一鵬，雷家寶，張海豐

人參是一種名貴的藥材，歷來被視為百草之王，味甘略苦，具有強身壯體的作用［1］.多年來，各國研究學者對人參進行了廣泛的藥理研究、臨床監(jiān)察和流行病的調(diào)查，證實了人參具有提高學習記憶，刺激垂體-腎上腺皮質(zhì)系統(tǒng)，降低血糖并能調(diào)節(jié)體內(nèi)的能量代謝等作用［2-3］.除此之外，人參具有提高機體適應(yīng)性，促進機體免疫功能，抑制血小板凝集，抗溶血、抗血栓及增強機體造血功能等多項現(xiàn)代藥理作用［4］.然而，在應(yīng)用過程中發(fā)現(xiàn)，人參也有一定的不良反應(yīng)，比如在服用人參的過程中可能會有血壓升高、供血不足、鼻衄、精神異常興奮、煩躁不安、失眠多夢等不良反應(yīng)發(fā)生［5］.所以人參通常炮制加工后使用，以減少其不良反應(yīng)，增強其某方面藥理作用.保鮮參是應(yīng)用現(xiàn)代食品保鮮技術(shù)，加工而成的人參炮制品種之一，具有鮮參的優(yōu)良品質(zhì)，同時較鮮人參儲存的時間長［6］.本文通過相關(guān)實驗來探討保鮮參對小鼠耐缺氧、抗疲勞作用的影響，為今后的醫(yī)藥學研究奠定一定的基礎(chǔ).

1 實驗儀器與材料

1.1 動物

昆明種小鼠，雌雄各半，體重（20±2）g，由遼寧長生生物技術(shù)有限公司提供，SPF級，許可證號：SCXK（遼）2015-0001.

1.2 藥品

人參（吉林省通化市長白山人參市場），鈉石灰（上海鈉石灰批發(fā)市場），亞硝酸鈉（上海翔悅實業(yè)有限公司）.

1.3 儀器

廣口瓶，ZB-200疲勞轉(zhuǎn)棒儀（成都泰盟軟件有限公司），不銹鋼式水桶，負重物（鉛絲，按小鼠體重使用）.

2 方法與結(jié)果

2.1 保鮮參的制備

將外形完好、無破損的鮮人參人工刷洗干凈，刷洗好后稍加晾曬，而后進行熏硫，目的是將人參漂白護色、殺滅細菌，然后將人參放入90～100℃水中漂燙4～6s，使人參細胞失活和脫硫，將漂燙好的人參立刻放入冷水中冷卻，冷卻到35℃以下后撈出晾干水分，放入預(yù)先配置好的保鮮液中浸泡，備用［7］.

2.2 保鮮參供試液的制備

取出并瀝干人參表面的保鮮液，低溫烘干，粉碎后過100目篩［8-9］，加蒸餾水將其配制成濃度為0.08g·mL-1和0.20g·mL-1的混懸液.

2.3 實驗方法與結(jié)果

隨機選取小鼠30只，再隨機分成三組，即空白對照組、低劑量組、高劑量組，每組10只，按0.2mL 10g-1體重灌胃給水和對應(yīng)藥物，連續(xù)灌胃給藥15天，第16天，末次給藥1小時，然后進行分類實驗.結(jié)果見表1.

表1 保鮮參對小鼠常壓耐缺氧能力的影響

（1）亞硝酸鈉中毒存活實驗.亞硝酸鈉中毒后會麻痹呼吸中樞及周圍血管，導致胸部緊迫感及呼吸困難［10］，所以對事先灌胃過保鮮參混懸液的小鼠進行亞硝酸鈉中毒實驗，記錄小鼠中毒存活時間可考察保鮮參對小鼠的耐缺氧作用.

分組處理同上.對小鼠進行腹腔注射亞硝酸鈉，劑量為180～220mg·kg-1，注射量為0.1mL·10g-1，立即計時，記錄小鼠中毒后存活時間［11］.與空白組比較，保鮮參低、高劑量組均能明顯延長小鼠亞硝酸鈉中毒后的存活時間，結(jié)果見表2.

表2 保鮮參對小鼠亞硝酸鈉中毒存活時間的影響

（2）疲勞轉(zhuǎn)棒儀實驗.分組處理同上.將每組小鼠分別放在轉(zhuǎn)棒儀上，待小鼠肌肉處于靜力緊張狀態(tài)［12］，開始進行疲勞轉(zhuǎn)棒試驗，轉(zhuǎn)速設(shè)定為30rpm.每組小鼠進行實驗前對其進行適當?shù)挠柧?，小鼠在轉(zhuǎn)棒儀上跌落3次后，開始記錄小鼠由于肌肉疲勞從轉(zhuǎn)棒儀上跌落下的時間，平行3次.觀察每組小鼠跌落下的時間，結(jié)果顯示，與空白組相比，保鮮參低、高劑量組均能明顯延長小鼠在轉(zhuǎn)棒儀上停留的時間，結(jié)果見表3.

表3 保鮮參對小鼠轉(zhuǎn)棒耐力時間的影響

（3）小鼠負重游泳實驗.分組處理同上.每只小鼠的尾部系以負重物，重量按小鼠體重的10%計算［13］.將小鼠放入深度25cm、溫度30℃左右水溫的浴槽中游泳［14］，記錄每只小鼠自入水后到沉入水底不再掙扎的時間.結(jié)果顯示，與空白組比較，保鮮參低、高劑量組均能明顯延長小鼠的負重游泳時間，結(jié)果見表4.

表4 保鮮參對小鼠負重游泳時間的影響

3 結(jié)論與討論

人參在美國、日本、韓國等國家作為食品應(yīng)用.韓國是人參加工炮制、生產(chǎn)的主要國家.各國對人參及人參復方制劑的臨床應(yīng)用較為廣泛，如高血壓、糖尿病、腫瘤、腎臟疾病、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病等.日本常用的含有人參的方劑有人參湯、四君子湯、補中益氣湯等.在美國，人參在藥草專賣店或綠色食品連鎖店整根銷售或者以提取液、粉末的形式用于健康補助食品，或一般食品、飲料類、化妝品的添加物.但是，目前吉林省尚未開展地道藥材產(chǎn)地鮮加工、炮制及其產(chǎn)品的研究開發(fā)一體化研究、開發(fā)和管理.

通過常壓耐缺氧實驗、亞硝酸鈉中毒存活實驗結(jié)果表明：保鮮參的高、低劑量組均能明顯延長小鼠在缺氧環(huán)境中的存活時間，表明其具有良好的耐缺氧作用，實驗結(jié)果具有顯著性差異.缺氧是指因組織的氧氣供應(yīng)不足或用氧障礙，而導致組織的代謝、功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生異常變化的病理過程.尤其是影響機體的氧化功能，心、腦等主要器官缺氧而供能不足也是導致死亡的重要原因.在缺氧環(huán)境下，生物體內(nèi)自由基代謝會發(fā)生一系列的變化，表現(xiàn)為抗氧化能力下降和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)增強，嚴重危害生物體的健康.通過小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒儀實驗、小鼠負重游泳實驗可知，保鮮參的高、低劑量組均能明顯延長小鼠疲勞轉(zhuǎn)棒時間和負重游泳時間，表明其具有良好的抗疲勞作用，實驗結(jié)果具有顯著性差異.疲勞是生物體腦力或體力活動到一定的階段時必然出現(xiàn)的一種生理現(xiàn)象，早在1976年美國疾病控制中心就對慢性疲勞綜合癥下了定義，據(jù)2000—2012年的調(diào)查結(jié)果顯示，我國10萬人中就有1.2萬人患有至少長達6個月的慢性疲勞綜合癥，因此研究如何延緩或消除疲勞、如何延長機體耐缺氧時間具有十分重要的意義.