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    高中生物學(xué)“酸奶的制作”實(shí)驗(yàn)教學(xué)探究*

    2019-06-15 01:33:40
    生物學(xué)通報(bào) 2019年2期
    關(guān)鍵詞:乳糖碳源蔗糖

    陳 亮 溫 馨

    (成都石室中學(xué) 四川成都 610041)

    1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/h2>

    課程標(biāo)準(zhǔn)中的教學(xué)提示, 教師既要使用講授演示的方式進(jìn)行教學(xué), 更要為學(xué)生提供實(shí)驗(yàn)條件及必要的參考資料,指導(dǎo)其設(shè)計(jì)和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

    利用微生物制作傳統(tǒng)發(fā)酵食品是對(duì)學(xué)生的一個(gè)技能要求,對(duì)比現(xiàn)在使用的選修1 教材,學(xué)校還未開展利用乳酸菌制作酸奶的實(shí)驗(yàn)。因此,針對(duì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了前期的探索, 試圖找到一整套適合班級(jí)教學(xué)的實(shí)驗(yàn)實(shí)施方案。

    首先,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作的目的是讓學(xué)生理解“利用微生物的特定功能規(guī)?;a(chǎn)對(duì)人類有用的產(chǎn)品”這一教學(xué)目標(biāo)。 針對(duì)乳酸菌的特點(diǎn),教師設(shè)置了更為細(xì)化的探究目標(biāo),例如探究空氣(氧氣)、溫度、發(fā)酵時(shí)間、碳源種類對(duì)乳酸菌的代謝影響等。其次,對(duì)于實(shí)驗(yàn)還需要考慮其他的因素,例如:時(shí)間的長短(操作部分盡量能在1 課時(shí)完成,發(fā)酵過程盡量能讓學(xué)生充分觀察);班級(jí)人數(shù)與本校實(shí)驗(yàn)設(shè)備的沖突; 實(shí)驗(yàn)過程中如何調(diào)動(dòng)和培養(yǎng)學(xué)生的探索與協(xié)作能力等。 最后,可以增加一個(gè)讓學(xué)生相互盲品的活動(dòng), 既可以體驗(yàn)食品制作過程中對(duì)酸奶口感的要求,又可以讓學(xué)生之間有了交流。

    整個(gè)探索過程, 教師首先查閱了多種關(guān)于乳酸菌和酸奶制作的資料,整理制定相關(guān)方案;購買實(shí)驗(yàn)器材和原料;最后實(shí)施。

    2 實(shí)驗(yàn)流程

    2.1 材料和設(shè)備 考慮到實(shí)驗(yàn)材料的獲取途徑以及普遍適用性, 本次實(shí)驗(yàn)選取市售無菌無添加純牛奶以及市售5 菌型乳酸菌粉(保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌)。

    100 mL 布丁瓶、1 000 mL 燒杯、玻璃棒、電磁爐、燒水鍋、隔熱手套、生化培養(yǎng)箱。

    2.2 實(shí)驗(yàn)分組

    1)以1 000 mL 牛奶計(jì)算,按照乳酸菌粉的添加,分為2 g、5 g、8 g 組。

    2)按照碳源的種類,分為無糖(乳糖)、蔗糖(乳糖+蔗糖)、葡萄糖(乳糖+葡萄糖)組,蔗糖和葡萄糖的添加量分別為7 g/1 000 mL 牛奶。

    3)按照培養(yǎng)溫度的變化,分為35℃、40℃、45℃組。

    4)乳酸菌是厭氧菌,此次實(shí)驗(yàn)增設(shè)了附加組(有孔、無蓋),用以探究空氣(氧氣)對(duì)乳酸菌的代謝影響。

    2.3 實(shí)驗(yàn)步驟

    1)將器材洗凈,沸水條件下,對(duì)布丁瓶、燒杯、玻璃棒進(jìn)行滅菌5 min。

    2)按比例稱取乳酸菌、蔗糖、葡萄糖。

    3)向燒杯中加入牛奶、乳酸菌粉(蔗糖/葡萄糖),用玻璃棒攪拌均勻。

    4)將攪拌均勻的牛奶分裝到布丁瓶中。

    5)分裝后立即密封。

    6)放進(jìn)生化培養(yǎng)箱,按不同溫度梯度(35℃、40℃、45℃)分別培養(yǎng)。

    7)每隔1 h 觀察一次,記錄發(fā)酵情況,到達(dá)發(fā)酵終點(diǎn)時(shí)取出,置于2~6℃冰箱中保存。

    注:1)發(fā)酵時(shí)間不超過24 h。 2)發(fā)酵終點(diǎn)判斷: 將酸奶瓶傾斜30°觀察無液體流動(dòng)時(shí)確定為發(fā)酵終點(diǎn),記錄發(fā)酵時(shí)間。

    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)論

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1、表2、表3 所示。

    表1 35℃組發(fā)酵時(shí)間(h)

    表2 40℃組發(fā)酵時(shí)間(h)

    表3 45℃組發(fā)酵時(shí)間(h)

    3.1 溫度的影響 35℃或45℃對(duì)市售5 菌型乳酸菌粉中某些菌種有殺滅或抑制生長作用。

    表1、表3 顯示, 35℃組在24 h 內(nèi)無法完成發(fā)酵,在45℃條件下,碳源種類、乳酸菌含量對(duì)乳酸菌代謝影響無顯著差別。

    通過對(duì)比各菌種的適宜生長溫度: 保加利亞乳桿菌生長適溫為44~45℃,50℃亦能生長,25~35℃生長不良,15℃停止發(fā)育。嗜熱乳桿菌最適生長溫度為42℃。嗜酸乳桿菌最適生長溫度為36~38℃。植物乳桿菌最適生長溫度為30~35℃。 干酪乳桿菌最適生長溫度為37℃。

    推測(cè)35℃或45℃對(duì)其中某些菌種有殺滅或抑制生長作用,具體生理機(jī)制待下一步分析。

    本文討論以表2 為主。

    3.2 碳源種類的影響 乳酸菌消耗碳源的順序依次為葡萄糖、乳糖、蔗糖,且蔗糖不易被乳酸菌利用。

    據(jù)盲品結(jié)果(見3.5)顯示,蔗糖的添加能夠增加甜度,葡萄糖的添加對(duì)甜度沒有貢獻(xiàn)(最先被乳酸菌消耗)。 初步推斷,乳酸菌消耗碳源的順序依次為葡萄糖、乳糖、蔗糖,且蔗糖不易被乳酸菌利用(有甜味),具體生理機(jī)制可待下一步分析。

    表2 顯示,當(dāng)乳酸菌含量充足(8 g)時(shí),發(fā)酵時(shí)間,葡萄糖組>蔗糖組=無糖組。 進(jìn)一步驗(yàn)證推測(cè):乳酸菌消耗碳源的順序依次為葡萄糖、乳糖、蔗糖,且蔗糖不易被乳酸菌利用。

    3.3 乳酸菌含量的影響 在碳源含量不變的前提下,乳酸菌含量的增加能夠減少發(fā)酵時(shí)間,且增加到一定量后不再有明顯影響。

    表2 顯示,無糖組、蔗糖組的發(fā)酵時(shí)間隨乳酸菌含量的增加而減少,增加到一定量(8 g)后不再有明顯影響。 推測(cè)碳源(乳糖)被消耗完后,乳酸菌達(dá)到代謝平衡狀態(tài),不再繼續(xù)發(fā)酵,且蔗糖不易被乳酸菌利用。

    而葡萄糖組中,隨著乳酸菌含量的增加,發(fā)酵時(shí)呈先減少后增加的趨勢(shì)。 推測(cè)在乳酸菌含量為2 g 時(shí),緩慢消耗部分碳源(葡萄糖)后即達(dá)到代謝平衡狀態(tài);乳酸菌含量為5 g 時(shí),迅速消耗部分碳源(葡萄糖)后即達(dá)到代謝平衡狀態(tài);乳酸菌含量為8 g 時(shí),迅速消耗部分碳源(葡萄糖)后未達(dá)到代謝平衡狀態(tài),繼續(xù)消耗另一部分碳源(乳糖),因此乳酸菌含量的增加反而增加了發(fā)酵時(shí)間,具體生理機(jī)制可待進(jìn)一步研究。

    3.4 空氣(氧氣)的影響 表2 顯示, 附加組并未受到空氣(氧氣)影響,且發(fā)酵時(shí)間比同組有蓋條件下少3 h。 推測(cè):1)生化培養(yǎng)箱內(nèi)空氣含量較少且密封性能良好;2)無蓋或有孔條件下傳熱更快。

    建議利用帶有通風(fēng)性能的保溫設(shè)備再次探究。

    3.5 盲品結(jié)果 發(fā)酵結(jié)束后, 通過視覺觀察和24 人對(duì)40℃組進(jìn)行盲品,結(jié)果如下:

    1)色澤,呈均勻乳白色,顏色均勻有光澤。 2)組織狀態(tài), 除35℃組未完成發(fā)酵,40℃、45℃組織細(xì)膩、凝塊細(xì)小均勻滑爽,無氣泡,有少量乳清析出。 3)酸度, 2 g(乳酸菌含量)組幾乎無酸味;5 g(乳酸菌含量)組酸度適中;8 g(乳酸菌含量)組有些許澀味。 4)甜度,無糖、葡萄糖組無甜度,蔗糖組有少許甜度,但不夠甜。

    綜合評(píng)定,40℃條件下,蔗糖、5 g(乳酸菌含量)組口感最佳。

    4 教學(xué)建議

    4.1 培養(yǎng)條件建議 綜合溫度、碳源種類、乳酸菌含量,以及空氣(氧氣)對(duì)乳酸菌代謝的影響,最佳培養(yǎng)條件建議如下:以1 000 mL 市售無菌純牛奶及市售5 菌型乳酸菌粉計(jì)算,培養(yǎng)溫度,40℃左右。 蔗糖,7 g 以上(對(duì)喜愛甜味的人群,建議成倍增加蔗糖的添加量)。菌粉含量,5 g 左右。封閉培養(yǎng)時(shí)間,8 h 左右。

    4.2 實(shí)驗(yàn)教學(xué)建議 實(shí)驗(yàn)操作之前的課堂教學(xué)對(duì)本次實(shí)驗(yàn)有重要的影響, 學(xué)生不能在對(duì)實(shí)驗(yàn)任務(wù)未知的情況下盲目開展實(shí)驗(yàn)。因此,建議在前期的教學(xué)中,教師應(yīng)該針對(duì)課標(biāo)要求,讓學(xué)生充分了解對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)在生活中的應(yīng)用; 認(rèn)識(shí)乳酸菌的結(jié)構(gòu)和代謝特點(diǎn); 明確滅菌和消毒的手段對(duì)于食品生產(chǎn)安全的影響。 另外可以讓學(xué)生在此基礎(chǔ)上,提出想要研究的課題,例如什么因素會(huì)影響到酸奶的品質(zhì)等,實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)學(xué)生提出的課題,有針對(duì)性的進(jìn)行材料和用具的準(zhǔn)備。

    實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)施過程中, 建議將學(xué)生按4 人分組,組內(nèi)分工合作,分別進(jìn)行稱量、滅菌、培養(yǎng)、觀察。每組材料建議用量:1 000 mL 牛奶,10 個(gè)布丁瓶,1 個(gè)1 000 mL 燒杯。

    針對(duì)不同實(shí)驗(yàn)類型的教學(xué)建議。驗(yàn)證型實(shí)驗(yàn),建議培養(yǎng)完成后進(jìn)行組間評(píng)比;探究型實(shí)驗(yàn),建議每1~2 組探究一個(gè)維度,例如:發(fā)酵時(shí)間、菌粉含量、碳源種類等對(duì)發(fā)酵的影響,培養(yǎng)完成后進(jìn)行組間經(jīng)驗(yàn)分享。

    為了保證學(xué)生能觀察和記錄發(fā)酵過程中培養(yǎng)物的變化情況,最好安排在上午進(jìn)行接種,之后有充足的時(shí)間進(jìn)行觀察。

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