血漿(1，3)-β-D葡聚糖及C-反應(yīng)蛋白對(duì)真菌性血流感染的評(píng)價(jià)作用

姜月紅　李曉林　孫健　閆莉　王彤　尤玉紅　金薇　王鋒　張超

[摘要]目的 研究血漿（1，3）-β-D葡聚糖、C-反應(yīng)蛋白（CRP）、中性粒細(xì)胞（NEU）百分比、白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、血小板指標(biāo)（PLT）及降鈣素原（PCT）與真菌血流感染間的關(guān)系。方法 本實(shí)驗(yàn)采用回顧性分析，選取2017年3月～2018年5月在我院住院治療且血培養(yǎng)真菌指標(biāo)陽性且被證實(shí)只有一種真菌感染的血流感染患者共計(jì)34例作為血流感染組，選取局部真菌感染患者34例作為局部感染組，另選取34例無真菌感染的患者作為對(duì)照組。根據(jù)檢測(cè)真菌分型將血流感染組繼分為白色念珠菌組及非白色念珠菌組。分析比較各組患者血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、NEU百分比、WBC、PLT及PCT間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，并分析各指標(biāo)同真菌性血流感染間的關(guān)系。結(jié)果真菌分型得出白色念珠菌組14例，非白色念珠菌組20例。血流感染組和真菌感染組血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;局部感染組血漿（1，3）-β-D葡聚糖及PLT水平均高于血流感染組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩組其余指標(biāo)間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;白色念珠菌組患者在血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、NEU百分比、WBC及PLT水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），非白色念珠菌組患者血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、NEU百分比、WBC、PLT及PCT水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），且非白色念珠菌組的PCT水平明顯高于白色念珠菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比可反映是否存在真菌感染，而血漿（1，3）-β-D葡聚糖及PLT水平可反映血流感染的嚴(yán)重情況，PCT水平可以初步推斷是否為非白色念珠菌感染或白色念珠菌感染。

[關(guān)鍵詞]（1，3）-β-D葡聚糖;C-反應(yīng)蛋白;降鈣素原;白色念珠菌

[中圖分類號(hào)]R446.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]2095-0616（2019）03-09-04

血流感染[1]是臨床上重癥感染性疾病之一，由于近年來引起血流感染的病原菌對(duì)常用抗感染藥物的耐藥性增加，使血流感染的治療面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)[1]。機(jī)體屏障功能的完整性受到破壞是造成血流感染的最核心因素，如手術(shù)、創(chuàng)傷、燙傷、靜脈留置針、動(dòng)靜脈導(dǎo)管、氣管插管及其他醫(yī)源性因素等[2]。此外，昏迷、營(yíng)養(yǎng)不良及高齡等也是血流感染的危險(xiǎn)因素。如果血流感染不得到及時(shí)控制的話，病死率可以高達(dá)50%以上。因此在感染的早期識(shí)別致病菌并采取針對(duì)性治療，可以有效降低血流感染的病死率[3-4]。因此本研究選取了2017年3月～2018年5月間在我院住院治療且血培養(yǎng)真菌指標(biāo)陽性且被證實(shí)只有一種真菌感染的血流感染患者共計(jì)34例作為血流感染組，選取局部真菌感染患者34例作為局部感染組，另選取34例無真菌感染的患者作為對(duì)照組，分析血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、NEU百分比、WBC、PLT及PCT指標(biāo)同真菌性血流感染間的關(guān)系。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月～2018年5月在我院住院治療且血培養(yǎng)真菌指標(biāo)陽性且被證實(shí)只有一種真菌感染的血流感染患者共計(jì)34例記為血流感染組，其中男16例，女18例，年齡21～73歲，平均（53.5±21.8）歲;選取局部真菌感染患者34例作為局部感染組，其中男18例，女16例，年齡20～76歲，平均（54.8±20.0）歲;另選取34例無真菌感染的患者作為對(duì)照組，其中男17例，女17例，年齡19～76歲，平均（52.5±18.9）歲。所有患者均于實(shí)驗(yàn)前簽署知情同意書。且本研究得到我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，同意進(jìn)行。

1.2 入組及排除標(biāo)準(zhǔn)[5]

入組標(biāo)準(zhǔn)：血流感染組患者為經(jīng)血培養(yǎng)檢測(cè)證實(shí)存在真菌性血流感染且只有一種真菌感染者;局部感染組患者為痰液、胸腹水、中段尿及組織液（除血液及腦脊液外）標(biāo)本培養(yǎng)出真菌并結(jié)合臨床診斷為局部真菌感染的患者;對(duì)照組選擇在我院準(zhǔn)備行外科手術(shù)治療的無咳嗽、發(fā)熱等癥狀的患者;入組患者均無心、肝、腎等重要臟器病變者;無精神疾病伴發(fā)，依從性良好者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：不符合以上入組標(biāo)準(zhǔn)的;伴心、肝、腎等重要臟器病變者;伴發(fā)精神疾病，依從性較差者。

1.3 儀器與試劑

微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)選用北京金山川科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)的MB-80E型微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)[京藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第2400896號(hào)];低速離心機(jī)選用湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)的柯登低速臺(tái)式TD5A-II離心機(jī)[湘長(zhǎng)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2011第1410025號(hào)];恒溫儀選用濟(jì)南博科設(shè)備有限公司生產(chǎn)的BSC-3FA2系列高精度恒溫槽[國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第3540044號(hào)];血培養(yǎng)儀選用北京豪斯勝達(dá)技貿(mào)有限公司生產(chǎn)的BC120型全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)[豫食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第2400169號(hào)];生化分析儀選用桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司生產(chǎn)的URIT-8030全自動(dòng)生化分析儀[桂食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2010第2400086號(hào)];血液分析儀選用深圳邁瑞公司生產(chǎn)的BC-2600型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀[粵食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2005第2254563號(hào)]。

1.4 檢測(cè)方法

取已經(jīng)無菌肝素鈉處理過的靜脈一次性采血管抽取靜脈血10mL，滅菌密封后置于離心機(jī)中以2000rPm速率離心60s后立即置于冰水浴中，即獲得待測(cè)血漿。取待測(cè)血漿2mL置于反應(yīng)劑中，置于MB-80E型微生物快速動(dòng)態(tài)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)反應(yīng)后的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可得出（1，3）-β-D葡聚糖水平。取雙腎，制成無菌的勻漿，經(jīng)10mL生理鹽水稀釋后取上層清液10μL接種在培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，24h后測(cè)定菌落計(jì)數(shù)。取入組實(shí)驗(yàn)者清潔中段尿，經(jīng)20mL生理鹽水稀釋后取上層清液1mL接種在培養(yǎng)基上，進(jìn)行培養(yǎng)，24h后鏡檢，選取單一一種菌落進(jìn)行分析檢測(cè)?；颊哐Ｒ?guī)運(yùn)用血液分析儀進(jìn)行檢測(cè)，得出檢測(cè)結(jié)果。

1.5 觀察指標(biāo)

（1，3）-β-D葡聚糖水平<50pg/mL為陰性，50～100pg/mL為觀察期，建議進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，>100pg/mL為陽性;CRP正常值為0～10mg/L;WBC正常值為（4～10）×109/L;NEU百分比正常值為50%～70%;PLT正常值為（100～300）×109/L[6]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本研究資料錄入SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)。多組數(shù)據(jù)若符合正態(tài)分布，采用方差分析法，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析;若不服從正態(tài)分布則運(yùn)用秩和檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 菌落分類情況

根據(jù)檢測(cè)真菌分型將血流感染組繼分為白色念珠菌組14例及非白色念珠菌組20例。其中非白色念珠菌組20例包括熱帶假絲酵母菌14例、近平滑假絲酵母菌2例、新型隱球菌3例及光滑假絲酵母菌3例。見表1。

2.2 血流感染組、真菌感染組及對(duì)照組指標(biāo)情況比較

各組間首先進(jìn)行方差分析，將具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的各項(xiàng)目，分別與對(duì)照組進(jìn)行組間兩兩比較，血流感染組血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=7.756;q=8.637;q=5.021;q=5.322，P<0.05）;真菌感染組血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=15.287;q=8.054;q=4.996;q=5.438，P<0.05）。見表2。

2.3 白色念珠菌組、非白色念珠菌組及對(duì)照組指標(biāo)情況比較

各組間首先進(jìn)行方差分析，將具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的各項(xiàng)目，分別與對(duì)照組進(jìn)行組間兩兩比較，白色念珠菌組患者在血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比水平均高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=11.762;q=8.762;q=-12.918;q=7.417，P<0.05），非白色念珠菌組患者血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=11.046;q=8.864;q=-13.254;q=7.753，P<0.05），且非白色念珠菌組的PCT水平明顯高于白色念珠菌組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（q=8.813，P<0.05）。見表3。

3 討論

以往有學(xué)者研究表明[7]：白念珠菌感染是在致病因素作用下形成感染灶，繼而粘附在上皮細(xì)胞表面上有白念珠菌的粘附受體，白念珠菌胞壁上具有多種粘附介導(dǎo)體，其中較為重要的有甘露聚糖-蛋白質(zhì)復(fù)合物（M-P）和幾丁質(zhì)[8-10]。幾丁質(zhì)是（1-3，1-6）β-葡聚糖與N-乙酰葡萄糖受化合物而成的立體空間多聚體[11];白念珠菌胞壁具有纖維蛋白原，纖維連接蛋白等成分的粘著受體[12]。說明（1，3）-β-D葡聚糖水平同真菌感染間存在著十分密切的聯(lián)系。

近年來真菌性血流感染造成的死亡率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢(shì)[13]。因其早期發(fā)病較為隱匿，而一旦起病就十分急重，若治療不及時(shí)極易造成嚴(yán)重的后果甚至死亡[14]。有研究指出[15-16]，非白色念珠菌感染造成的死亡幾率已經(jīng)高于白色念珠菌病感染。本研究旨在探討血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比等指標(biāo)可反映是否存在真菌感染及感染的嚴(yán)重情況。

本實(shí)驗(yàn)經(jīng)過真菌分型得出白色念珠菌組14例，非白色念珠菌組20例，非白色念珠菌發(fā)病率略高于白色念珠菌病。血流感染組和真菌感染組血漿

（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比均高于對(duì)照組，局部感染組血漿（1，3）-β-D葡聚糖及PLT水平均高于血流感染組，兩組其余指標(biāo)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;而白色念珠菌組患者在血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、NEU百分比、WBC及PLT水平均高于對(duì)照組，非白色念珠菌組患者血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、NEU百分比、WBC、PLT及PCT水平均高于對(duì)照組，且非白色念珠菌組的PCT水平明顯高于白色念珠菌組。

本研究結(jié)果表明：血漿（1，3）-β-D葡聚糖、CRP、PLT、NEU百分比可反映是否存在真菌感染，而血漿（1，3）-β-D葡聚糖及PLT水平可反映血流感染的嚴(yán)重情況，PCT水平可以初步推斷是否為非白色念珠菌感染或白色念珠菌感染。由于入組樣本有限，肯能存在一定的偶然性，在以后的研究中，我們會(huì)進(jìn)一步豐富資料，繼續(xù)完善研究。

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