氟苯尼考的應(yīng)用與殘留研究進(jìn)展

李世宏 劉希望 楊亞軍 秦哲 孔曉軍 焦增華 李劍勇

摘要氟苯尼考是最新研制的動物專用氯霉素類廣譜抗菌藥，目前在獸醫(yī)臨床上已被廣泛應(yīng)用，但氟苯尼考的應(yīng)用不當(dāng)會導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性問題越來越嚴(yán)重。因此，氟苯尼考的殘留問題也引起國內(nèi)外專家的高度關(guān)注。為此，綜述了氟苯尼考的使用現(xiàn)狀、在動物體內(nèi)的殘留與限量、殘留檢測方法、毒性的研究進(jìn)展，以為氟苯尼考的應(yīng)用提供參考。

關(guān)鍵詞氟苯尼考;應(yīng)用;殘留

中圖分類號S859文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2019）02-0015-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.02.005

動物服用抗生素后不能被其完全吸收，有40%～90%的母體藥物成分被患病動物最終以糞尿的形式排放到環(huán)境中[1]，并且有些藥物代謝物排放到環(huán)境后再轉(zhuǎn)化成母體成分，進(jìn)入到生態(tài)環(huán)境中，從而對土壤、水體等生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生不良影響，進(jìn)一步通過食物鏈對生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生毒害作用，最終影響自然環(huán)境中動植物和微生物的生命活動而影響人類的健康，其造成的危害不容忽視。20世紀(jì)70年代國外就開始注意到抗生素在動物體內(nèi)的殘留問題。近年來，國內(nèi)外就獸藥對各種生態(tài)環(huán)境中生物的影響進(jìn)行廣泛研究，取得了許多重要的成果。隨之，一門新的學(xué)科——生態(tài)毒理學(xué)（Ecotoxicology）誕生，生態(tài)毒理學(xué)是生態(tài)學(xué)與毒理學(xué)之間相互滲透的

一門邊緣學(xué)科，主要是研究機體、污染物、環(huán)境三者之間的關(guān)系及有毒物質(zhì)對個體、種群、群落和生態(tài)系統(tǒng)的毒性效應(yīng)[2]。氟苯尼考，也稱氟甲砜霉素，它具有抗菌譜廣、安全高效、不易產(chǎn)生耐藥性等特點，其在動物體內(nèi)吸收良好、分布廣，而對敏感菌所致的畜禽細(xì)菌性疾病治療效果顯著，氟苯尼考已替代氯霉素廣泛用于動物感染性疾病的防治。氟苯尼考給動物用藥后不再引起再生障礙性貧血的不良反應(yīng)[3]。目前，氟苯尼考已在歐洲、美洲、亞洲等20多個國家上市，主要用于豬、牛、魚及禽類細(xì)菌性疾病的治療。我國現(xiàn)已通過該藥的審批生產(chǎn)，生產(chǎn)的劑型有針劑、溶液和散劑等。

1氟苯尼考的使用現(xiàn)狀

氟苯尼考自20世紀(jì)90年代陸續(xù)在歐美、日本及中國等上市以來，已廣泛用于豬、牛、羊、水產(chǎn)、禽類等動物的細(xì)菌性疾病防治。

1.1豬病

據(jù)席進(jìn)華等[4]報道，將患有傳染性胸膜肺炎的63頭斷奶仔豬分成3組，分別注射復(fù)方氟苯尼考、氟苯尼考、硫酸卡那霉素，結(jié)果表明，氟苯尼考對豬的傳染性胸膜肺炎有良好的治療效果，且以復(fù)方氟苯尼考療效最佳。駱永泉等[5]報道，用氟苯尼考防治患有傳染性胸膜肺炎與鏈球菌混合感染的豬，患病治療有效率高達(dá)98.5%，健康豬預(yù)防有效率達(dá)97.1%。試驗表明，用氟苯尼考防治傳染性胸膜肺炎與鏈球菌混合感染的豬療效明顯。

1.2禽病

蔡玉梅等[6]報道，采有氟苯尼考可溶性粉高（6 g/L）、中（3 g/L）、低（1.5 g/L）3個劑量組對人工感染雞大腸桿菌（E.coli）進(jìn)行連續(xù)5 d飲水治療試驗，結(jié)果表明，氟苯尼考可溶性粉高、中、低3個劑量組對雞大腸桿菌病均有較好的治療效果，其中以高、中劑量的治療效果最好。張永強等[7]報道，利用氟苯尼考粉劑治療雞金黃色葡萄球菌病，結(jié)果表明，其對雞金黃色葡萄球菌感染治療效果明顯，尤其是對耐氟苯尼考的金黃色萄萄球菌感染的仍可選擇氟苯尼考治療。

1.3牛病

張麗云等[8]報道，選擇40頭患子宮內(nèi)膜的奶牛，隨機（按產(chǎn)量、胎次和泌乳月相似原則）分為4組，即氟苯尼考混懸劑高、中、低劑量治療組和青霉素藥物治療對照組，選擇10頭健康奶牛作為空白對照組。經(jīng)3次用藥治療，結(jié)果表明，氟苯尼考混懸劑對奶牛子宮內(nèi)膜炎治療具有顯著的效果，抑菌效果優(yōu)于青霉素對照組，無交叉耐藥性，安全范圍大，其中高、中劑量治療組療效尤為顯著。

1.4羊病

王存華等[9]報道，選用泰樂菌素、氟苯尼考注射液聯(lián)合治療山羊傳染性胸膜肺炎，療效顯著。結(jié)果表明，上午用泰樂菌素，下午用氟苯尼考注射液，山羊傳染性胸膜肺炎治愈率可達(dá)90%以上，且用藥療程短，療效優(yōu)于單一用藥。在臨床上治療羊的乳腺炎，也用氟苯尼考，其對G+菌的最小抑菌濃度為3.12 μg/mL，而對G-菌則需更高的藥物濃度[10]。

1.5水產(chǎn)動物

郭闖等[11]報道，氟苯尼考最早主要應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，用于治療黃尾魚的假核性巴氏桿菌病、鏈球菌病及自然暴發(fā)的大西洋鮭魚癤病等，均取得較好的療效。對感染遲鈍性愛德華氏菌的鰻、感染巴氏桿菌的黃尾魚、感染殺鮭弧菌性的鮭、感染鰻弧菌性的金魚口服給藥均有良好的防病作用，且超過其他常用抗菌性藥物的療效。該藥在智利和韓國上市后，用于治療感染假結(jié)核性巴氏桿菌病和鏈球菌病的黃尾魚，療效顯著，且分離出的細(xì)菌對氟苯尼考比較敏感，但對奧索利酸、土霉素、氯霉素等藥物有耐藥性，黃尾魚的累積死亡率較對照組明顯降低。我國于1999年批準(zhǔn)氟苯尼考為國家二類新獸藥，用于在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面治療鰻鱺愛德華氏病和赤鰭病[10]。

2氟苯尼考在動物體內(nèi)的殘留與限量

氟苯尼考，新型氯霉素類抗生素，在有效性和安全性方面比氯霉素和甲砜霉素具有明顯的優(yōu)勢，已在養(yǎng)殖業(yè)中大規(guī)模使用，但由于獸醫(yī)臨床的濫用和誤用，細(xì)菌耐藥性問題越來越嚴(yán)重。因此，我國、歐盟及美國均規(guī)定了動物組織中氟苯尼考的最大殘留限量。氟苯尼考在動物體內(nèi)的主要代謝產(chǎn)物是氟苯尼考胺和氟苯尼考醇，但在動物組織中的主要代謝產(chǎn)物為氟苯尼考胺[12]，故通常以氟苯尼考胺作為動物體內(nèi)氟苯尼考的殘留標(biāo)示物[13]。氟苯尼考在動物體內(nèi)分布呈全身性，但各組織器官藥物濃度不同。血液和肌肉中藥物濃度相近，腦中藥物濃度較低，表明分布時存在著血腦屏障，在腎和眼球脈絡(luò)膜中有蓄積作用，說明氟苯尼考及氟苯尼考胺可能與黑色素結(jié)合。氟苯尼考及氟苯尼考胺主要經(jīng)尿和膽汁排泄，僅少量經(jīng)糞便排出。由于氟苯尼考在動物腎和肺組織中的濃度較高，因此可較好地用于防治畜禽呼吸道和泌尿道感染疾病。

美國食品藥品監(jiān)督管理局和歐洲獸醫(yī)藥產(chǎn)品委員會公布的數(shù)字表明，氟苯尼考對牛的停藥期是28 d，豬給藥12 d后和雞給藥7 d后，在肌肉、皮膚、脂肪、肝和腎等可食用組織中，氟苯尼考及氟苯尼考胺的濃度均已降至最大允許殘留極限。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部235號公告規(guī)定，氟苯尼考及氟苯尼考胺在牛羊的肌肉、肝臟、腎臟最高殘留限量（MRL）分別不得超過200、3 000、300 μg/L;在豬的肌肉、皮膚+肪脂、肝臟、腎臟最高殘留限量分別不得超過300、500、2 000、500 μg/L;在家禽的肌肉、皮膚+肪脂、肝臟、腎臟最高殘留限量分別不得超過100、200、2 500、750 μg/L [14]。

3氟苯尼考?xì)埩魴z測方法

關(guān)于氟苯尼考藥代動力學(xué)殘留檢測方法的研究，國內(nèi)外有較多的成熟報道：主要的檢測方法有微生物學(xué)方法、免疫學(xué)方法和理化檢測方法。微生物學(xué)方法的優(yōu)點為簡便、成本低，但是存在相應(yīng)的缺點，如靈敏度低，特異性比較差;放射免疫學(xué)方法的優(yōu)點是靈敏、特異、簡便易行、用樣量少等，弊端為半衰期短，在研究時會出現(xiàn)放射性的污染，而且用放射免疫學(xué)方法研究需要特殊的儀器?；谶@些缺點的存在，國內(nèi)外目前使用這2種方法來檢測氟苯尼考?xì)埩舻暮苌?。目前，國?nèi)外研究氟苯尼考的主要方法為理化檢測方法，所應(yīng)用的理化方法包括酶聯(lián)免疫吸咐法（ELISA）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）、氣相色譜法（GC）、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS/MS）等。酶聯(lián)免疫吸咐法樣本前處理簡單，定量準(zhǔn)確，檢測速度快，靈敏度高，特異性強，適用于大批樣本快速檢測;氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法可用于確證檢測，靈敏度高，但前期處理過程復(fù)雜，需進(jìn)行衍生化處理;氣相色譜法專一性差，靈敏度低，分析前還需對氟苯尼考內(nèi)亞氨基、硫?；然鶊F(tuán)進(jìn)行硅烷化或?；?液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法定性定量準(zhǔn)確，靈敏度高，不需要衍生化，抗干擾能力強，該法是較為理想的氟苯尼考與氟尼辛葡甲胺殘留確定分析方法[15]。

4氟苯尼考對生態(tài)的毒性

氟苯尼考及其代謝物氟苯尼考胺等從養(yǎng)殖場到土壤和水環(huán)境的途徑主要包括直接排放和間接擴(kuò)散2種方式。一部分是通過養(yǎng)殖廢水直接排放進(jìn)入到水體環(huán)境中，另一部分是通過動物糞便發(fā)酵成肥料進(jìn)入到土壤環(huán)境中。一旦氟苯尼考及代謝物氟苯尼考胺被排放到環(huán)境中，藥物中的活性成分就會滲濾到地下水體中，或者遷移到地表水體中，或者被土壤吸附，從而改變陸生動植物和水生生物的生長環(huán)境而影響生長，其殘留物最終可以通過生物食物鏈的放大作用而傳遞到人的身體中，必將對人體和生態(tài)環(huán)境產(chǎn)生毒害作用。

4.1氟苯尼考對土壤微生物的影響

氟苯尼考被動物服用后，氟苯尼考及其代謝物氟苯尼考胺等主要是通過動物糞便發(fā)酵成肥料進(jìn)入到土壤中，被土壤顆粒吸附，或隨地表徑流遷移到地表水中，或淋溶到地下水體中。研究表明，氟苯尼考及其代謝物氟苯尼考胺等通過堆肥或地表水徑流進(jìn)入到農(nóng)田或土壤中，并能蓄積達(dá)到一定濃度，污染生態(tài)環(huán)境，造成對人類的潛在危害。

據(jù)呼秀智等[16]報道，為了評價氟苯尼考對土壤微生物活動的影響，采用室內(nèi)培養(yǎng)模擬試驗，研究氟苯尼考對土壤微生物數(shù)量、呼吸活動和其對纖維分解作用的影響。結(jié)果表明，在同一濃度下，氟苯尼考對土壤微生物抑制作用強弱順序為：對細(xì)菌最強，次之為放線菌，最弱為真菌，且抑制作用隨氟苯尼考濃度增加而增大，藥物活性維持期為5～6 d。所測的不同濃度的氟苯尼考對土壤微生物呼吸活動的影響有所差異：低濃度的氟苯尼考（10 mg/kg）對土壤的呼吸作用影響表現(xiàn)不明顯，而高濃度（500 mg/kg）的氟苯尼考對土壤的呼吸作用有明顯的抑制作用;同時，不同濃度的氟苯尼考對土壤微生物分解纖維作用的影響不同，隨著藥物濃度的增加，土壤微生物對纖維分解作用呈明顯遞減趨勢。可見殘留的高濃度氟苯尼考的確對生態(tài)環(huán)境有危害作用。

4.2氟苯尼考對海洋沉積物的影響

海洋沉積物中存在很多類各種酶，而這些酶大多來自于沉積物中的微生物，沉積物中酶的活性受外源污染物及沉積物理化性質(zhì)等多種因素的影響。為此，有些專家學(xué)者研究土壤或海洋沉積物中的酶對外來化學(xué)物質(zhì)的敏感性，分析外來物質(zhì)對沉積物酶的影響來評判土壤沉積物的生態(tài)環(huán)境優(yōu)劣，或者將其作為一項生態(tài)毒理學(xué)指標(biāo)，判斷外來物質(zhì)對土壤沉積物的污染程度及可能對生態(tài)環(huán)境造成的不利影響[17]。

據(jù)宗虎民等[18]報道，通過室內(nèi)模擬試驗研究氟苯尼考對海洋沉積物中硝酸鹽還原酶、亞硝酸鹽還原酶、堿性磷酸酶活性的影響，結(jié)果表明：低濃度（10 mg/kg）的氟苯尼考對沉積物中硝酸鹽還原酶的活性與堿性磷酸酶的活性均沒有明顯影響，而高濃度（100和500 mg/kg）的氟苯尼考在整個培養(yǎng)過程中對硝酸鹽還原酶的活性與堿性磷酸酶的活性產(chǎn)生明顯的抑制作用，且隨著氟苯尼考濃度的增加和培養(yǎng)時間的延長抑制作用也加大，培養(yǎng)前3 d，不同濃度的氟苯尼考對沉積物中亞硝酸鹽還原酶的活性均有明顯的抑制作用;3 d 之后，低濃度（10 mg/kg）的氟苯尼考對亞硝酸鹽還原酶的活性沒有明顯的影響，而高濃度（100和500 mg/kg）的氟苯尼考對亞硝酸鹽還原酶的活性具有明顯的抑制作用。

目前，氟苯尼考對各種生物影響方面的研究主要集中在對陸生或水生生態(tài)系統(tǒng)中單一組分的影響，多集中在對生物的毒性效應(yīng)上，較少從生態(tài)系統(tǒng)的角度出發(fā)研究對環(huán)境的效應(yīng)，尤其是在生態(tài)系統(tǒng)中富集、遷移、轉(zhuǎn)化等環(huán)境行為。因此，在研究方法和深度上也應(yīng)不斷完善，更多地了解氟苯尼考的生理、生化特性和在環(huán)境中的降解和代謝規(guī)律，研究其及代謝產(chǎn)物氟苯尼考胺等與環(huán)境生物細(xì)胞內(nèi)大分子物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、核酸、酶類的相互作用，探討其作用機理，從而揭示藥物及其代謝產(chǎn)物對生物環(huán)境的影響[2]。

5結(jié)語

各項試驗結(jié)果表明，氟苯尼考具有用藥劑量小、抗菌譜廣等特點，尤其是對常用抗菌藥產(chǎn)生耐藥的菌株仍對其敏感，且殘留少，對環(huán)境污染小。氟苯尼考在動物體內(nèi)的吸收較好，生物利用度高達(dá)96.5%，平常MICs較小，故臨床用藥劑量少，動物服用隨糞便排泄到自然環(huán)境中的殘留量較少，對環(huán)境影響不大?；诖耍侥峥嫉难兄婆c生產(chǎn)，不僅拓展了國內(nèi)抗菌劑的種類，也優(yōu)化了水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和畜牧業(yè)生產(chǎn)。但氟苯尼考用于臨床時間還不長，或許存在一定的毒副作用，現(xiàn)在還沒有表現(xiàn)出來或者未被發(fā)現(xiàn)，假設(shè)人長期食用有氟苯尼考?xì)埩魟游锏娜?、蛋、奶，必定會誘導(dǎo)部分敏感菌產(chǎn)生耐藥性，這些耐藥菌株對其他藥物是否存在交叉耐藥性、對人類醫(yī)學(xué)用藥是否存在影也是亟待研究的課題。

47卷2期李世宏等氟苯尼考的應(yīng)用與殘留研究進(jìn)展

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