豬塞內(nèi)卡病毒感染的最新研究進(jìn)展（續(xù)1）

唐彩琰

摘 要：主要介紹2015年及以后豬群塞內(nèi)卡病毒感染情況以及塞內(nèi)卡病毒感染的流行病學(xué)特征。

關(guān)鍵詞：豬；塞內(nèi)卡病毒；水皰性疾病

2014年末和2015年初，巴西不同地區(qū)的斷奶仔豬和成年豬群暴發(fā)了水皰性疾病。同時(shí)，巴西主要生豬產(chǎn)區(qū)1～4日齡新生仔豬的死亡率上升。據(jù)報(bào)道，受感染仔豬的臨床癥狀包括嗜睡、皮膚充血、腹瀉、神經(jīng)癥狀和（或）突然死亡。巴西農(nóng)業(yè)、畜牧和食品供應(yīng)部（Brazilian Ministry of Agriculture， Livestock， and Food Supply，MAPA）動(dòng)物衛(wèi)生局提供了篩選外來動(dòng)物疾病的官方檢測，特別是針對口蹄疫病毒（Feet and Mouth Disease Virus，F(xiàn)MDV）、豬瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）和豬流行性腹瀉病毒（Porcine Epidemic Diarrhea Virus，PEDV）的檢測，但這些病毒的檢測結(jié)果均為陰性。然而，其他研究組在巴西不同州出現(xiàn)水皰性病變的豬上檢測到了塞內(nèi)卡病毒（圖1A），并且認(rèn)為該病毒就是導(dǎo)致巴西水皰性疾病暴發(fā)的病原體。此外，研究人員對自然死亡的仔豬進(jìn)行了診斷性檢查，可能引起上述1種或多種癥狀（包括腹瀉）的傳染因子的檢測結(jié)果均為陰性。由于大多數(shù)病例是來自有豬水皰病臨床史的豬群，因此需要在仔豬生物樣本中調(diào)查塞內(nèi)卡病毒，對于陽性結(jié)果則需檢測其糞便、血清和多種器官/組織樣本（圖1B）。

這是塞內(nèi)卡病毒第一次在北美以外的國家報(bào)道。該病毒之前是否在巴西傳播過尚不清楚。然而，一項(xiàng)在巴西進(jìn)行的為期10年（2007-2016年）的血清學(xué)回顧性研究采集了不同日齡豬的血清樣本，研究結(jié)果表明2014年之前塞內(nèi)卡病毒并未在巴西傳播，而同年塞內(nèi)卡病毒相關(guān)的水皰性疾病第一次在巴西暴發(fā)。

2015年，中國首次報(bào)道了塞內(nèi)卡病毒疫情，位于廣東省的豬群出現(xiàn)水皰性病變，新生仔豬暴發(fā)突然死亡。對暴發(fā)疾病豬群進(jìn)行樣本檢測，發(fā)現(xiàn)經(jīng)典水皰性疾病病原為陰性，而塞內(nèi)卡病毒檢測呈陽性。后來，在中國其他省份有癥狀的仔豬中也報(bào)道了塞內(nèi)病毒感染。

2015年7月以來，美國塞內(nèi)卡病毒相關(guān)的水皰性疾病暴發(fā)數(shù)量逐漸增多，但美國也是第一次報(bào)道該病毒感染與新生仔豬死亡率有關(guān)，尤其是在母豬患有水皰性疾病的豬群。2016年，加拿大和泰國的豬群也受到了塞內(nèi)卡病毒感染的影響（圖2）。

基于上述所有事件，2015年可以認(rèn)為是塞內(nèi)卡病毒感染流行病學(xué)的一個(gè)轉(zhuǎn)折點(diǎn)，與塞內(nèi)卡病毒有關(guān)的許多重要特征也得到了確定。2015年之前，僅報(bào)道了2例塞內(nèi)卡病毒感染引起的水皰性疾病，且受影響的豬數(shù)量有限。然而，從2015年起，感染塞內(nèi)卡病毒的豬群數(shù)量顯著增加，并且感染相關(guān)的發(fā)病率和死亡率也顯著增加。塞內(nèi)卡病毒引起的疾病的發(fā)病率和死亡率根據(jù)受感染的豬種不同而有所差異。在首次受到感染的豬群中，根據(jù)臨床癥狀和豬的年齡段的不同，發(fā)病率在4%～70%不等。根據(jù)地理位置和豬群來源的不同，塞內(nèi)卡病毒暴發(fā)造成的斷奶仔豬發(fā)病率在0.5%～5%，育肥豬和種雞的發(fā)病率在5%～30%。母豬的發(fā)病率明顯較高，達(dá)到70%～90%。然而，母豬的死亡率非常低（約0.2%），隨著臨床癥狀緩解，持續(xù)10 d～15 d后，豬很快就可恢復(fù)。

新生仔豬的發(fā)病率和死亡率非常高，尤其是1～4日齡的仔豬，發(fā)病率可達(dá)70%，但死亡率只有15%～30%。在受感染的豬群中，仔豬出現(xiàn)臨床癥狀和高死亡率的時(shí)間僅持續(xù)2～3周。

據(jù)我們所知，之前受過感染的豬群未見再暴發(fā)報(bào)道，但這并非是永久性條件。當(dāng)大多數(shù)動(dòng)物呈現(xiàn)無癥狀和（或）亞臨床感染，以及先前未受感染豬出現(xiàn)臨床癥狀且血清反應(yīng)呈陰性或體內(nèi)塞內(nèi)卡病毒特異性抗體滴度較低時(shí)，感染可能會變得流行。此外，免疫力下降或從受感染豬群中引入未經(jīng)產(chǎn)后備母豬以及動(dòng)物體和環(huán)境中存在的病毒等可能會引發(fā)先前感染豬群的疾病再暴發(fā)。

2015年美國在暴發(fā)了多起塞內(nèi)病毒感染后，對其25個(gè)州豬群的2 033份無癥狀豬的唾液樣本進(jìn)行了調(diào)查，結(jié)果顯示只有1.2%的樣本的RNA病毒RT-PCR為陽性。相反，人們從患有水皰性疾病的育肥豬的不同生物樣本中擴(kuò)增出了塞內(nèi)病毒的RNA。水皰液和/或自然感染豬的病變部位的病毒滴度相當(dāng)高（每毫升含2×107～1.2×1011基因組拷貝），表明動(dòng)物與充滿液體和（或）最近破裂的水皰以及易感動(dòng)物的直接接觸可能是該病毒最重要的傳播途徑之一。

出現(xiàn)多系統(tǒng)性臨床癥狀（包括腹瀉）以及自然感染病毒并出現(xiàn)水皰性病變的育肥豬的糞便樣本證實(shí)了其可排出塞內(nèi)卡病毒。此外，免疫組織化學(xué)和RT-PCR檢測結(jié)果揭示臨床受感染的仔豬泌尿上皮細(xì)胞中存在塞內(nèi)卡病毒，這表明在受感染的豬群中尿液可能是該病毒傳播的一條途徑和一種可能的污染源。

在美國，研究人員從受感染豬舍采集的小鼠糞便和小腸樣本的細(xì)胞培養(yǎng)物中分離出了塞內(nèi)病毒RNA和活的感染性病毒顆粒。從受感染和未受感染豬舍收集到的家蠅樣本中都檢測到病毒。家蠅和小鼠病毒基因組的檢測結(jié)果和（或）感染性病毒顆粒的分離均表明這些物種可能在該病毒感染的流行病學(xué)中起一定作用。在美國，工作人員（主要指農(nóng)場員工）、車輛（尤其是用來處理死亡動(dòng)物和運(yùn)輸飼料的車輛）、農(nóng)具和設(shè)備（包括用于去除屠體的設(shè)備），都可能成為不同豬群塞內(nèi)卡病毒引入和間接傳播的途徑。

1～2日齡仔豬不同組織/器官樣本的RT-PCR和免疫組織化學(xué)法檢測發(fā)現(xiàn)，病毒垂直傳播的可能性增加。然而，還需要進(jìn)一步的研究來證實(shí)這種病毒傳播的途徑。

在塞內(nèi)卡病毒相關(guān)的水皰性疾病出現(xiàn)和發(fā)病率升高后，巴西、中國、美國、加拿大和泰國等國家中的大部分建立了塞內(nèi)卡病毒的完整（n=42）和部分（n=15）基因組序列（這些數(shù)字是根據(jù)2015年起GenBank中可用的完整和部分塞內(nèi)卡基因組序列得出，檢索時(shí)間：2017年6月8日）。因此，就病毒的分子流行病學(xué)而言，研究取得了一些進(jìn)展。2015-2016年間獲得的42個(gè)完整病毒基因組序列中，核苷酸序列彼此間的相似度極高（95.8%～99.9%），與原型毒株SVV-001的一致性較低（93.8%～94.6%）。

加拿大的11-55910-3毒株例外（GenBank檢索號KC667560），它與原型SVV-001毒株和同時(shí)期塞內(nèi)卡病毒毒株核苷酸相似性分別為95%和96%～98.2%。同時(shí)觀察到塞內(nèi)卡毒株分為3個(gè)時(shí)間進(jìn)化支。進(jìn)化枝Ⅰ包括最初確定的病毒株（包括SVV-001），進(jìn)化枝Ⅱ包括美國在1988-1997年間鑒定的病毒株，進(jìn)化枝Ⅲ則包括2001-2016年確定的，來自巴西、加拿大、中國、泰國和美國的塞內(nèi)卡毒株。利用所有目前可獲得的塞內(nèi)卡病毒VP1區(qū)域的核苷酸序列構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹顯示了進(jìn)化枝Ⅲ的地理分組，其根據(jù)來源國的不同對塞內(nèi)卡病毒株進(jìn)行了分類（圖3）。盡管歷史和當(dāng)代塞內(nèi)卡病毒株之間存在一定差異，但是塞內(nèi)卡病毒基因組的遺傳變化是否導(dǎo)致了病毒不同生物學(xué)行為，和/或是否導(dǎo)致了塞內(nèi)卡病毒感染的出現(xiàn)仍然不清楚。□□

（待續(xù)）

原題名：Update on senecavirus infection in pigs（英文）

原作者：Raquel A. Leme、Alice F. Alfieri、Amauri A. Alfieri（巴西）