口腔鱗狀細(xì)胞癌中Mcl-1的表達(dá)與生存預(yù)后的相關(guān)性分析

楊美靜　王利山　李新穎　李彬　莊偉杰　魏立梅

[摘? ? ? ? ? ?要]? 目的：檢測(cè)Mcl-1在正?？谇火つず涂谇击[癌組織中的表達(dá)情況與患者預(yù)后生存之間的相關(guān)性。方法：應(yīng)用免疫組化方法檢測(cè)Mcl-1在46例口腔鱗癌組織和11例正?？谇火つぶ械谋磉_(dá)。運(yùn)用SPSS17.0軟件分析Mcl-1在口腔鱗癌組織和在正?？谇火つぶ斜磉_(dá)有無(wú)差異性，運(yùn)用Kaplan-Meier分析Mcl-1與口腔鱗癌的生存預(yù)后有無(wú)無(wú)明顯相關(guān)性;結(jié)果：Mcl-1在口腔鱗癌組織和在正?？谇火つそM織的表達(dá)具有差異性（P<0.05）， Kaplan-Meier分析Mcl-1與口腔鱗癌的生存預(yù)后無(wú)明顯相關(guān)性（P>0.05）; 結(jié)論：Mcl-1在口腔鱗癌中呈高表達(dá)，與病人的預(yù)后生存無(wú)明顯相關(guān)性。

[關(guān)? ? 鍵? ?詞]? 口腔鱗狀細(xì)胞癌;Mcl-1;免疫組化;生存分析

[中圖分類(lèi)號(hào)]? R739.85? ? ? ? ? ? ? ? ? ?[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號(hào)]? 2096-0603（2019）09-0162-02

惡性腫瘤嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的健康，治愈腫瘤已成為全世界范圍內(nèi)的難題之一。Mcl-1是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的凋亡調(diào)控蛋白，在多種腫瘤中呈現(xiàn)高表達(dá)[1-3]。目前有關(guān)Mcl-1在口腔鱗癌中的表達(dá)國(guó)內(nèi)鮮有報(bào)道。本研究選取Mcl-1作為研究對(duì)象，探討其在口腔鱗癌中的表達(dá)情況并對(duì)Mcl-1的表達(dá)與口腔鱗癌患者預(yù)后生存的關(guān)系進(jìn)行分析，探討Mcl-1在口腔鱗狀細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為口腔鱗狀細(xì)胞癌的Mcl-1分子靶向治療提供依據(jù)。

一、材料和方法

（一）標(biāo)本及臨床資料

口腔鱗癌組織均來(lái)自于濰坊市益都中心醫(yī)院病理科的存檔蠟塊，共46例，來(lái)源均為在2008年12月至2014年12月期間在該院接受外科手術(shù)治療的患者切除的腫瘤標(biāo)本。所有病例都已經(jīng)過(guò)明確確診。同時(shí)收集正?？谇淮金つそM織11例，來(lái)源于在該院行唇腭裂手術(shù)患者切除的多余組織。

（二）免疫組織化學(xué)染色結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

參照文獻(xiàn)關(guān)于Mcl-1免疫組化染色的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)[3]，細(xì)胞中出現(xiàn)棕黃色染色的顆粒即視為陽(yáng)性。對(duì)染色情況進(jìn)行評(píng)分：在高倍鏡（×400）視野下，隨機(jī)選取每張切片的10個(gè)視野，每個(gè)視野中選取100個(gè)細(xì)胞，基數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)進(jìn)行評(píng)定：陽(yáng)性細(xì)胞為0個(gè)用（-）表示，計(jì)分為0;陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)≤25%用（+）表示，計(jì)分為1;陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)為25%-50%用（++）表示，計(jì)分為2;陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)≥50%用（+++）表示，計(jì)分為3。組織染色陰性認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)：計(jì)分為0或1的切片，組織染色陽(yáng)性認(rèn)定標(biāo)準(zhǔn)：計(jì)分為2或3的切片。

（三）統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行兩組之間的比較，以P<0.05為標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著的相關(guān)性。采用Kaplan-Meier進(jìn)行單因素生存分析，運(yùn)用Cox-regression分析影響口腔鱗癌的病理因素。

二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

（一）Mcl-1在正?？谇火つず涂谇击[癌中的表達(dá)

Mcl-1表達(dá)定位于細(xì)胞漿，呈棕褐色，見(jiàn)圖1。46例鱗癌組織中Mcl-1陽(yáng)性的為26例，陰性為20例。陽(yáng)性表達(dá)率為56.5%;11例正常黏膜組織中陰性為8例，陽(yáng)性為3例，陽(yáng)性表達(dá)率為27.3%。經(jīng)卡方檢驗(yàn)分析，P<0.05，差異有顯著性意義，說(shuō)明Mcl-1在口腔鱗癌中的表達(dá)與正?？谇火つぶ械谋磉_(dá)存在差異。

（二）Mcl-1的表達(dá)與患者生存預(yù)后的關(guān)系

截止到隨訪(fǎng)日期2018年10月4日，46例鱗癌患者中共死亡19例，生存26例，失訪(fǎng)1例。運(yùn)用Kaplan-Meier分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，Mcl-1與口腔鱗癌的生存預(yù)后無(wú)明顯相關(guān)性（P>0.05），見(jiàn)圖2。根據(jù)Mcl-1的表達(dá)和各臨床病理參數(shù)關(guān)系，運(yùn)用Cox-Regression分析與口腔鱗癌生存預(yù)后相關(guān)的因素，結(jié)果表明淋巴轉(zhuǎn)移與口腔鱗癌患者的預(yù)后和生存有相關(guān)性（P<0.05）。（詳見(jiàn)表1和表2）

三、討論

Mcl-1是較新發(fā)現(xiàn)的凋亡調(diào)控蛋白，近年來(lái)才被納入研究。Mallick，S[4]等比較了正?？谇火つぁ┣盃顟B(tài)及口腔鱗癌內(nèi)Mcl-1的表達(dá)。他們選取口腔白斑和口腔黏膜下纖維化作為癌前狀態(tài)研究組。免疫組化染色結(jié)果顯示Mcl-1在口腔鱗癌、口腔白斑和口腔黏膜下纖維化組織內(nèi)的表達(dá)明顯要高于在正常黏膜的表達(dá)，但是沒(méi)有發(fā)現(xiàn)在前三者中表達(dá)存在明顯差異且在檢測(cè)病理參數(shù)與該蛋白表達(dá)時(shí)也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)相關(guān)性。為了進(jìn)一步檢測(cè)Mcl-1是否在口腔鱗癌細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中發(fā)揮作用，Mallick，S等人還利用siRNA方法將口腔鱗癌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中Mcl-1的水平下調(diào)后，進(jìn)一步檢測(cè)兩種細(xì)胞的生長(zhǎng)情況。結(jié)果顯示被檢測(cè)的兩個(gè)口腔鱗癌細(xì)胞系中細(xì)胞的生長(zhǎng)都受到抑制。相反，成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)卻沒(méi)有受到明顯影響，以上結(jié)果都顯示，Mcl-1與口腔鱗癌的發(fā)生相關(guān)。

Mateo，Y[5]通過(guò)對(duì)127例胃癌患者進(jìn)行Mcl-1與預(yù)后生存關(guān)系的分析，結(jié)果數(shù)據(jù)說(shuō)明Mcl-1陽(yáng)性表達(dá)的病例患者的預(yù)后要明顯比Mcl-1陰性表達(dá)的患者預(yù)后差，多變量分析結(jié)果顯示Mcl-1的表達(dá)強(qiáng)度可以作為預(yù)測(cè)胃癌患者預(yù)后是否良好的一個(gè)指標(biāo)。Wuilleme-Toumi，S.[6]等對(duì)Mcl-1在多發(fā)性骨髓瘤中的表達(dá)進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)Mcl-1表達(dá)陽(yáng)性的患者術(shù)后復(fù)發(fā)率較表達(dá)陰性者高，同時(shí)短時(shí)間生存率也比表達(dá)陰性者低。Shigemasa，K.[7]對(duì)卵巢癌的研究中同樣得出Mcl-1高表達(dá)者預(yù)后差。限于本實(shí)驗(yàn)樣本量比較小、有可能不能很好地反映總體的情況，致使結(jié)果與國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道有差異。后續(xù)實(shí)驗(yàn)還應(yīng)進(jìn)行較大樣本量的檢測(cè)，便于排除偶然情況，更好地反映總體特點(diǎn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]Wuilleme-Toumi， S.， et al.， Mcl-1 is overexpressed in multiple myeloma and associated with relapse and shorter survival[J]. Leukemia， 2005. 19（7）：1248-1252.

[2]Schulze-Bergkamen， H.， et al.， Suppression of Mcl-1 via RNA interference sensitizes human hepatocellular carcinoma cells towards apoptosis induction[J]. BMC Cancer， 2006，6（1）： 232.

[3]Song， L.， et al.， Research Paper Mcl-1 Regulates Survival and Sensitivity to Diverse Apoptotic Stimuli in Human Non-Small Cell Lung Cancer Cells[J]. Cancer biology & therapy， 2005，4（3）： 267-276.

[4]Mallick， S.， et al.， Human oral cancers have altered expression of Bcl-2 family members and increased expression of the anti-apoptotic splice variant of Mcl-1[J]. J Pathol， 2009，217（3）： 398-407.

[5]Maeta， Y.， et al.， Expression of Mcl-1 and p53 proteins predicts the survival of patients with T3 gastric carcinoma[J]. Gastric Cancer， 2004，7（2）： 78-84.

[6]Wuilleme-Toumi， S.， et al.， Mcl-1 is overexpressed in multiple myeloma and associated with relapse and shorter survival[J]. Leukemia， 2005. 19（7）： 1248-1252.

[7]Shigemasa， K.， et al.， Increased MCL-1 Expression Is Associated with Poor Prognosis in Ovarian Carcinomas[J]. Cancer Science， 2002，93（5）： 542-550.