全自動血液分析儀檢測血小板的影響因素

李可成

[摘要] 血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標(biāo)之一，也是手術(shù)前必要檢查項目，因此血小板檢測結(jié)果是否準(zhǔn)確，不僅會對出血性疾病患者、血栓性疾病患者的診斷結(jié)果產(chǎn)生影響外，還會決定其治療結(jié)果。當(dāng)前，臨床在對血小板組織進(jìn)行計數(shù)時，通常會對多種血液分析設(shè)備聯(lián)合應(yīng)用，并以電阻抗法為主要計數(shù)原理，然而該方案往往會受多種因素影響，其中又以血小板組織、大血小板組織、小血小板組織以及小紅細(xì)胞組織的體積方面表現(xiàn)出差異大的特征，針對此情況，為了保證血小板計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性，近年來光學(xué)法血小板計數(shù)被逐漸應(yīng)用到檢測活動當(dāng)中去，效果突出。

[關(guān)鍵詞] 全自動血液分析儀;血小板;檢測;影響因素

[中圖分類號] R446.11 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1672-5654（2019）01（a）-0173-02

全自動生化分析儀及醫(yī)療設(shè)備在我國各級醫(yī)院被廣泛使用，并在臨床診斷中提供了快捷準(zhǔn)確的結(jié)果，使得常規(guī)檢測更加方便、快捷。然而在儀器的操作過程中，由于醫(yī)務(wù)人員沒有深入了解儀器的原理，也沒有熟練掌握儀器的性能，導(dǎo)致全自動生化分析儀的檢測結(jié)果存在一定誤差[1]。全自動生化分析儀是應(yīng)用吸引探針來抽取適量的樣品進(jìn)行準(zhǔn)確的檢驗后送入混勻腔，再混同稀釋液共同流入轉(zhuǎn)換器，再利用轉(zhuǎn)換器根據(jù)流程檢驗白細(xì)胞、血紅蛋白和抗體和血小板的所有參數(shù)，對于前兩種指標(biāo)的分析，將前兩者的溶血劑放入測量室，首先進(jìn)行稀釋和溶解紅細(xì)胞，然后溶血劑會出現(xiàn)10 s的化學(xué)反應(yīng)，在此過程中紅細(xì)胞被溶解生成血紅蛋白，并形成紅色甲基血紅蛋白，血細(xì)胞沒有任何變化。另外，運(yùn)用dc細(xì)胞流式檢測器檢可以檢驗白細(xì)胞的數(shù)量及大小，在血紅蛋白的檢驗過程中，可使用光度計分析血蛋白濃度。在后兩者指標(biāo)的檢測中，將檢驗后的成分從測量室轉(zhuǎn)移到轉(zhuǎn)換器中，且大小和數(shù)量紅血球為主計算，運(yùn)用流式細(xì)胞儀法可對血小板進(jìn)行分析[2]。全自動生化分析儀主要應(yīng)用電容法和光電比色法的原理，而且輕易受多種因素的影響[3]。筆者就自身研究結(jié)果作如下綜述。

1? 不同計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)對血小板指數(shù)產(chǎn)生的影響

近年來，血小板專業(yè)計數(shù)工作中，以全自動血液分析設(shè)備進(jìn)行計數(shù)時，其計數(shù)方法有電阻抗法和光學(xué)法。

1.1? 電阻抗法

當(dāng)體積大小不等的血細(xì)胞通過儀器計數(shù)小孔時，引起小孔內(nèi)、外電流和電壓的變化，形成與血細(xì)胞數(shù)量相當(dāng)，體積大小相應(yīng)的脈沖變化，從而間接地區(qū)分出血細(xì)胞。但由于其檢測原理的局限性，結(jié)果易受多種因素影響，使血小板結(jié)果假性增高[4]。

申巖梅[1]對血液分析儀RT-7600血小板計數(shù)的準(zhǔn)確性研究認(rèn)為設(shè)備能夠?qū)κ軝z對象身體中的血小板組織以及紅細(xì)胞組織等進(jìn)行明確劃分，然而如果紅細(xì)胞組織的計數(shù)尚未達(dá)到55fl，而以電阻抗法對其展開專業(yè)計數(shù)，其計數(shù)結(jié)果通常會異常上升，表明機(jī)體紅細(xì)胞組織體積不足55fl時，設(shè)備會對其計數(shù)結(jié)果形成干擾因素，而且如果血小板組織直方圖出現(xiàn)不規(guī)則性特征，電阻抗法產(chǎn)生的計數(shù)值也會呈現(xiàn)出升高跡象[5-7]。而CD-1700血細(xì)胞分析設(shè)備則強(qiáng)調(diào)采用電子阻抗原理，血小板和紅細(xì)胞是在同一個檢測系統(tǒng)中通過顆粒大小來加以識別的，血小板與紅細(xì)胞測量的信號常有交叉，小紅細(xì)胞的脈沖信號可能視為血小板信號造成實驗誤差，而致血小板計數(shù)的假性增高[8]。

所以目前使用的血液分析儀，只要是用電阻抗法檢測血小板，都會存在血小板假性增高的問題。

1.2? 光學(xué)法

其應(yīng)用原理是：當(dāng)激光對紅細(xì)胞組織、血小板組織進(jìn)行充分照射時，紅細(xì)胞組織中血紅蛋白成分的濃度偏高，所以對于激光產(chǎn)生的折射指數(shù)也會相對偏高，一旦有紅細(xì)胞組織的殘骸、大血小板組織、紅細(xì)胞組織碎片等出現(xiàn)，盡管其體積表現(xiàn)出相似性特征，然而由于內(nèi)容物方面存在差異，所以對于激光產(chǎn)的折射指數(shù)也會存在巨大差異[9]。

ADVIAl20全自動六分類血細(xì)胞分析儀，由于采用了血細(xì)胞等滲球形化和兩維激光掃描等檢測原理，基本上排除了對血小板檢測的各種影響因素，從而也達(dá)到了血小板檢測快速，王德春[5]對該儀器檢測血小板的性能特點作了系統(tǒng)探討，認(rèn)為其檢測的重復(fù)性及相關(guān)性非常好;具有較寬的和很好的線性范圍;攜帶污染僅為0.25%，是目前檢測血小板最為理想的儀器之一。巫小莉[6]利用德國拜耳ADVIA2120二維激光法和美國雅培CD3700電阻法血小板計數(shù)進(jìn)行比較研究認(rèn)為，在病理情況下的大血小板、小紅細(xì)胞，特別是臨界值的血小板計數(shù)，電阻法結(jié)果差異較大，而二維激光法更接近手工法所檢測結(jié)果，計數(shù)結(jié)果比較準(zhǔn)確、可靠。同樣，王曉賢[7]等利用Sysmex XT-4000i對電阻法和光學(xué)法檢測血小板進(jìn)行評估，也認(rèn)為光學(xué)法在對小紅細(xì)胞、紅細(xì)胞碎片和大血小板各組檢測中，血小板組織的計數(shù)結(jié)果也會比電阻法更為精確[10-16]。

光學(xué)法盡管能降低小紅細(xì)胞組織、紅細(xì)胞組織碎片和大血小板等因素對血小板計數(shù)的影響，但是也存在一定的局限性，當(dāng)血小板聚集時卻無法消除其對血小板計數(shù)的影響[17]。

2? 異常形態(tài)血液細(xì)胞對血小板計數(shù)的影響

2.1? 紅細(xì)胞對血小板的影響

如果全自動血細(xì)胞分析儀采用電阻抗法檢測時，它根據(jù)顆粒的大小來區(qū)別細(xì)胞，紅細(xì)胞和血小板同在一個檢測通道，儀器把2～30 fl范圍的細(xì)胞判定為血小板，而將25～250 fl范圍的細(xì)胞判定為紅細(xì)胞，因而紅細(xì)胞與血小板之間存在計數(shù)的交叉區(qū)域。有研究認(rèn)為當(dāng)MCV<70 fl 時或 MCV為70～81.9 fl而RDW>14.5%巨大血小板，小紅細(xì)胞可干擾血小板計數(shù)[8]。葉長欽[9]等報道實驗MCV<70 fl的紅細(xì)胞會引起血小板計數(shù)假性增高;而MCV為70～81.9 fl的組中，紅細(xì)胞分布寬度（RDW）大于正常者血小板計數(shù)假性增高，RDW正常者對結(jié)果影響不大。當(dāng)MCV在65～70 fl之間時，血細(xì)胞分析儀與鏡檢法之間血小板計數(shù)結(jié)果無照著性差異，但當(dāng)MCV<65 fl時，因有多量的小紅細(xì)胞存在，大部份體積很小的紅細(xì)胞被計入血小板內(nèi)，而導(dǎo)致血小板數(shù)量假性增高，兩種方法之間具有明顯差異性[18-19]。

地中海貧血是遺傳性血紅蛋白病，屬于是小細(xì)胞低色素貧血。張?zhí)炖实萚11]認(rèn)為攜帶地貧基因時，紅細(xì)胞體積要顯著低于正常對照組。與對照組相比，采前和采后手工計數(shù)血小板均要高于自動計數(shù)，平均相差達(dá)19.3%。這是由于小體積的紅細(xì)胞在自動計數(shù)時會被誤判為血小板，造成血小板計數(shù)假性增高。說明紅細(xì)胞的大小與分布度對血小板計數(shù)有直接的影響[20-21]。

紅細(xì)胞碎裂如果用電阻抗法同樣也會引起血小板的假性增高[22]。

2.2? 血小板聚集

臨床所用抗凝劑以EDTA鹽為主，但是卻可能會有PLT聚集情況出現(xiàn)，以至于對EDTA-K2進(jìn)行應(yīng)用時，PLT值假性偏低情況十分普遍，表明對于血小板聚集時，無論是電阻法還是光學(xué)法血小板計數(shù)都無法得到可靠準(zhǔn)確的結(jié)果，此時就得依靠傳統(tǒng)的手工復(fù)檢來糾正血小板的數(shù)量[23-24]。

2.3? 對血小板計數(shù)的異常糾正

由于諸多因素對血小板計數(shù)的準(zhǔn)確性有影響，所以各個不同廠商都在擾儀器上的有不同的改進(jìn)。日本東亞Sysmex-9000該儀器中含有專業(yè)浮動界標(biāo)裝置，利用機(jī)內(nèi)計算機(jī)在血小板的計數(shù)范圍內(nèi)尋找直方圖的最低點，以此定為紅細(xì)胞與血小板的量限。同時，通過對血細(xì)胞分析設(shè)備充分利用，在對機(jī)體紅細(xì)胞組織以及血小板組織等進(jìn)行準(zhǔn)確計數(shù)時，往往要在相同通道條件下，對機(jī)體體內(nèi)顆粒組織的整體體積準(zhǔn)確計算、鑒別，以此形式即可獲取到檢測值，雖然還會有小紅細(xì)胞組織始終存在，但不會對血小板組織計數(shù)結(jié)果的測定結(jié)果帶來影響[25]。

3? 結(jié)語

在全自動血液分析儀飛速發(fā)展的今天，傳統(tǒng)的手工法正逐漸容易被檢驗人員淡忘，儀器計數(shù)只是一種過篩手段，對于異常標(biāo)本，必須進(jìn)行光學(xué)法或者手工法復(fù)核。

[參考文獻(xiàn)]

[1]? 申巖梅.血液分析儀RT-7600血小板準(zhǔn)確性與手工復(fù)檢的比較分析[J].延安大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)科學(xué)版，2012，10（4）：4-5.

[2]? 朱忠勇.應(yīng)用血液分析儀后復(fù)查血片的內(nèi)容和方法及程序[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，2008，26（12）：785-787.

[3]? 凌勵，周道銀，惠小陽，等.激光染色法與電電阻抗法檢測血小板方法的比較[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2009，27（10）：717-718.

[4]? 李玉芹，楊明清.小紅細(xì)胞對不同血細(xì)胞分析儀血小板計數(shù)結(jié)果的影響[J].中國實驗診斷學(xué)，2005，9（5）：790-791.

[5]? 王德春，林寶順，鄭合勇，等.ADVIA-120血細(xì)胞分析儀測定血小板性能的探討[J].齊魯醫(yī)學(xué)檢驗，2000，11（4）：88-89.

[6]? 巫小莉，周小棉，鄧穗德，等.二維激光法和電阻法計數(shù)血小板的比較研究[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2008，28（3）：268-269.

[7]? 王曉賢，劉潔，周永紅.XT-4000i血液分析儀血小板兩種測定方法與血涂片復(fù)檢的對比[J].中國實用醫(yī)藥，26（7）：106-107.

[8]? 楊繼紅.小紅細(xì)胞對血細(xì)胞分析儀血小板計數(shù)的影響[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2012，28（9）：70-71.

[9]? 葉長欽，羅輝，彭蘭芬，等.小紅細(xì)胞對電阻法測定血小板數(shù)影響的分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（6）：539-540.

[10]? 高長杰，陳英.小紅細(xì)胞對Sysmex XT-1800全自動血細(xì)胞分析儀計數(shù)血小板的影響[J].醫(yī)學(xué)檢驗與臨床，2009，20（3）：70-71.

[11]? 張?zhí)炖剩鼤粤?，向彩良，?攜帶地中海貧血基因?qū)κ止し蛛x血小板的影響[J].華南國防醫(yī)學(xué)雜志，2009，23（3）：42-44.

[12]? 胡前平.小紅細(xì)胞對血小板測定的影響[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2006，3（9）：480.

[13]? 劉鐵牛，陳要朋.小紅細(xì)胞對血小板計數(shù)的影響[J].血檢與止血雜志，，2006，12（6）：244.

[14]? 鐘政榮，沈繼龍.小紅細(xì)胞對血小板計數(shù)結(jié)果的影響[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2004，39（5）：384.

[15]? 張黎蕾，張葵，夏永泉，等.裂紅細(xì)胞引起假性血小板增多1例[J].臨床輸血與檢驗，2013，13（1）：78-80.

[16]? 張衛(wèi)云，孫朝暉，符玉文，等.小紅細(xì)胞引起Sysmexse-9000測定血小板結(jié)果錯誤1例[C]//北京：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)委員會醫(yī)學(xué)檢驗專業(yè)委員會，2005.

[17]? 黃勝，梁華英，洪流.自動浮動界標(biāo)對小紅細(xì)胞和血小板計數(shù)的影響[J].海南醫(yī)學(xué)，2004，15（7）：118-119.

[18]? 王一杉，梅燕萍，夏永祥.血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血小板計數(shù)時報警信號分析[J].海南醫(yī)學(xué)，2004，15（7）：122-119.

[19]? 李玉芹，楊明清.小紅細(xì)胞對不同血細(xì)胞分析儀血小板計數(shù)結(jié)果的影響[J].中國實驗診斷學(xué)，2005，9（5）：790-791.

[20]? 黃祥麗.血小板直方圖對血小板結(jié)果的參考作用[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8（11）：1361-1362.

[21]? 唐健辰.抗凝劑EDTA-K2致血小板假性減[J].檢驗醫(yī)學(xué)，2010，25（4）：286-287.

[22]? 徐志明，祁慧，李豐平.乙二胺四乙酸三鉀導(dǎo)致血小板假性減少分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2008，5（9）：539-540.

[23]? 易青.血常規(guī)檢測中血小板假性減少3例[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（9）：1197.

[24]? 朱海燕.EDTA-K2抗凝劑導(dǎo)致假性血小板減少的原因探計分析[J].淮海醫(yī)藥，2013，31（5）：433-434.

[25]? 陳偉，涂慧英，李月，等.3種血小板計數(shù)方法的比較研究[J].重慶醫(yī)學(xué)，2015，44（26）3678-3679.

（收稿日期：2018-09-25）