微柱凝膠法交叉配血出現(xiàn)不規(guī)則凝集的原因和安全輸血對(duì)策

羅儉權(quán) 李少靜 潘彩英 李樹平 黃洪飛

輸血不良反應(yīng)是由受血者對(duì)供血者的血液成分產(chǎn)生機(jī)體排斥反應(yīng)造成，因此，要依賴輸血科配血員嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范的交叉配血操作，選配合格的供血者，才能有效提高臨床輸血治療的安全性，為受血者的生命健康提供保障。輸血科需要持續(xù)反饋并總結(jié)改進(jìn)不規(guī)則凝集的原因及安全輸血對(duì)策，為臨床輸血提供寶貴的經(jīng)驗(yàn)。為此，本研究統(tǒng)計(jì)分析2017 年1 月—2018 年12 月本院輸血科發(fā)生交叉配血不合的原因和安全輸血策略的效果評(píng)價(jià)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇本院2017 年1 月—2018 年12 月3 983 例經(jīng)微柱凝膠法交叉配血成功輸注紅細(xì)胞成分的受血者作為研究對(duì)象，所有受血者均符合輸血適應(yīng)證，并根據(jù)病情使用適量輸血制品，全部應(yīng)用同型血輸注。

1.2 儀器與試劑 采用中山市生科試劑的抗人球蛋白檢測(cè)卡及配套低離子強(qiáng)度鹽溶液，配套使用醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)多功能離心機(jī)TD2Y 和定時(shí)溫育器。

1.3 微柱凝膠法

1.3.1 交叉配血試驗(yàn) 離心供血者和受血者配血管，將紅細(xì)胞洗滌3 次，配制濃度為0.8%左右的紅細(xì)胞懸液，對(duì)應(yīng)加入主側(cè)凝膠微管和次側(cè)凝膠微管中，每管25 μL，之后在主側(cè)凝膠微管中加入25 μL受血者血漿，次側(cè)凝膠微管加入25 μL 供血者血漿，輕叩震勻后放入溫育器，37 ℃孵育15 min，離心機(jī)定速定時(shí)65×g 離心2 min、182×g 離心3 min，觀察判斷交叉結(jié)果。

1.3.2 抗體篩查試驗(yàn) 配制受血者篩選紅細(xì)胞濃度至0.8%左右，對(duì)應(yīng)每支微管加入25 μL，將待檢血漿加入對(duì)應(yīng)微管每孔25 μL，輕叩震勻后放入溫育器，37 ℃孵育15 min，離心機(jī)定速定時(shí)65×g 離心2 min、182×g 離心3 min，觀察不規(guī)則抗體篩查結(jié)果。

1.4 肉眼判讀結(jié)果 陽性（+）為紅細(xì)胞集中在凝膠表面或膠中；陰性（-）為紅細(xì)胞完全沉于凝膠底部。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 20.0 軟件處理數(shù)據(jù)，分類統(tǒng)計(jì)臨床資料，并進(jìn)行原因分析。

2 結(jié)果

2.1 交叉配血情況 3 983 例微柱凝膠法交叉配血試驗(yàn)和抗體篩查試驗(yàn)結(jié)果以及各臨床科室交叉配血情況，見表1。

表1 2017—2018 年本院3 983 例受血者的交叉配血情況

2.2 交叉配血不符合的原因分析和安全輸血對(duì)策

2.2.1 交叉配血未發(fā)現(xiàn)主側(cè)凝集陽性，原因?yàn)槿渴苎呔斪⑼脱?xì)胞，且在交叉前按規(guī)定復(fù)核受血者和供血者血型（正反定型法），血型不準(zhǔn)確時(shí)拒絕發(fā)血。部分老年或新生兒受血者的血型物質(zhì)抗原效價(jià)下降或表現(xiàn)弱，包括存在亞型，在復(fù)核受血者和供血者血型時(shí)可分析鑒定。見圖1。

2.2.2 交叉配血不符合均為次側(cè)不合，排除試劑質(zhì)量和操作失誤情況，主要原因：① 受血者產(chǎn)生自身抗體，多見于溶血性貧血患者，如腫瘤科和感染科反復(fù)輸血患者，凝集陽性率分別占3.16%和4.72%，通過重新預(yù)約洗滌紅細(xì)胞或去白紅細(xì)胞，排除次側(cè)凝集影響，降低輸血受血者的發(fā)熱反應(yīng)；② 有多次輸血史的貧血患者或有妊娠史的經(jīng)產(chǎn)婦，體內(nèi)產(chǎn)生免疫性抗原吸附在紅細(xì)胞表面，造成紅細(xì)胞致敏，對(duì)供血者血漿產(chǎn)生不規(guī)則凝集。通過重新預(yù)約洗滌紅細(xì)胞，排除次側(cè)凝集影響，確保輸血療效。緊急用血，使用盲配，選用多個(gè)供血袋，找到完全相合的供血者，降低輸血風(fēng)險(xiǎn)。

圖1 1A 為復(fù)核受血者血型，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則凝集，洗滌血細(xì)胞降低BCE 負(fù)電荷重新確定血型；1B 為復(fù)核受血者血型，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則凝集，放散處理溫育去除zeta 電位重新確定血型；1C 為復(fù)核患者血型，采用標(biāo)準(zhǔn)血細(xì)胞反定型法確定受血者血型存在亞型

3 討論

由于人類紅細(xì)胞所含凝集原不同，最常見的血型系統(tǒng)為ABO 血型，其次為Rh 血型系統(tǒng)，大部分為Rh 陽性，極少數(shù)為Rh 陰性，ABO 血型和Rh 血型相互獨(dú)立，并非平行的血型［1］。人體血型系統(tǒng)有多種類型，如果進(jìn)行同種異體輸血，尤其是輸全血，將有很多不同抗原物質(zhì)進(jìn)入受血者體內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)抗體，容易導(dǎo)致輸血不良反應(yīng)或輸血無效。同時(shí)，大量或多次輸血也可使血液循環(huán)超負(fù)荷，全血和血漿都可擴(kuò)充血容量，血容量正常的受血者輸血量過大或速度過快，可發(fā)生急性肺水腫造成肺功能損傷。成分輸血即將血液中的各種成分（包括有形成分和無形成分）分離、加工、提純?yōu)楦黝愌褐破?，有針?duì)性地輸注相關(guān)血液成分，然后合理解決患者的不同需要，以達(dá)到治療目的的一種輸血措施［2］。臨床醫(yī)師必須嚴(yán)格掌握輸血適應(yīng)證，做到“能不輸者堅(jiān)決不輸，能少輸者決不多輸”，判斷患者所需血液成分進(jìn)行輸注，盡可能不輸全血；具備自身輸血條件的醫(yī)療機(jī)構(gòu)要積極開展自身輸血，不輸或少輸同種異體血［3］。

異體輸血需做好交叉配血前受血者和供血者的正反定型，微柱凝膠法交叉配血發(fā)現(xiàn)不規(guī)則凝集，需要預(yù)備使用洗滌紅細(xì)胞緊急用血，使用盲配模式找到完全相合的血袋供血者。

由表1 可發(fā)現(xiàn)，即使受血者全部為同型血交叉配血，仍發(fā)現(xiàn)2.54%的凝集陽性率。原因是血型相同的同種異體輸血，必然存在輸血風(fēng)險(xiǎn)，其中兒科輸注紅細(xì)胞的凝集陽性率最高（9.24%）。分析原因和對(duì)策，與章文等［4］觀點(diǎn)相同，即地中海貧血兒童將定期輸血作為治療手段，輸血時(shí)應(yīng)以洗滌紅細(xì)胞為主，重點(diǎn)補(bǔ)充紅細(xì)胞糾正貧血和增加攜氧量。另外需注意地中海貧血與缺鐵性貧血的鑒別［5］。由圖1 可得，交叉配血前進(jìn)行正反定型復(fù)核血型，可判斷受血者與供血者血型是否一致，避免交叉配血主側(cè)不合。

本研究發(fā)現(xiàn)的交叉配血不合均為次側(cè)不合，排除試劑質(zhì)量和操作失誤的情況，主要為上述兩個(gè)方面原因，同時(shí)為避免抗人球蛋白微柱凝膠法交叉配血陽性，防止受血者輸血過程中出現(xiàn)溶血性輸血反應(yīng)，醫(yī)院應(yīng)提前準(zhǔn)備洗滌紅細(xì)胞。騰方等［6］研究表明，排除自身免疫性溶血性貧血情況后，輸注洗滌紅細(xì)胞能有效減少受血者輸血反應(yīng)的發(fā)生，而快速大量輸血以及新生兒輸血時(shí)應(yīng)進(jìn)行預(yù)熱（＜32 ℃）。輸注血制品后出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)，如發(fā)熱、寒戰(zhàn)、過敏、心悸、惡心嘔吐、血尿等，臨床應(yīng)及時(shí)停止輸血，執(zhí)行輸血不良反應(yīng)處置流程，做好不良反應(yīng)報(bào)告，分析總結(jié)原因并持續(xù)改進(jìn)，提供臨床對(duì)輸血受血者過敏體質(zhì)的診斷和輸血耐受性的評(píng)估。

歐陽錫林等［7］提出對(duì)圍手術(shù)期受血者可采用自體血液進(jìn)行自體輸血，與臨床使用交叉配血比較，自體輸血可降低輸血風(fēng)險(xiǎn)。手術(shù)前可采集受血者自身血液保存，供手術(shù)期間輸用，也可制成冰凍紅細(xì)胞長(zhǎng)期保存。術(shù)中采用回收系統(tǒng)或“洗血細(xì)胞機(jī)”，經(jīng)肝素抗凝、生理鹽水洗滌和濃縮得到濃縮紅細(xì)胞，再根據(jù)術(shù)中失血情況將自體血回輸給受血者［8-10］。

綜上所述，微柱凝膠法交叉配血技術(shù)具有安全快捷、敏感度和特異度強(qiáng)、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果易于保存、可自動(dòng)化操作等優(yōu)點(diǎn)，為臨床安全輸血提供了很好的保障。出現(xiàn)不規(guī)則凝集的原因，包括抗人球蛋白試驗(yàn)陽性、假凝集、抗篩陽性、操作不當(dāng)、微柱凝膠干涸等，需要按照原因分析和安全輸血原則，采取不同解決方法和對(duì)策。保障安全輸血最好的方法，是規(guī)范應(yīng)用血液和血液制品，堅(jiān)持輸血指導(dǎo)原則。減少異體輸血的風(fēng)險(xiǎn)，大力發(fā)展自體輸血技術(shù)，以達(dá)到降低輸血風(fēng)險(xiǎn)和輸血成本的良好效果。