贛州市野生茶樹資源的茶多酚、游離氨基酸及其組分研究

王璞 劉知遠 吳金華 陳清華 江樹華郭偉 劉躍清 張斐斐 方貽文 倪德江

(1.江西省贛州市贛南科學院 341000；2.華中農(nóng)業(yè)大學園藝林學學院園藝植物生物學教育部重點實驗室 430070；3.江西省贛州市上猶縣茶果局341200；4.江西省贛州市農(nóng)業(yè)科學研究所341000)

贛州市是著名的革命老區(qū)，位于江西省南部，氣候條件適宜茶樹生長，野生茶樹資源非常豐富[1]。上猶、崇義、定南、安遠、尋烏、信豐都曾發(fā)現(xiàn)野生大茶樹，樹形從灌木型到小喬木型，樹冠從披張到直立，類型多樣[2]。野生茶樹資源的收集和早期評價對于資源多樣性、資源分類和資源利用都有十分重要的意義，鮮葉茶多酚和游離氨基酸含量在資源早期評價中尤為關(guān)鍵。酚氨比決定鮮葉的適制性，比值低于8的單株適制綠茶，比值在8到16之間的單株紅綠兼制，比值高于16的單株適制紅茶[3]。此外，兒茶素作為茶多酚中關(guān)鍵的功能成分和滋味物質(zhì)，其總量和各組分含量也是資源評價的重要組成部分。茶氨酸是茶樹中含量最高的氨基酸組分，占茶樹氨基酸總量的80%左右。茶氨酸具有鎮(zhèn)靜安神功能，也是茶湯中重要的滋味物質(zhì)，茶氨酸和其它氨基酸組分在鮮葉中的含量同樣是資源評價的重要部分[4]。本研究選取贛州市4個資源點的8份野生茶樹資源，對其茶多酚和游離氨基酸總量進行測定，了解其適制性；選取每個資源點各一份資源，對其兒茶素和氨基酸組分含量進行分析，全面了解其品質(zhì)特點。本研究擴大了贛州市茶樹種質(zhì)資源庫，也有助于對贛州市野生茶樹資源的進一步開發(fā)和利用。

1 材料與方法

1.1 材料來源

本研究以贛州市4個資源點采集的8份野生茶樹資源的葉片為材料，采摘標準為駐芽第一葉，采摘時間為2017年12月，每份資源的基本情況見表1。

1.2 測定方法

茶多酚總量測定采用酒石酸亞鐵法，游離氨基酸總量測定采用茚三酮比色法。茶多酚總量測定具體方法如下：取若干茶鮮葉放置于研缽，加入液氮進行研磨至粉末，稱取0.1g茶粉，加入400μL70%乙醇，渦旋1min，12000rpm離心5min，吸取50μL上清液加入3mL緩沖溶液，1mL酒石酸亞鐵溶液，加水定容至5mL，用分光光度儀在540nm條件下測定吸光值。游離氨基酸總量測定具體方法如下：取若干茶鮮葉放置于研缽，加入液氮進行研磨至粉末，稱取0.5g茶粉，加入2mL水，在90℃下水浴加熱30min，冷卻，吸取0.4mL上清液，加入4mL水，500μL緩沖溶液，500μL茚三酮，100℃下水浴加熱15min，冷卻后加水定容至25mL，用分光光度儀在570nm條件下測定吸光值。LC-MS參照阮建云等人的方法[5]，浸提液中甲醇：水=3:1，內(nèi)標為乙羥茶堿。標樣購自Sigma公司，色譜純級甲醇購自Thermo公司，水為超純水。

表1 贛州市野生資源樣品的基本情況

2 結(jié)果與分析

2.1 茶多酚和游離氨基酸總量的測定

如表2所示，齊云山野生資源的茶多酚總量在30%左右，2個單株的差異很??；社墩子野生資源2個單株的茶多酚總量差異很大，1號茶多酚總量為41.24%，2號茶多酚總量在24.84%；賊古坑野生資源的茶多酚總量為22.11%～27.89%，3個單株的差異不大；陽嶺野生資源茶多酚總量為29.18%。茶樹鮮葉的茶多酚總量一般為15%～40%，社墩子1號的多酚含量達到41.24%，可以作為特色資源和品種選育的候選單株。齊云山野生資源2個單株的游離氨基酸總量差異較大，1號游離氨基酸總量為1.55%，2號游離氨基酸總量為2.54%；社墩子野生資源2個單株的游離氨基酸總量差異非常大，1號游離氨基酸總量為2.18%，2號游離氨基酸總量為6.67%；賊古坑野生資源的游離氨基酸總量為3.05%～3.53%，3個單株差異較??；陽嶺野生資源的游離氨基酸總量為0.89%。茶樹鮮葉的游離氨基酸總量一般為2%～4%，社墩子2號的游離氨基酸含量達到6.67%，陽嶺1號游離氨基酸含量不到1%，可以作為特色資源和品種選育的候選單株。從酚氨比來看，齊云山1號、社墩子1號、陽嶺1號適制紅茶，社墩子2號、賊古坑2號、賊古坑3號適制綠茶，齊云山2號、賊古坑1號紅綠兼制。

表2 茶多酚和游離氨基酸總量測定

2.2 兒茶素組分分析

每個資源點挑選1份資源進行兒茶素組分分析，結(jié)果見表3。在齊云山1號的兒茶素組分中，EGCG>EGC>CG>EC>GC>C>GCG;在社墩子1號和賊古坑1號的兒茶素組分中，EGCG>EGC>CG>EC>GC>GCG>C;在陽嶺1號的兒茶素組分中，EGCG>CG>EGC>EC>GCG>GC>C。齊云山1號、社墩子1號、賊古坑1號的兒茶素組成較為相似，陽嶺1號的兒茶素組成稍有不同。在4份茶樹野生資源中，EGCG、EGC、CG含量均明顯高于其它兒茶素組分。LC-MS的兒茶素總量結(jié)果與酒石酸亞鐵法的多酚結(jié)果基本一致，因為兒茶素是茶樹葉片中含量最高的多酚類物質(zhì)。

2.3 氨基酸組分分析

每個資源點挑選1份資源進行氨基酸組分分析，結(jié)果見表4。在4份茶樹野生資源中，檢出的氨基酸有纈氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、茶氨酸，其中茶氨酸含量均占氨基酸總量的70%以上。齊云山1號和陽嶺1號的氨基酸組成較為相似，社墩子1號和賊古坑1號的氨基酸組成較為相似。LC-MS的氨基酸總量結(jié)果與茚三酮法的檢測結(jié)果基本一致。

表3 野生資源的兒茶素組分分析

注：數(shù)值表示該物質(zhì)與內(nèi)標物質(zhì)的峰面積比值(相對峰面積)。

表4 野生資源的氨基酸組分分析

注：數(shù)值表示該物質(zhì)與內(nèi)標物質(zhì)的峰面積比值(相對峰面積)。

3 小結(jié)

利用酒石酸亞鐵比色法和茚三酮比色法分析江西省贛州市4個資源點的8份野生茶樹資源鮮葉茶多酚和游離氨基酸總量，結(jié)果表明：社墩子1號的茶多酚總量很高，社墩子2號的游離氨基酸總量很高，陽嶺1號游離氨基酸總量很低，可作為特色資源和品種選育的候選單株。利用LC-MS法分析其中4份野生茶樹資源鮮葉兒茶素和氨基酸組分，結(jié)果表明：齊云山1號、社墩子1號、賊古坑1號的兒茶素組成較為相似，陽嶺1號的兒茶素組成稍有不同；齊云山1號和陽嶺1號的氨基酸組成較為相似，社墩子1號和賊古坑1號的氨基酸組成較為相似。