不同劑量阿托伐他汀對急性冠脈綜合征患者HO-1/HbCO系統(tǒng)、血清sOX40L水平影響及其與炎性因子的相關(guān)性分析

張馳，王麗岳，任浩進(jìn)，龔凡，朱曉剛，徐超

隨著人們生活水平以及生活飲食習(xí)慣的改變，我國冠心病的發(fā)病率和病死率正逐年增加，其中急性冠狀動脈綜合征(ACS)是冠心病的一種急癥，臨床分為心肌梗死和不穩(wěn)定型心絞痛，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[1]。研究顯示，動脈粥樣硬化(AS)是引發(fā)ACS的重要病理基礎(chǔ)，其斑塊破裂導(dǎo)致血栓的形成，進(jìn)而阻塞冠狀動脈管腔，誘發(fā)ACS的發(fā)生[2]。炎性免疫反應(yīng)在AS的形成、發(fā)展、不穩(wěn)定性斑塊破裂以及形成血栓等階段起著重要的作用，又是引發(fā)斑塊破裂的重要因素。而炎性免疫反應(yīng)的發(fā)生與體內(nèi)T細(xì)胞密切相關(guān)，同時(shí)機(jī)體內(nèi)存在多種配體可以對T細(xì)胞信號通路進(jìn)行激活，其中可溶性O(shè)X40L(sOX40L)是較為重要的一種，主要于巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等活化的抗原呈遞細(xì)胞表面進(jìn)行表達(dá)[3]。另外，白細(xì)胞介素-6(IL-6)是一種由單核巨噬細(xì)胞合成的細(xì)胞因子，其與ACS的起始、發(fā)展存在較為密切關(guān)系。C反應(yīng)蛋白(CRP)是一種炎性反應(yīng)急性期反應(yīng)蛋白，與ACS的發(fā)生關(guān)系密切，可以為ACS患者的病情以及預(yù)后提供重要的診斷信息[4]。HO-1是一種機(jī)體重要的可以分解血紅素形成鐵離子、膽綠素以及一氧化碳的誘導(dǎo)型抗氧化酶類物質(zhì)。HO-1/HbCO系統(tǒng)是人體內(nèi)部重要的內(nèi)源性防御系統(tǒng)，具有較好的抗氧化、抗炎作用[5]。而阿托伐他汀除具有典型的降脂功效以外，還具有抗炎、抗氧化、改善內(nèi)皮細(xì)胞以及增強(qiáng)HO-1表達(dá)的作用，對動脈粥樣硬化具有一定的防治功效?，F(xiàn)觀察不同劑量阿托伐他汀對ACS患者HO-1/HbCO系統(tǒng)、sOX40L水平以及相關(guān)炎性細(xì)胞因子的影響，分析HO-1/HbCO系統(tǒng)、sOX40L水平與相關(guān)炎性細(xì)胞因子的相關(guān)性，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年5月—2018年5月武漢科技大學(xué)附屬普仁醫(yī)院心內(nèi)科收治ACS患者96例作為研究對象，按照隨機(jī)數(shù)字法分為觀察組和對照組，各48例。對照組給予常規(guī)劑量阿托伐他汀，觀察組給予大劑量阿托伐他汀，2組患者在性別、年齡、病程、BMI、疾病類型以及合并癥等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者及家屬知情同意并簽署知情同議書。

1.2 選擇標(biāo)準(zhǔn) (1)診斷標(biāo)準(zhǔn)：① 急性心肌梗死診斷標(biāo)準(zhǔn)參考WHO制定的急性心肌梗死(AMI)診斷標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)規(guī)定[6]；②不穩(wěn)定型心絞痛診斷標(biāo)準(zhǔn)參考心血管病中華醫(yī)學(xué)會分會關(guān)于不穩(wěn)定性心絞痛的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。(2)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)者；②入院前2月內(nèi)，未服用他汀類降脂藥物者。(3)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并有嚴(yán)重的肝腎功能不全者；②合并有全身性免疫疾病、風(fēng)濕性疾病、結(jié)締組織病以及周圍血管性疾病者；③近2周經(jīng)過手術(shù)治療或者嚴(yán)重感染患者；④對他汀類藥物過敏者；⑤合并有嚴(yán)重的心包炎、主動脈夾層、心源性休克以及心力衰竭者；⑥合并有系統(tǒng)性紅斑狼瘡以及風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等系統(tǒng)性炎性疾病者；⑦依從性差，中途退出者。

表1 2組患者基線資料比較

1.3 治療方法 2組患者均給予ACEI類、硝酸酯類、β受體阻滯劑、鈣通道阻滯劑、溶栓劑以及抗凝劑等藥物進(jìn)行常規(guī)基礎(chǔ)治療。對照組患者另加阿托伐他汀20 mg/d，觀察組患者另加用阿托伐他汀40 mg/d，均睡前口服， 1次/d，治療周期均為1個(gè)月。

1.4 觀察指標(biāo)與方法 于治療前以及治療后5 d清晨抽取患者空腹肘靜脈血5 ml，離心機(jī)[Ortho BioVue；強(qiáng)生(上海)醫(yī)療器材有限公司]3 000 r/min離心10 min取血清，冰箱-75℃條件下保存，待測。

1.4.1 血清HO-1/HbCO系統(tǒng)、sOX40L檢測：(1)血清HO-1水平測定。采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行測定，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司，操作方法嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。(2)血清碳氧血紅蛋白(HbCO)水平測定。選用具塞試管盛裝0.02 mol/L Tris的稀釋液15 ml，再向其中加入血清10 μl，充分混合，加入連二亞硫酸鈉60 mg混勻，置于室溫條件下10 min左右，選用紫外分光光度計(jì)(島津，UV2450型)對其進(jìn)行400～500 nm波長光譜掃描，記錄420 nm、430 nm處吸光度，通過HbCO%=[0.94(A420/A430)-0.69]×100%進(jìn)行血清樣品碳氧血紅蛋白濃度的計(jì)算[6]。(3)血清sOX40L測定。采用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司，操作方法嚴(yán)格按照說明書執(zhí)行。

1.4.2 血清炎性因子測定：CRP、IL-6采用酶聯(lián)免疫吸附法，試劑盒購于上海滬鼎生物科技有限公司。

1.4.3 血脂水平測定：血清三酰甘油(TG)和總膽固醇(TC)采用酶法測定，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平采用磷鎢沉淀法測定，通過Friedwald公式對低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平進(jìn)行計(jì)算。

2 結(jié) 果

2.1 2組患者HO-1/HbCO系統(tǒng)、血清sOX40L比較 治療前2組患者HO-1、HbCO、sOX40L水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后，2組患者的HO-1、HbCO水平均明顯升高，sOX40L水平均降低。且觀察組患者上述指標(biāo)改善較對照組更為顯著(P<0.01)，見表2。

2.2 2組患者血清CRP、IL-6水平比較 治療前2組患者 CRP以及IL-6水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。治療后， 2組均較治療前明顯降低，且觀察組降低較對照組更為顯著(P<0.01)，見表3。

表3 2組患者治療前后血清CRP、IL-6水平比較

2.3 2組患者血脂水平比較 治療前，2組患者血脂水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，2組患者血清TC、LDL-C水平均明顯降低，且觀察組患者降低較對照組更為顯著(P<0.01)。2組患者治療前后TG、HDL-C水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表4。

2.4 相關(guān)性分析 HO-1、HbCO水平與CRP、IL-6水平呈負(fù)相關(guān)， sOX40L水平與CRP、IL-6水平呈正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表5。

3 討 論

目前臨床上對于ACS的治療應(yīng)用阿托伐他汀劑量，較為常用的為10 mg/d、20 mg/d，有少數(shù)患者給予80 mg/d進(jìn)行治療[8]。本研究在20 mg/d常規(guī)治療的基礎(chǔ)上，研究40 mg/d劑量對于ACS患者的影響，并分析治療后患者的HO-1/HbCO系統(tǒng)、血漿sOX40L水平與CRP、IL-6的相關(guān)性。CRP是一種半衰期為19 h，能與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖結(jié)合的急性期炎性標(biāo)志物，主要是通過IL-6等炎性因子的刺激，經(jīng)由人體肝臟合成分泌。正常情況下，人體內(nèi)其血清濃度相對較低，并與冠心病病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[9]。IL-6也是一種與冠心病發(fā)展密切相關(guān)的急性期反應(yīng)蛋白，源起于經(jīng)過活化的單核巨噬細(xì)胞，另外其還是一種具有凝血功能的促炎性細(xì)胞因子，對被激活的巨噬細(xì)胞具有一定的浸潤分化促進(jìn)作用，可以增強(qiáng)相關(guān)細(xì)胞因子以及黏附因子的表達(dá)，一定程度增強(qiáng)機(jī)體炎性反應(yīng)，進(jìn)而加劇ACS的病情惡化[10-12]。HO-1是一種廣泛分布于組織中網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞以及單個(gè)核細(xì)胞的誘導(dǎo)型蛋白，人體在受到重金屬、缺氧、氧化應(yīng)激狀態(tài)以及細(xì)胞因子等的刺激下，可誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)的HO-1活性增強(qiáng)，從而起到炎性反應(yīng)抑制以及抗氧化作用，對血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)作用。另外，HO-1還可以通過對細(xì)胞生長進(jìn)行調(diào)節(jié)，從而致使內(nèi)皮細(xì)胞凋亡量減少，穩(wěn)定機(jī)體的內(nèi)皮系統(tǒng)，抑制血管平滑肌增殖，促進(jìn)其凋亡，減輕血管的不良重構(gòu)[13]。HO-1誘導(dǎo)產(chǎn)生的HbCO具有血管直接擴(kuò)張作用。HbCO可以通過抑制血管、舒張血管進(jìn)而降低血壓和維持血液灌注，在ACS患者缺氧條件下，調(diào)節(jié)冠狀動脈血流量。另外，HbCO作為一種重要的內(nèi)皮依賴性血管舒張因子，可以對血管舒張功能進(jìn)行調(diào)節(jié)，抑制血管平滑肌增殖，并對NO的心肌保護(hù)作用起到增強(qiáng)作用[14]。

表2 2組患者治療前后血清HO-1、HbCO、sOX40L水平比較

表4 2組患者治療前后血脂水平比較

表5 HO-1/HbCO系統(tǒng)、血清sOX40L水平與CRP、IL-6相關(guān)性分析

本研究結(jié)果提示，40 mg劑量的阿托伐他汀可以更有效地改善ACS患者的炎性反應(yīng)，同時(shí)增強(qiáng)HO-1/HbCO系統(tǒng)能力。這是由于阿托伐他汀是一種HMG-CoA還原酶抑制劑，可增強(qiáng)LDL基因受體的表達(dá)，抑制體內(nèi)膽固醇的合成，減少肝臟對于LDL-C的合成分泌[15-17]。多項(xiàng)研究顯示,機(jī)體血脂水平升高,可以增加冠心病的發(fā)生率以及加重病情,是ACS的發(fā)病以及發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素之一[18]。其還可以加劇人體對于異戊二烯類物質(zhì)的消耗，增加HbCO含量，一定程度抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生，可以對血管內(nèi)皮功能產(chǎn)生有效改善[19]；阿托伐他汀還可以對OX40/OX40L信號通路表達(dá)產(chǎn)生抑制作用，從而達(dá)到降低血管細(xì)胞對于組織因子、金屬基質(zhì)蛋白以及黏附因子等炎性因子的表達(dá)，抑制機(jī)體炎性反應(yīng)以及免疫反應(yīng)的發(fā)生，達(dá)到動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定的效果，對ACS的病發(fā)起到預(yù)防作用[20]。由于IL-6促炎因子對于CRP的形成具有增強(qiáng)作用，兩者相關(guān)性好，另外，sOX40L與機(jī)體炎性反應(yīng)關(guān)系密切，CRP、IL-6等炎性因子可通過聚集浸潤或者間接性地產(chǎn)生OX40L等細(xì)胞因子，激活信號通路，故而sOX40L與CRP、IL-6等炎性因子呈現(xiàn)正相關(guān)，其之間的這種協(xié)同性對于ACS疾病也具有一定的預(yù)測價(jià)值[21]。由于阿托伐他汀具有改善內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用，可以增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞對于HO-1以及HbCO的分泌，起到擴(kuò)張血管、抑制調(diào)節(jié)血流量、抑制氧化應(yīng)激狀態(tài)、減輕炎性反應(yīng)的發(fā)生、保護(hù)心肌細(xì)胞的作用，故其治療后血清HO-1、HbCO水平升高，與CRP、IL-6呈負(fù)相關(guān)。

綜上所述，阿托伐他汀治療的急性冠狀動脈綜合征患者，其血清CRP、IL-6水平與sOX40L水平呈正相關(guān)，與HO-1以及HbCO水平呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

利益沖突：無

作者貢獻(xiàn)聲明

張馳：整理資料，分析資料、撰寫論文；王麗岳：修改論文；任浩進(jìn)：收集整理資料，分析數(shù)據(jù)，圖表設(shè)計(jì)；龔凡：收集整理資料，參考書籍查找；朱曉剛、徐超：收集資料