湖羊小反芻獸疫和羊痘疫苗混合注射免疫效果評(píng)價(jià)

徐雅萍，邱寒峰，吳 婷，張柳燕，嚴(yán) 羽，沈躍順，俞乾挺，翟漢平，朱坤興

(1.浙江省桐鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，浙江桐鄉(xiāng)314500 ； 2.浙江省桐鄉(xiāng)市畜牧獸醫(yī)局，浙江桐鄉(xiāng)314500)

小反芻獸疫和羊痘都是我國(guó)一類動(dòng)物疫病，是當(dāng)前危害湖羊養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要疾病。目前，疫苗免疫仍是防控小反芻獸疫和羊痘最有效的方法[1-3]。根據(jù)周邊地區(qū)傳染病的流行情況，浙江省桐鄉(xiāng)市要求對(duì)湖羊口蹄疫、小反芻獸疫和羊痘3種疫病實(shí)行強(qiáng)制免疫，并取得了不錯(cuò)的防疫效果。近年來(lái)，桐鄉(xiāng)市湖羊存欄18萬(wàn)頭左右，以中小規(guī)模養(yǎng)殖為主，過(guò)多的強(qiáng)制免疫項(xiàng)目，增加了基層動(dòng)物防疫工作量，浪費(fèi)人力、物力，還會(huì)增加動(dòng)物應(yīng)激，直接影響動(dòng)物防疫水平。據(jù)研究報(bào)道，關(guān)于2種疫苗同時(shí)注射運(yùn)用在豬病防控上的成功案例已有不少，如豬瘟疫苗和豬偽狂犬病疫苗[4]，豬瘟疫苗和豬圓環(huán)病毒疫苗[5]。為了探索和創(chuàng)新動(dòng)物免疫新方法，進(jìn)一步提升防疫工作效率，特開(kāi)展本次湖羊小反芻獸疫和羊痘疫苗分點(diǎn)同時(shí)注射和混合一針注射的免疫對(duì)比試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 浙江省桐鄉(xiāng)市某規(guī)模湖羊場(chǎng)選擇120日齡以上未進(jìn)行過(guò)疫苗免疫注射的健康湖羊32頭，隨機(jī)分成2組，試驗(yàn)組16頭，對(duì)照組16頭。

1.2 疫苗及主要試劑 小反芻獸疫活疫苗(批號(hào)：2016001-2)，購(gòu)自新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司；山羊痘活疫苗(批號(hào)：201601)，購(gòu)自遼寧益康生物股份有限公司。小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心。羊痘抗體ELISA檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自蘭州獸醫(yī)研究所。

1.3 免疫及抗體監(jiān)測(cè)方案 試驗(yàn)組小反芻、羊痘疫苗采用一針注射完成，將500頭份小反芻獸疫疫苗和500頭份羊痘疫苗一起溶于生理鹽水中，定容到500 mL，尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射1 mL/頭；對(duì)照組則采用分點(diǎn)同時(shí)注射法，小反芻獸疫疫苗頸部皮下注射，羊痘疫苗尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射，注射劑量相同。分別于免疫后7、14、28、70、210 d經(jīng)頸靜脈采血，分離血清，檢測(cè)及分析抗體水平和免疫合格率。

1.4 臨床不良反應(yīng)觀察 所有試驗(yàn)羊在免疫注射后連續(xù)觀察7 d，主要觀察羊只的精神狀況、采食、飲水、體溫是否正常以及是否有其他嚴(yán)重不良反應(yīng)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 檢測(cè)數(shù)據(jù)按接種疫苗的種類進(jìn)行分類統(tǒng)計(jì)，小反芻獸疫和羊痘均以抗體陽(yáng)性率表示，采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，以P<0.05和P>0.05 表示為差異顯著和差異不顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床觀察 試驗(yàn)羊在免疫注射后連續(xù)觀察7 d，均未出現(xiàn)明顯的不良反應(yīng)。

2.2 小反芻獸疫抗體檢測(cè)分析 免疫后7、14、28、70、210 d分別采血進(jìn)行小反芻獸疫抗體檢測(cè)，結(jié)果顯示，試驗(yàn)組和對(duì)照組在免疫后7 d抗體合格率分別達(dá)到93.75%和100%，之后抗體一直維持在較高水平，28 d后有緩慢下降趨勢(shì)，直至免疫后7個(gè)月，試驗(yàn)組和對(duì)照組的抗體合格率都仍在85%以上，同為87.5% (表1)，2組之間小反芻獸疫抗體合格率差異不顯著(P>0.05)。

表1 PPR抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果

2.3 羊痘抗體檢測(cè)分析 免疫后7、14、28、70、210 d分別采血進(jìn)行羊痘抗體檢測(cè)，結(jié)果顯示,試驗(yàn)組和對(duì)照組在免疫后7 d抗體合格率分別達(dá)到87.5%和100%，之后試驗(yàn)組有一個(gè)上升趨勢(shì)，28 d時(shí)抗體合格率達(dá)到100%，而對(duì)照組抗體合格率一直維持100%，28 d后2組都呈現(xiàn)緩慢下降趨勢(shì)，直至免疫后7個(gè)月，試驗(yàn)組和對(duì)照組的抗體合格率分別為75%和81.25% (表2)，2組之間羊痘抗體合格率差異不顯著(P﹥0.05)。

表2 Qrf抗體水平監(jiān)測(cè)結(jié)果

3 討論

本試驗(yàn)的試驗(yàn)動(dòng)物是120日齡以上未進(jìn)行過(guò)疫苗免疫注射的健康湖羊，避免了免疫抗體的影響，同時(shí)也排除了母源抗體的干擾。試驗(yàn)結(jié)果表明，小反芻獸疫疫苗和羊痘疫苗混合尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射組與單苗分點(diǎn)注射組相比，無(wú)明顯不良反應(yīng)，臨床癥狀差異不顯著。從免疫后7 d到免疫后7個(gè)月，小反芻獸疫和羊痘抗體合格率都在75%以上，達(dá)到了群體合格率 70%以上的合格標(biāo)準(zhǔn)，與對(duì)照組相比抗體的產(chǎn)生時(shí)間和抗體合格率都沒(méi)有顯著差異，同時(shí)可以節(jié)省人力、物力，減少湖羊免疫應(yīng)激。通過(guò)綜合分析，“小反芻獸疫和羊痘疫苗混合一針注射”的免疫操作程序可在實(shí)際工作中推廣運(yùn)用。

考慮到尾根內(nèi)側(cè)皮內(nèi)注射存在一定難度，在操作上具有一定的技術(shù)要求，而有研究表明，山羊痘疫苗尾根內(nèi)側(cè)皮下注射的免疫效果并不比皮內(nèi)注射差[6]，因此，還可以進(jìn)一步開(kāi)展小反芻獸疫疫苗和羊痘疫苗混合尾根內(nèi)側(cè)皮下注射的試驗(yàn)研究，尋找更優(yōu)的免疫方法。