黃蕓萍,張華峰,古斌權(quán),王迎兒,邢乃林,嚴(yán)蕾艷
(寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院 蔬菜研究所,浙江 寧波 315040)
黃瓜綠斑駁花葉病毒(cucumbergreenmottlemosaicvirus,CGMMV)是煙草花葉病毒屬葫蘆科的一種重要種傳病毒[1]。近年來,各地由于瓜類種子攜帶該病毒而造成毀滅性損失的報(bào)道屢見不鮮[2]。經(jīng)生產(chǎn)實(shí)地調(diào)查研究,嫁接西瓜更易發(fā)生黃瓜綠斑駁花葉病毒病,這與嫁接農(nóng)事操作容易造成病毒擴(kuò)散有關(guān),但更為重要的原因與嫁接砧木和接穗的種子是否攜帶該病毒有關(guān)。南瓜砧木比葫蘆砧木較耐黃瓜綠斑駁花葉病毒,但隨著南瓜砧木的大面積推廣,南瓜砧木種子攜帶該病毒的報(bào)道也時(shí)有發(fā)生。因此,南瓜砧木種子的消毒處理技術(shù)是控制該病害流行的關(guān)鍵步驟,與其他種子消毒處理技術(shù)相比,干熱處理能夠更徹底地去除種子內(nèi)外攜帶的病原菌,鈍化病毒,適合規(guī)?;幚泶罅糠N子,是消滅種子上黃瓜綠斑駁花葉病毒的最有效方法[3-4]。
干熱處理的溫度過高、時(shí)間過長都會(huì)影響種子的活力[5-8]。黃瓜綠斑駁花葉病毒株系的致死溫度為90~100 ℃[9],干熱處理溫度過低起不到使種子上病毒失活的作用。目前,葫蘆砧木種子干熱處理已有報(bào)道[10-12],而在南瓜砧木上的相關(guān)研究較少。干熱處理后的種子長時(shí)間儲(chǔ)存會(huì)嚴(yán)重影響種子的活力[13],在南瓜砧木上是否存在這一現(xiàn)象未見報(bào)道。因此,本研究開展了南瓜砧木種子干熱處理參數(shù)、干熱后種子儲(chǔ)存期試驗(yàn),以期獲得南瓜砧木種子病毒鈍化效果好,同時(shí)種子活力損傷小的干熱處理最適條件。
供試的南瓜砧木品種為思壯2號、思壯7號、思壯10號、思壯54號,由寧波市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院蔬菜研究所自主選育和擴(kuò)繁。其中,思壯2號為中國南瓜與中國南瓜雜交1代,千粒重80 g,思壯7號為印度南瓜與中國南瓜雜交1代,千粒重250 g,思壯10號為印度南瓜與中國南瓜雜交1代,千粒重120 g,思壯45號為印度南瓜與印度南瓜雜交1代,千粒重150 g。
1.2.1 干熱處理
將經(jīng)過挑選的南瓜砧木種子放入種子干熱處理設(shè)備(韓國產(chǎn)),處理?xiàng)l件:第一階段35 ℃預(yù)處理24 h;第二階段50 ℃處理24 h;第三階段共設(shè)置5個(gè)處理,分別為72 ℃處理72 h、75 ℃處理72 h、80 ℃處理72 h、85 ℃處理48 h。在機(jī)器內(nèi)自然冷卻至室溫。以未經(jīng)干熱處理的南瓜砧木種子作為對照。干熱處理后的南瓜砧木種子放入種子低溫箱(4 ℃)密閉儲(chǔ)存。
1.2.2 種子發(fā)芽率測定
每個(gè)處理分別取400粒種子,分為4份,每份100粒,測定種子發(fā)芽率。采用吸濕培養(yǎng)法測定發(fā)芽率,統(tǒng)計(jì)催芽后7 d內(nèi)的發(fā)芽數(shù)。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003整理,采用SPSS軟件分析差異顯著性水平。
將4個(gè)不同品種的南瓜砧木種子經(jīng)不同溫度和時(shí)間的干熱處理后,立即進(jìn)行種子發(fā)芽率試驗(yàn),以未作干熱處理的種子為對照CK1。結(jié)果發(fā)現(xiàn):干熱處理72 ℃ 72 h和75 ℃ 72 h后,思壯2號和思壯54號種子的發(fā)芽率與對照相比沒有顯著降低,且發(fā)芽率均達(dá)到90%以上;思壯7號和思壯10號在干熱處理72 ℃ 72 h后種子的發(fā)芽率與對照相比沒有顯著降低,但干熱處理溫度高于72 ℃后,種子的發(fā)芽率隨著溫度的升高均顯著降低,且發(fā)芽率均低于90%,思壯10號干熱處理后發(fā)芽率嚴(yán)重下降(表1)。綜上所述,4個(gè)南瓜砧木種子干熱處理的最適條件為72 ℃ 72 h,初始發(fā)芽率較低的南瓜砧木種子干熱處理后種子損傷比初始發(fā)芽率高的種子嚴(yán)重。
表1 南瓜砧木種子不同干熱處理?xiàng)l件下 種子的發(fā)芽率 %
注:表中數(shù)據(jù)為4次發(fā)芽率的平均值,同列數(shù)據(jù)后無相同小寫字母表示差異達(dá)顯著水平(P<0.05)。表2同。
將4個(gè)不同品種的南瓜砧木種子經(jīng)72 ℃干熱處理72 h后,未經(jīng)低溫儲(chǔ)存(0 M)、低溫箱儲(chǔ)存3個(gè)月(3 M)、6個(gè)月(6 M)和12個(gè)月(12 M)后測定種子發(fā)芽率,同時(shí)測定未干熱處理的種子在低溫存儲(chǔ)0 M、3 M、6 M和12 M時(shí)的發(fā)芽率。結(jié)果發(fā)現(xiàn),4個(gè)未經(jīng)干熱處理的南瓜砧木種子低溫儲(chǔ)存3 M、6 M、12 M時(shí)發(fā)芽率與儲(chǔ)存前(0 M)沒有顯著差異,因此本試驗(yàn)將儲(chǔ)存0 M、3 M、6 M和12 M的未做干熱處理的4個(gè)對照南瓜砧木種子的平均發(fā)芽率分別設(shè)為對照CK2。結(jié)果表明(表2),思壯2號、思壯7號和思壯54號砧木種子經(jīng)干熱處理后馬上催芽,發(fā)芽率與未干熱處理相比無顯著差異;思壯2號和思壯7號干熱處理后儲(chǔ)存3個(gè)月時(shí)種子的發(fā)芽率顯著下降,之后隨著低溫儲(chǔ)存時(shí)間的延長發(fā)芽率又升高;思壯54號干熱處理后前3個(gè)月的種子發(fā)芽率與對照無顯著差異,但是儲(chǔ)存6個(gè)月以上發(fā)芽率顯著下降;發(fā)芽率最低的思壯10號干熱處理后發(fā)芽率顯著降低,低溫儲(chǔ)存后逐漸回升。綜上所述,正常發(fā)芽率的南瓜砧木種子經(jīng)72 ℃ 72 h干熱處理后可以直接催芽,發(fā)芽率不受影響。所有經(jīng)過干熱處理的南瓜砧木種子儲(chǔ)存1 a后發(fā)芽率變化并不顯著。
表2 南瓜砧木種子干熱處理后不同儲(chǔ)存期 種子的發(fā)芽率 %
干熱處理可有效鈍化蔬菜種子上攜帶的黃瓜綠斑駁花葉病毒,起到病害防控的作用。有研究表明,不同作物的最適干熱處理溫度不完全相同,黃瓜、芹菜種子干熱處理的溫度可達(dá)80 ℃[6],而番茄種子干熱處理的溫度到達(dá)80 ℃后種子的發(fā)芽率受到影響[8],葫蘆砧木種子干熱處理的最適溫度為72 ℃[10]。本文通過比較不同干熱處理溫度和時(shí)間的參數(shù)發(fā)現(xiàn),4個(gè)南瓜砧木種子干熱處理的最適溫度為72 ℃,但4個(gè)南瓜砧木品種間耐熱溫度不同,推測可能與南瓜種子大小、種皮厚薄有關(guān)。
有研究報(bào)道葫蘆種子干熱處理后發(fā)芽率顯著降低,需在自然環(huán)境中吸濕2周后才能恢復(fù)發(fā)芽率[11]。本文研究發(fā)現(xiàn):南瓜砧木種子干熱處理后立即催芽,種子的發(fā)芽率基本不受影響,即干熱處理后種子無需回水處理;但是初始發(fā)芽率差的種子干熱處理后需要經(jīng)過至少3個(gè)月的時(shí)間才能恢復(fù)種子活力;另外,經(jīng)過干熱處理的南瓜砧木種子在低溫儲(chǔ)存的1 a中,其中有2個(gè)南瓜砧木種子在儲(chǔ)存3個(gè)月時(shí)發(fā)芽率均降到最低,這與文獻(xiàn)報(bào)道的干熱處理后的種子不耐存放相符,因此我們建議干熱處理后的種子需在3個(gè)月內(nèi)使用完畢。但研究還發(fā)現(xiàn),干熱處理后南瓜砧木種子存放6個(gè)月以上時(shí),種子的發(fā)芽率與未干熱處理的種子相比下降并不顯著,這可能與種子復(fù)雜的生理活動(dòng)相關(guān)。本研究僅對干熱處理后南瓜砧木種子的發(fā)芽率進(jìn)行研究,后續(xù)應(yīng)對成苗率、幼苗活性等開展相關(guān)研究來明確干熱處理對種子的影響。