獼猴桃中幾種水溶性維生素的毛細管電泳測定

何弘水

摘 要：[目的]建立高效毛細管電泳同時分離和檢測獼猴桃中水溶性維生素的方法，并研究緩沖溶液，工作電壓，檢測波長對維生素測定的影響。[結果]實現(xiàn)了6種水溶性維生素的同時分離，回收率為89.9%～97.8%。在柱溫20℃，電壓20kV硼酸—硼砂緩沖液pH值8.6，進樣時間10min，檢測波長265nm時，檢測效果最好，具有良好的穩(wěn)定性，精密度和線性關系。

關鍵詞：高效毛細管電泳 水溶性維生素 獼猴桃

中圖分類號：G301文獻標識碼：A文章編號：1003-9082（2019）05-0-01

水溶性維生素包括B族維生素和維生素C。維生素B1又稱抗神經(jīng)炎或抗腳氣病維生素，極易溶于水，缺乏時使主要由葡萄糖供能的神經(jīng)、心臟、腦組織結構和功能發(fā)生改變，出現(xiàn)多發(fā)性神經(jīng)炎、皮膚麻木，四肢無力等一系列癥狀。維生素B2廣泛體內(nèi)的各種氧化還原反應，能促進糖、脂肪和蛋白質(zhì)代謝。維生素B6的活性形式是磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺，它們是轉氨酶的輔酶參與氨基酸和脂肪代謝。Vc也能參與體內(nèi)多種代謝過程，增強機體抵抗抗力。同時測定幾種維生素的方法主要有高效液相色譜法和反相高效液相色譜法等[1-3]。筆者采用HPCE對獼猴桃中水溶性維生素B1、B2、B6、C、PP、葉酸進行測定，旨在為其他水果水溶性維生素的測定提供參考。

一、材料與方法

1.儀器與試劑

P/ACETMMDQ型高效毛細管電泳儀;熔融石英毛細管，有效長度50cm，內(nèi)徑75um;PHS-2C型pH計;KQ-100B型超聲波清洗器;BT25S型電子天平.水為蒸餾水。獼猴桃在漯河丁灣菜市場購買。

2.標準溶液的配制

稱取各種維生素標品10.00mg，蒸餾水定容至100m，l得到濃度為100mg/L的標準溶液，0145Lm濾膜過濾，超聲波震蕩待用。分別配制60.0、50.0、40.0、30.0、20.0、10.0、5.0和2.0mg/L的溶液，用以制作標準曲線。

3.樣品處理

獼猴桃用蒸餾水洗凈，自然瀝干，稱重20.0g，研磨至碎，置于小燒杯，加0.01mol/LHCl溶液，攪拌均勻，超聲提取，并用0.45um濾膜過濾。將濾液轉至50mL容量瓶中，用0.01mol/L鹽酸定容至刻度，充分搖勻，置冰箱備用。

二、結果與分析

1.毛細管電泳條件

1.1緩沖溶液pH值的選擇

緩沖溶液對電泳影響很大，緩沖液濃度增大會降低電滲流速度，而選擇低濃度緩沖液有利于快速分離。根據(jù)研究資料[4]，分別考察了pH值分別為7.6、8.0、8.2、8.6、8.8和9.0的硼酸—硼酸鈉緩沖液對電泳的效果。最終認為pH值為8.6的緩沖液分離效果最好。

1.2電壓的選擇

不同電壓對出峰時間有影響。電壓越高，組分遷移速度越快，所用時間也越短，出峰越早，但并不影響出峰的先后順序。同時，高壓增加柱內(nèi)焦耳熱，對測定效果有一定影響。分別考察了5～40kv的結果，發(fā)現(xiàn)雖然在10kV電壓條件下，B族維生素分離效果較好，但綜合考慮其他因素最終選擇20kv電壓。

1.3其他因素的影響

試驗中還考察了進樣電壓、進樣時間、柱溫和檢測波長對試驗結果的影響。最終確定進樣電壓為5kv，進樣時間5min，柱溫20℃，檢測波長265nm。

2.樣品測定及回收率試驗

取500uL經(jīng)過處理過的獼猴桃提取液定容至100m，l按2.0條件進行測定，結果見表1。為檢測方法的可靠性，在已經(jīng)測得含量的樣品中分別添加對照品，分別觀察其回收率和精密度，結果見表2。由表2可知，該方法可靠，回收率高。

三、結論

采用毛細管電泳分析法同時測定了獼猴桃中6種水溶性維生素含量的條件是：柱溫20℃，電壓20kV，進樣時間10min，硼酸—硼砂緩沖液pH值8.6，檢測波長265nm。該方法所需樣品少，操作簡單，也可為其他水果中水溶性維生素測定提供參考。

參考文獻

[1]王雪梅，高素蓮，于金文.HPLC法測定新鮮草莓中水溶性維生素[J].食品科學，1999（5）：52-53.

[2郝榮輝，夏敏，谷學新.反相高效液相色譜同時測定動物營養(yǎng)液中B族維生素[J].現(xiàn)代科學儀器，2006，16（6）：81-83.

[3]翁水旺.RP-HPLC法測定復方三維右旋泛酸鈣糖漿中維生素B1和維生素B6的含量[J].藥物分析雜志，2004，24（6）：645-647.

[4]司雄元，檀華蓉，高麗萍，等.高效毛細管電泳方法同時測定茶葉中多種水溶性維生素[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2008，36（3）：849.