胰島素強化治療對新發(fā)2 型糖尿病非肥胖患者血漿促泌素的影響

楊靖 趙志波 吳麗 項孫敏 李驕陽 顏斌 肖新華

南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌科（湖南衡陽421001）

胰島素抵抗和胰島β 細(xì)胞功能受損是2 型糖尿?。╰ype 2 diabetes，T2DM）發(fā)病的核心環(huán)節(jié)，早期強化胰島素降糖治療可改善β細(xì)胞功能，但其具體機(jī)制尚不明確［1］。促泌素（secretagogin，SCGN）是從胰島素瘤細(xì)胞中鑒定出來的一個EF-手型鈣結(jié)合蛋白，該蛋白在胰腺組織特異性高表達(dá)并可分泌至血漿［2-3］。SCGN 在促進(jìn)胰島素分泌、改善β細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及促進(jìn)胰島α細(xì)胞向β細(xì)胞轉(zhuǎn)化等過程中發(fā)揮重要作用［4-7］。研究發(fā)現(xiàn)肥胖T2DM患者血漿SCGN 水平較正常組增高，并與胰島素分泌代償性增加相關(guān)［8］。但對于非肥胖T2DM 患者血漿SCGN 水平與胰島功能的關(guān)系，以及胰島素強化降糖治療對血漿SCGN 的影響尚無研究報道。本研究通過檢測新發(fā)非肥胖T2DM患者血漿SCGN水平，探討其與胰島β細(xì)胞功能的關(guān)系及胰島素強化降糖治療對SCGN 表達(dá)的影響，旨在為T2DM 患者β細(xì)胞功能受損及強化胰島素治療改善β細(xì)胞功能的機(jī)制研究提供新的依據(jù)。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2018年6月至2018年9月于南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院內(nèi)分泌科住院新診斷T2DM 的非肥胖（體質(zhì)量指數(shù)BMI ＜24 kg/m2）患者32 例，其中男20 例，女12 例，平均年齡（55.2 ±10.3）歲，對照組為同期健康體檢者26 例（正常組），其中男16 例，女10 例，平均年齡（53.1 ± 8.1）歲。T2DM 的診斷標(biāo)準(zhǔn)：符合1999年WHO 糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)；初次診斷為T2DM；未予以飲食、運動及使用口服降糖藥或胰島素等治療。排除1 型糖尿病、妊娠期糖尿病及其他特殊類型糖尿病；無糖尿病急、慢性并發(fā)癥及嚴(yán)重心腦血管合并癥。無惡性腫瘤、感染及急性應(yīng)激情況。肥胖診斷標(biāo)準(zhǔn)：按照2011年中國成人肥胖癥診斷標(biāo)準(zhǔn)［9］。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床資料 采集各組研究對象的年齡、身高、體質(zhì)量等資料。利用公式：BMI=體質(zhì)量（kg）/身高（m）2計算體質(zhì)量指數(shù)。所有研究對象空腹8 h以上，于清晨肘靜脈采血，采用羅氏Cobas8000全自動生化儀酶法分別檢測空腹血糖（FPG）及糖化血紅蛋白（HbA1c）；電化學(xué)發(fā)光法檢測空腹血漿胰島素（FIns）、空腹C 肽（FCP）。

1.2.2 胰島素強化降糖治療 入選的T2DM 患者入院后接受胰島素泵強化降糖治療1 周，血糖達(dá)標(biāo)后改為餐時+基礎(chǔ)胰島素或2～3 次預(yù)混胰島素降糖治療。血糖控制目標(biāo)：空腹血糖＜7.0 mmol/L，餐后7.8～10.0 mmol/L。

1.2.3 血漿SCGN 水平檢測 T2DM 患者入院時及強化胰島素降糖治療2 周后行FPG、FCP 檢測的同時留取血漿500 μL 于-80 ℃冰箱中凍存用于SCGN 檢測。SCGN 檢測采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗，試劑盒購自美國Lifespan Biosciences 公司，檢測步驟按照說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 臨床數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料以（）表示，K-S檢驗明確數(shù)據(jù)正態(tài)性。正態(tài)分布資料比較采用單因素方差分析。SCGN 與各指標(biāo)的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組間相關(guān)臨床資料的比較 T2DM 組與正常組比較兩組研究對象在年齡、性別構(gòu)成、BMI 方面差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。但是T2DM組入院時FPG 及HbA1c 明顯高于正常對照組（P＜0.05），F(xiàn)Ins 及FCP 低于正常對照組（P＜0.05）。T2DM 組患者穩(wěn)態(tài)模型評估-胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）高于正常對照組，見表1。

表1 兩組間臨床資料和生化指標(biāo)比較Tab.1 Comparison of the clinical data and biochemical indicators between the two groups ±s

表1 兩組間臨床資料和生化指標(biāo)比較Tab.1 Comparison of the clinical data and biochemical indicators between the two groups ±s

年齡（歲）BMI（kg/m2）HbA1c（%）FPG（mmol/L）FIns（mU/L）FCP（μg/L）HOMA-IR正常組（n=32）53.1±8.1 21.5±2.2 5.60±0.45 5.4±0.7 7.29±1.17 2.13±1.10 1.73±0.43 T2DM 組（n=26）55.2±10.3 22.6±2.6 12.2±2.12 12.4±2.2 6.02±2.48 1.69±0.76 3.22±1.24 P 值0.391 0.060＜0.001＜0.001 0.009 0.018 0.003

2.2 強化胰島素治療前后血漿SCGN 的變化T2DM組患者入院時SCGN水平為（903.32±160.1）pg/mL明顯明顯低于正常組（1 230.27±157.51）pg/mL（P＜0.05），予以胰島素強化降糖治療2 周后，SCGN水平上升至（1 143.33±169.72）pg/mL，較入院時增高（P＜0.05）。但是治療2 周后SCGN 水平仍低于正常組，見圖1。

圖1 正常組及T2DM 組患者胰島素強化治療前后血漿SCGN 的水平的比較Fig.1 Comparison of the plasma SCGN levels between the control group and T2DM group before and after intensive insulin therapy

2.3 SCGN 與FPG、FCP、FIns 及HbA1c 的相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果表面，在正常組，SCGN 均 與FCP 及FIns 呈正相關(guān)，與FPG 呈負(fù)相關(guān)，但是與HbA1c 相關(guān)性不明顯。在T2DM 組，患者入院時，血漿SCGN 與FPG 及HbA1c 呈負(fù)相關(guān)，與FCP 及FIns 呈正相關(guān)。強化胰島素治療2 周后，患者血糖水平得到控制，此時檢測血漿SCGN 與FPG 仍呈負(fù)相關(guān)，與FCP 呈正相關(guān)。由于患者在接受胰島素治療且觀察時間短，因此沒有檢測治療后的FIns 及HbA1c 水平。見圖2。

圖2 正常組及T2DM 組患者胰島素強化治療前后血漿SCGN 水平與FPG、FCP、FIns、HbA1c 的相關(guān)性分析Fig.2 Correlation analysis of plasma SCGN levels with FPG，F(xiàn)CP，F(xiàn)Ins and HbA1c in control group and T2DM patients before and after intensive insulin therapy

3 討論

目前我國成人糖尿病在發(fā)病率為10.4%，其中T2DM 占90%以上［10］。T2DM 發(fā)病的核心環(huán)節(jié)主要包括胰島素抵抗和胰島素分泌不足，其中β細(xì)胞功能衰竭在T2DM 的進(jìn)展過程中起關(guān)鍵作用［11-12］。β細(xì)胞合成與分泌胰島素是受到細(xì)胞內(nèi)信號通路調(diào)節(jié)的精密過程，其中SCGN 在胰島素分泌的調(diào)控中發(fā)揮重要的作用，SCGN 可通過調(diào)控胰島素分泌囊泡向細(xì)胞膜運輸及粘附的過程而促進(jìn)胰島素分泌［5，13］，同時，SCGN 高表達(dá)還能抑制β細(xì)胞凋亡，促進(jìn)α細(xì)胞向β細(xì)胞轉(zhuǎn)化并維持胰島的正常形態(tài)。敲除小鼠SCGN 基因后，胰島β細(xì)胞數(shù)量減少，胰島素分泌明顯下降并出現(xiàn)糖耐量異常［4，6，14］。由于SCGN 在胰島細(xì)胞特異性高表達(dá)并可分泌至細(xì)胞外，運輸至血液，因此，探索糖尿病患者血漿SCGN的表達(dá)及其與主要糖代謝指標(biāo)之間的關(guān)系具有重要的臨床意義。已有研究發(fā)現(xiàn)，T2DM 患者血漿SCGN 水平較正常組明顯增高，SCGN 與FCP 及HbA1c 水平有相關(guān)性，但該研究針對的是西方人群，入組患者均體型肥胖［8］，而對于非肥胖T2DM患者血漿SCGN 水平及強化降糖治療前后SCGN的表達(dá)變化目前尚無研究報道。

本研究通過檢測新發(fā)非肥胖T2DM 患者及正常健康人群血漿SCGN 水平，發(fā)現(xiàn)無論在正常組還是T2DM 患者，SCGN 均與FCP 及FIns 呈正相關(guān)，與FPG 呈負(fù)相關(guān)。在T2DM 組，血漿SCGN 與HbA1c呈負(fù)相關(guān)，但在正常組中SCGN 與HbA1c 相關(guān)性不明顯。初發(fā)T2DM 非肥胖患者血漿SCGN 水平明顯低于正常組，強化胰島素治療后，血漿SCGN 水平升高，血糖下降，但仍與FPG 呈負(fù)相關(guān)，與FCP呈正相關(guān)。

筆者分析，新發(fā)非肥胖T2DM 患者，由于胰島β 細(xì)胞數(shù)量的減少及其功能衰竭，血糖明顯增高，機(jī)體為了維持血糖的穩(wěn)態(tài)，殘存β 細(xì)胞代償性分泌胰島素增加，而這種代償分泌最終會導(dǎo)致β 細(xì)胞儲存的胰島素消耗，進(jìn)一步加重高血糖［15］。由于β 細(xì)胞數(shù)量的減少以及葡萄糖毒性作用對其功能的抑制，SCGN 的表達(dá)隨之下降。而當(dāng)給予患者強化胰島素治療，血糖逐漸下降后，葡萄糖毒性作用及胰島素抵抗改善［16］，體內(nèi)殘存β 細(xì)胞功能逐漸得到恢復(fù)，SCGN 的表達(dá)與分泌也隨之增加，因此，這就出現(xiàn)了本研究所觀察到的SCGN 的表達(dá)變化趨勢。由于SCGN 能促進(jìn)胰島素分泌，所以在T2DM 組及正常組均觀察到了SCGN 與FCP 及FIns呈正相關(guān)，且在T2DM 組，SCGN 還與FPG 及HbA1c呈負(fù)相關(guān)。由于正常組HbA1c 個體間差異并不明顯，因此本研究在正常組沒有觀察到SCGN 與HbA1c 的相關(guān)性。

本研究結(jié)果與HANSSON 等［8］發(fā)現(xiàn)的T2DM 患者血漿SCGN 表達(dá)增高的結(jié)果不相一致，筆者分析原因如下：（1）HANSSON 等納入的糖尿病患者體質(zhì)量指數(shù)高達(dá)（29.8 ± 4.5），因此其研究的為肥胖T2DM 患者。研究表明肥胖的糖尿病或糖耐量異?；颊撸浒l(fā)病機(jī)制以胰島素抵抗為主，胰島素分泌呈代償性增加［17］。因而促進(jìn)胰島素分泌的SCGN 水平表現(xiàn)增高。而本研究納入的患者為非肥胖T2DM 患者，兩組患者在胰島功能、HOMA-IR 均存在明顯差異。本研究納入的患者胰島素水平明顯低于HANSSON 研究組，提示非肥胖T2DM 患者β細(xì)胞數(shù)量及功能有下降，SCGN 水平也相應(yīng)降低。（2）HANSSON 等研究納入的患者血糖控制已經(jīng)達(dá)標(biāo)，而本研究納入的患者入院時血糖明顯增高，高糖的葡萄糖毒性作用導(dǎo)致胰島細(xì)胞功能衰竭可能也是SCGN 表達(dá)下降的原因之一。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)新發(fā)非肥胖T2DM 患者血漿SCGN 表達(dá)下降，血漿SCGN 水平與FCP 及FIns 呈正相關(guān)，與FPG 及HbA1c 呈負(fù)相關(guān)。胰島素強化治療后，血漿SCGN 水平升高，β細(xì)胞功能有一定程度恢復(fù)。由于SCGN 主要在胰島細(xì)胞表達(dá)，其血漿表達(dá)變化與胰島功能及血糖水平密切相關(guān)，因此，SCGN 可能成為β細(xì)胞功能評估的潛在標(biāo)志物。同時本研究也為胰島素強化治療對β細(xì)胞保護(hù)作用的機(jī)制研究提供了新的實驗依據(jù)。由于本研究樣本量及臨床觀察時間有限，無法反映較長時間內(nèi)胰島β細(xì)胞功能變化與SCGN 的關(guān)系，后續(xù)研究需繼續(xù)隨訪并進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量觀察，并在此基礎(chǔ)上深入探討SCGN 與β細(xì)胞功能受損之間的分子機(jī)制。