雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦對(duì)IgA 腎病療效及尿足細(xì)胞排泄的影響

梁艷，張小玲，劉冰，朱清，邵鳳民

IgA 腎病是全球最常見的原發(fā)性腎小球疾病，是指腎系膜區(qū)存在以IgA 為主的免疫反應(yīng)產(chǎn)物沉淀并因此受到損傷，也是導(dǎo)致終末期腎功能衰竭（ESRD）的常見原因［1-2］。腎足細(xì)胞是腎小球?yàn)V過膜上機(jī)械屏障及電荷屏障的主要構(gòu)成細(xì)胞，當(dāng)其發(fā)生損傷時(shí)會(huì)引起腎小體系膜細(xì)胞增生及系膜基質(zhì)的擴(kuò)展，且在穩(wěn)定腎小體毛細(xì)血管袢的復(fù)雜結(jié)構(gòu)中具有重要地位［3］。近年來的研究表明，足細(xì)胞與IgA 腎病的發(fā)生及進(jìn)展關(guān)系密切，當(dāng)其損傷后會(huì)自基底膜脫落隨尿液排出，因而尿足細(xì)胞水平已成為IgA 腎病等病情監(jiān)測的特異性指標(biāo)之一［4］。IgA 腎病主要采用免疫抑制劑治療，而雷公藤多苷是我國特有的植物免疫抑制劑，已廣泛應(yīng)用于各種原發(fā)性、繼發(fā)性腎臟疾病的臨床治療［5］。研究證實(shí)厄貝沙坦具有減少蛋白尿及延緩腎臟病進(jìn)展的作用［6］，但目前尚未見兩者聯(lián)用對(duì)IgA 腎病療效的報(bào)道。為此，本研究主要通過觀察經(jīng)雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦治療后的IgA 腎病患者肝腎功能指標(biāo)以及尿液中足細(xì)胞數(shù)目的變化，探討二者聯(lián)合治療IgA 腎病的療效及安全性，為臨床IgA 腎病的藥物治療方案提供新的參考。

本研究創(chuàng)新點(diǎn)：

（1）雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦是臨床常用聯(lián)合用藥方案，已有許多研究報(bào)道了該方案在糖尿病腎病、腎小球腎炎等腎臟疾病中的應(yīng)用并取得了良好療效，但目前尚無該方案在IgA 腎病治療中的應(yīng)用研究報(bào)道，本研究在一定程度上補(bǔ)充了該領(lǐng)域的空白。（2）腎足細(xì)胞損傷是腎病的疾病特征，尿足細(xì)胞檢測是評(píng)估患者病情和療效的有效指標(biāo)。尿足細(xì)胞檢測目前是腎病研究中的實(shí)驗(yàn)難點(diǎn)之一，本研究作者結(jié)合多年研究經(jīng)驗(yàn)，利用較為簡便的方法成功檢測了尿足細(xì)胞數(shù)量，可以為該方向的研究者提供一定參考。

本研究局限性：

（1）本研究旨在比較IgA 腎病患者雷公藤多苷、厄貝沙坦及二者聯(lián)合3 種用藥方案療效及安全性的差異，研究的局限性在于觀察時(shí)間不夠長，樣本量也較小，在后續(xù)的研究中需要擴(kuò)大樣本量，并長期隨訪患者的療效、復(fù)發(fā)情況以及各種不良反應(yīng)情況，以獲取更為科學(xué)的結(jié)論。（2）此外，腎足細(xì)胞損傷作為腎小球疾病的病理基礎(chǔ)，其發(fā)病涉及多種機(jī)制，本研究并未進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)或體內(nèi)試驗(yàn)以進(jìn)行深入探究，因此后續(xù)需要進(jìn)一步探討足細(xì)胞損傷修復(fù)的分子學(xué)機(jī)制，為腎病機(jī)制研究及新的治療方案開發(fā)等奠定研究基礎(chǔ)。

1 對(duì)象與方法

1.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）經(jīng)腎穿刺活檢證實(shí)，符合世界衛(wèi)生組織制定的原發(fā)性IgA 腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)［7］；（2）24 h 尿蛋白為1～3 g。排除標(biāo)準(zhǔn)：紫癜性腎炎，慢性乙型肝炎（簡稱乙肝）相關(guān)性腎炎，或合并有肝功能異常、高血壓腎病、狼瘡性腎炎等繼發(fā)性腎病，合并有糖尿病、心血管病或其他嚴(yán)重臟器疾病。

1.2 研究對(duì)象 根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，選取2014 年1 月—2016 年12 月河南省人民醫(yī)院收治的IgA 腎病患者128 例為研究對(duì)象。其中男66 例，女62 例；年齡21～69 歲，平均（46.0±12.1）歲。根據(jù)治療方式，將研究對(duì)象分為雷公藤多苷組（42 例）、厄貝沙坦組（40 例）和聯(lián)合治療組（46 例）。本研究經(jīng)過本院醫(yī)學(xué)倫理審查委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.3 治療方法 雷公藤多苷組口服雷公藤多苷片（浙江普洛康裕天然藥物有限公司，國藥準(zhǔn)字Z33020778）20 mg/次，3 次/d，飯后服用；厄貝沙坦組口服厄貝沙坦片（Sanofi Winthvop Indvstvie，國藥準(zhǔn)字J20080061）150 mg/次，2 次/d；聯(lián)合治療組同時(shí)服用雷公藤多苷片（20 mg/次，3 次/d）和厄貝沙坦片（150 mg/次，2次/d）。所有患者治療12 周。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 一般資料 收集患者一般資料，包括性別、年齡、空腹血糖、病程、腎病Oxford 病理分類［8］、慢性腎臟?。–KD）分期。其中腎病Oxford 病理分類有3 種分類方法，M分類分為M0（無系膜增生）和M1（有系膜增生），E 分類分為E0（無腎小球內(nèi)皮增生）和E1（有腎小球內(nèi)皮增生），S 分類分為S0（無腎小球節(jié)段硬化）和S1（有腎小球節(jié)段硬化），T 分類分為T0（腎小管萎縮/間質(zhì)纖維化面積≤25%）、T1（25%＜腎小管萎縮/間質(zhì)纖維化面積≤50%）、T2（腎小管萎縮/間質(zhì)纖維化面積＞50%）。

1.4.2 血壓 測量并記錄各組患者治療前后收縮壓、舒張壓。

1.4.3 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) 所有患者分別于治療前和治療完成后次日采集晨起空腹靜脈血和尿液標(biāo)本，檢測血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、血尿酸（SUA）、血清清蛋白（Alb）、總膽固醇（TC），檢測儀器為全自動(dòng)生化分析儀。根據(jù)患者的年齡、Scr 和CKD 流行病學(xué)研究（CKD-EPI）公式［9］計(jì)算估算腎小球?yàn)V過率（eGFR）。24 h 尿蛋白檢測：收集患者晨起第1 次小便后24 h 的尿液，混合后取200 ml 進(jìn)行尿蛋白檢測，方法為雙縮脲法。

1.4.4 尿蛋白緩解效果及不良反應(yīng) 根據(jù)改善全球腎臟病預(yù)后組織（KDIGO）制定的尿蛋白緩解效果評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)［10］評(píng)價(jià)療效，分為完全緩解（CR，治療后24 h尿蛋白≤0.3 g）、部分緩解（PR，治療后24 h 尿蛋白＞0.3 g 但下降幅度≥50%）和未緩解（NR，治療后24 h尿蛋白下降幅度＜50%）。計(jì)算治療有效率〔治療有效率=（CR 例數(shù)+PR 例數(shù)）/總例數(shù)×100%〕。密切觀察患者的不良反應(yīng)情況。

1.4.5 尿足細(xì)胞 治療前后分別采用間接免疫熒光法檢測尿足細(xì)胞：收集患者晨起新鮮中段尿20 ml，以3000 r/min 離心10 min（離心半徑13.5 cm），棄上清液后取尿沉渣20 μl，置于定量計(jì)數(shù)板上，室溫干燥后用40 g/L 多聚甲醛溶劑固定15 min，晾干備用。用3%H2O2溶液處理20 min，10%脫脂奶粉封閉20 min，滴加一抗——鼠抗人podocalyxin 抗體（1∶10，美國R&D公司），4 ℃孵育過夜；滴加二抗——熒光染料標(biāo)記的羊抗鼠IgG（福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司），室溫孵育30 min；4'，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色2 min，滴加熒光淬滅劑封固。熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，胞漿陽性染色的為足細(xì)胞。每個(gè)樣本記錄20個(gè)高倍視野所見足細(xì)胞數(shù)目，取平均值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 19.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)所有計(jì)量資料進(jìn)行Kolmogorov-Smirnov 檢驗(yàn)，均符合正態(tài)分布，以（±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較根據(jù)方差齊性進(jìn)行LSD-t檢驗(yàn)或Dunnett's T3檢驗(yàn)，同組治療前后數(shù)據(jù)比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表13 組一般資料比較Table 1 Comparison of general information among 3 groups

2 結(jié)果

2.13 組一般資料比較 3 組性別、年齡、空腹血糖、病程、腎病Oxford 病理分類、CKD 分期比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，見表1）。

2.23 組治療前后血壓、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較 3 組治療前、后收縮壓、舒張壓、Scr、BUN、SUA、TC、eGFR 比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；3 組治療前Alb、24 h尿蛋白比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；3 組治療后Alb、24 h 尿蛋白比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。聯(lián)合治療組治療后Alb 高于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組，治療后24 h 尿蛋白低于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。雷公藤多苷組、厄貝沙坦組、聯(lián)合治療組治療后Scr、24 h 尿蛋白均低于本組治療前，治療后Alb、eGFR 均高于本組治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；聯(lián)合治療組治療后BUN、SUA 低于本組治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表2）。

2.33 組尿蛋白緩解效果、不良反應(yīng)比較 雷公藤多苷組CR 3 例，PR 14 例，NR 25 例，治療有效率為40.5%（17/42）；厄貝沙坦組CR 5 例，PR 11 例，NR 24 例，治療有效率為40.0%（16/40）；聯(lián)合治療組CR 6 例，PR 26 例，NR 14 例，治療有效率為69.6%（32/46）。3 組治療有效率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.165，P=0.025）；聯(lián)合治療組治療有效率高于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.536、8.426，P=0.023、0.015）。

所有患者治療過程中無嚴(yán)重不良反應(yīng)出現(xiàn)，雷公藤多苷組1 例（2.4%）患者出現(xiàn)消化道功能異常（消化不良、惡心、胃灼熱感等），厄貝沙坦組2 例（5.0%）患者出現(xiàn)消化道功能異常，聯(lián)合治療組2 例（4.3%）患者出現(xiàn)消化道功能異常。3 組不良反應(yīng)發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.412，P=0.814）。

2.43 組治療前后尿足細(xì)胞比較 3 組治療前尿足細(xì)胞比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；3 組治療后尿足細(xì)胞比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；聯(lián)合治療組治療后尿足細(xì)胞少于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。雷公藤多苷組、厄貝沙坦組、聯(lián)合治療組治療后尿足細(xì)胞均少于本組治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05，見表3）。

表33 組治療前后尿足細(xì)胞比較（±s，個(gè)）Table 3 Comparison of the number of urinary podocytes before and after treatment among 3 groups

表33 組治療前后尿足細(xì)胞比較（±s，個(gè)）Table 3 Comparison of the number of urinary podocytes before and after treatment among 3 groups

注：與雷公藤多苷組比較，aP＜0.05；與厄貝沙坦組比較，bP＜0.05；與本組治療前比較，cP＜0.05

組別 例數(shù) 治療前 治療后雷公藤多苷組 42 4.7±1.2 2.8±1.1c厄貝沙坦組 40 5.1±0.8 2.6±0.9c聯(lián)合治療組 46 5.0±1.1 2.0±0.7abc F 值 1.759 6.029 P 值 0.176 0.003

3 討論

雷公藤多苷是我國特有的中藥制劑，具有抗炎、抑制細(xì)胞免疫及體液免疫的作用。雷公藤多苷對(duì)活化T 淋巴細(xì)胞的抑制作用較強(qiáng)，但對(duì)靜止的免疫細(xì)胞作用較弱［11］，因而其在發(fā)揮強(qiáng)大免疫抑制作用的同時(shí)一般不損傷人體正常的免疫系統(tǒng)，不會(huì)產(chǎn)生誘發(fā)腫瘤、嚴(yán)重感染等不良反應(yīng)。因此，雷公藤多苷已被成功應(yīng)用于IgA腎病等許多免疫性疾病的治療［12-13］。厄貝沙坦屬血管緊張素受體抑制劑（ARB）類藥物，其一方面通過降低腎小球囊內(nèi)壓，改善腎小球的血流動(dòng)力學(xué)、降低尿蛋白［14］，另一方面通過抑制基質(zhì)合成因子及抗細(xì)胞外基質(zhì)降解因子而抑制腎間質(zhì)纖維化，并增強(qiáng)相關(guān)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)配體的表達(dá)抑制基質(zhì)增生，從而對(duì)腎臟發(fā)揮保護(hù)作用［15］。因此，推測二者聯(lián)用時(shí)存在協(xié)同作用，即發(fā)揮免疫抑制作用從根源上緩解IgA 腎病的進(jìn)展，也抑制抗增生性病變的形成，保護(hù)腎臟免受損傷。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合治療組治療后Alb 高于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組，治療后24 h 尿蛋白低于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組；雷公藤多苷組、厄貝沙坦組、聯(lián)合治療組治療后Scr、24 h 尿蛋白均低于本組治療前，治療后Alb、eGFR 均高于本組治療前；聯(lián)合治療組治療后BUN、SUA 低于本組治療前；聯(lián)合治療組治療有效率高于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組；表明雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦在IgA 腎病治療上可能具有協(xié)同作用，可以有效改善尿蛋白等病癥、延緩病情進(jìn)展。此外，3 組均無嚴(yán)重不良反應(yīng)出現(xiàn)，且3 組不良反應(yīng)發(fā)生率無差異。雷公藤多苷帶來的不良反應(yīng)主要表現(xiàn)為消化道功能異常，在治療完成后經(jīng)調(diào)理均得到恢復(fù)。鑒于本研究樣本量較小，治療周期較短（3 個(gè)月），因此長期治療是否會(huì)加重或產(chǎn)生其他不良反應(yīng)尚需要進(jìn)一步的觀察和研究。

足細(xì)胞是腎小球毛細(xì)血管袢復(fù)雜結(jié)構(gòu)中起重要穩(wěn)定作用的細(xì)胞之一，當(dāng)其損傷時(shí)可導(dǎo)致系膜及基質(zhì)的增生和擴(kuò)展，促進(jìn)系膜增生性腎炎的發(fā)生及發(fā)展。已有研究表明眾多因素和因子可引起足細(xì)胞損傷，包括遺傳因素、活性氧基團(tuán)、嘌呤霉素氨基核苷（PAN）、轉(zhuǎn)化生長因子β（TGF-β）、纖維原細(xì)胞生長因子2（EGF-2）、機(jī)械應(yīng)力及其他細(xì)胞或化學(xué)因子等［16-18］。1995 年英國HARA 等［19］發(fā)現(xiàn)IgA 腎病活動(dòng)期尿中出現(xiàn)足細(xì)胞，首次提出尿足細(xì)胞數(shù)目可以作為監(jiān)測IgA 腎病活動(dòng)的有效指標(biāo)。而后的研究也表明足細(xì)胞可以作為治療IgA 腎病的靶向目標(biāo)之一［20］。已有許多研究表明改善足細(xì)胞損傷是治療腎病的主要機(jī)制［21-22］。鄭云等［23］通過體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)，雷公藤多苷可以拮抗鏈脲菌素對(duì)腎足細(xì)胞的損傷，恢復(fù)足細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)和腎病蛋白及膜蛋白等相關(guān)蛋白的表達(dá)，是雷公藤多苷降低腎小球腎炎患者尿蛋白的重要機(jī)制。TUN?DEMIR 等［24］通過建立糖尿病腎病大鼠模型研究發(fā)現(xiàn)，厄貝沙坦干預(yù)可以有效減少足細(xì)胞損傷并抑制腎小球細(xì)胞凋亡，從而改善腎功能指標(biāo)；TAKAHASHI 等［25］研究表明厄貝沙坦可通過抑制腎病患者腎病蛋白的下調(diào)，介導(dǎo)和參與足細(xì)胞的保護(hù)，從而降低尿蛋白。也有許多關(guān)于雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦保護(hù)腎病中足細(xì)胞損傷的研究，馬瑞霞等［26］通過糖尿病腎病大鼠模型實(shí)驗(yàn)證明，雷公藤甲素聯(lián)合厄貝沙坦對(duì)糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞損傷具有協(xié)同保護(hù)作用，其機(jī)制可能是上調(diào)腎小球骨形態(tài)發(fā)生蛋白7（BMP-7）基因并抑制結(jié)締組織生長因子（CTGF）、TGF-β1 過表達(dá)；馬瑞霞等［27］、MA 等［28］通過將雷公藤多苷和厄貝沙坦聯(lián)合用于2 型糖尿病腎?。―KD）患者并檢測尿足細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，尿足細(xì)胞可以作為DKD 進(jìn)展的標(biāo)志物，二者聯(lián)合治療可有效減少DKD 患者的尿足細(xì)胞排泄以改善病情，具有協(xié)同作用。目前尚無研究表明雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦在IgA 腎病治療中的療效及其對(duì)足細(xì)胞的作用。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合治療組治療后尿足細(xì)胞少于雷公藤多苷組、厄貝沙坦組，雷公藤多苷組、厄貝沙坦組、聯(lián)合治療組治療后尿足細(xì)胞均少于本組治療前，提示雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦也可以有效減少IgA 腎病患者的尿足細(xì)胞排泄，且其對(duì)IgA 腎病患者足細(xì)胞的保護(hù)效果優(yōu)于單一藥物，二者具有協(xié)同作用，與現(xiàn)有關(guān)于二者對(duì)其他類型腎病療效的研究結(jié)論［27-28］基本一致。

表23 組治療前后血壓、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較（±s）Table 2 Comparison of blood pressure and laboratory indices before and after treatment among 3 groups

表23 組治療前后血壓、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)比較（±s）Table 2 Comparison of blood pressure and laboratory indices before and after treatment among 3 groups

注：與雷公藤多苷組比較，aP＜0.05；與厄貝沙坦組比較，bP＜0.05；與本組治療前比較，cP＜0.05；Scr=血肌酐，BUN=血尿素氮，SUA=血尿酸，Alb=血清清蛋白，TC=總膽固醇，eGFR=估算腎小球?yàn)V過率；1 mm Hg=0.133 kPa

組別 例數(shù) 收縮壓（mm Hg） 舒張壓（mm Hg） Scr（μmol/L） BUN（mmol/L）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后雷公藤多苷組 42 135±17 127±12 85±8 84±7 89.0±16.6 76.3±11.5c 5.3±0.9 5.0±1.0厄貝沙坦組 40 138±16 131±13 87±10 85±8 89.8±17.0 79.6±10.5c 5.5±1.0 5.1±0.9聯(lián)合治療組 46 135±17 128±12 87±10 86±7 89.5±13.5 78.8±11.5c 5.5±1.0 5.0±0.9c F 值 0.555 1.059 0.716 0.741 0.027 0.980 0.950 0.225 P 值 0.575 0.350 0.491 0.479 0.973 0.378 0.390 0.799images/BZ_56_984_2456_1006_2486.pngimages/BZ_56_1419_2456_1441_2486.pngimages/BZ_56_1849_2456_1871_2486.png組別 SUA（μmol/L） Alb（g/L） TC（mmol/L） eGFR〔ml·min-1·（1.73 m2）-1〕 24 h 尿蛋白（g）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后雷公藤多苷組 330±51 320±47 38.1±6.9 43.9±5.8c 6.44±1.87 5.74±1.46 80.4±22.4 90.3±18.0c 2.1±0.6 1.2±0.5c厄貝沙坦組 333±45 323±56 38.5±6.9 43.4±5.4c 6.05±1.65 5.70±1.87 80.0±19.8 90.7±16.5c 2.2±0.7 1.2±0.6c聯(lián)合治療組 335±55 315±50c 39.6±6.0 48.6±5.7abc 6.18±1.99 5.0±1.63 81.5±22.0 94.5±22.6c 2.1±0.5 0.9±0.4abc F 值 0.125 0.284 0.531 11.114 0.488 2.687 0.063 0.609 0.119 0.888 P 值 0.883 0.753 0.589 ＜0.001 0.615 0.059 0.939 0.545 4.400 0.014images/BZ_56_760_2787_781_2816.pngimages/BZ_56_1130_2787_1151_2816.pngimages/BZ_56_1500_2795_1522_2810.pngimages/BZ_56_1914_2787_1936_2816.png

綜上所述，雷公藤多苷聯(lián)合厄貝沙坦可用于IgA 腎病患者的治療，其療效尤其是對(duì)尿蛋白緩解效果優(yōu)于單一藥物治療方案，并且可以顯著減少患者的尿足細(xì)胞排泄。即二者聯(lián)用時(shí)，可能對(duì)IgA 腎病患者的足細(xì)胞損傷具有更好的協(xié)同保護(hù)作用，從而延緩了患者病情的進(jìn)展。

作者貢獻(xiàn)：梁艷、邵鳳民進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)、研究的實(shí)施和可行性分析；梁艷、張小玲、劉冰進(jìn)行數(shù)據(jù)收集；朱清進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和統(tǒng)計(jì)學(xué)處理；梁艷撰寫論文，負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校，對(duì)文章整體負(fù)責(zé)、監(jiān)督管理；邵鳳民進(jìn)行結(jié)果的分析與解釋，對(duì)論文進(jìn)行修訂；劉冰進(jìn)行英文的修訂。

本文無利益沖突。