血清脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白4與胰島素抵抗的關(guān)系

郭毅飛，李雪鋒，李敏，曾玉琴，蔡俊瑋

作者單位：十堰市太和醫(yī)院（湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院）內(nèi)分泌風(fēng)濕科，湖北 十堰 442000

2型糖尿?。═2DM）是臨床常見的內(nèi)分泌疾病，是心腦血管疾病常見的危險因素之一［1］。目前認為T2DM的發(fā)生與機體代謝異常、炎癥反應(yīng)等生理病理過程有密切的關(guān)系［2］。脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白4（FABP4）是一種近年來被發(fā)現(xiàn)的細胞因子，在對其研究的過程中，發(fā)現(xiàn)該因子與2型糖尿病和代謝綜合征的關(guān)系密切［3］。為此，本研究將通過檢測外周血FABP4的水平，旨在探討FABP4與胰島素抵抗的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年1—12月十堰市太和醫(yī)院60例2型糖尿病病人，納入標準：①病人按照中國2型糖尿病防治指南（2013年版）的被確診［4］；②病人均行口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）可知FBG≥7.0 mmol/L；③均簽署知情同意書。排除標準：①I型糖尿??；②合并心、肝、腎及甲狀腺功能異常的病人；③合并糖尿病急性并發(fā)癥病人；④妊娠期或哺乳期女性；⑤長期應(yīng)用免疫抑制劑、糖皮質(zhì)激素的病人；⑥合并免疫功能紊亂、全身性感染或代謝功能紊亂的病人。另選取十堰市太和醫(yī)院60例健康體檢者為對照組，受試者經(jīng)OGTT試驗可知空腹血糖水平（FBG）＜7.0 mmol/L。所有受試者入組前均簽署知情同意書，愿意配合研究。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 研究方法

1.2.1采集臨床指標 對所有入組受試者的體質(zhì)量、身高進行測量，并計算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）＝體質(zhì)量（kg）/身高2（m2），記錄各組年齡、家族病史等情況。對所有入組受試者進行安靜狀態(tài)下的血壓測量，包括收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP），取三次測量的平均值。

1.2.2生化指標測定 對入組受試者進行OGTT檢查，采集病人的空腹靜脈血進行FBG的測定，并對空腹胰島素（FINS）及C肽的值進行測定，利用公式計算胰島抵抗指數(shù)（HOMA-IR）和胰島素β細胞功能指數(shù)（HOMA-β），公式如下：

1.2.3外周血FABP4測定 采用ELISA法測定外周血FABP4水平，試劑盒分別由齊一生物科技（上海）有限公司（批號20160843），上?？道噬锟萍加邢薰荆ㄅ?016912）和上海潤裕生物科技有限公司（批號20161024）提供，嚴格按照操作說明書進行。

1.2.4觀察指標 對兩組一般情況和臨床指標進行比較。

按照HOMA-IR是否大于等于2.80為標準［5］，將人群分為有無胰島素抵抗兩個組，將一般情況中的各項指標是否為胰島素抵抗的影響因素進行單因素分析和多因素分析。計算多因素分析中陽性結(jié)果指標對于有無胰島素抵抗的診斷價值。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 15.0對數(shù)據(jù)進行分統(tǒng)計分析。計量資料比較以±s表示，兩組比較采用兩獨立樣本t檢驗；兩組計數(shù)資料比較則采用χ2檢驗；利用logistic多因素回歸分析篩選獨立的危險因素，利用ROC曲線對診斷價值指標進行計算，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般情況和臨床指標的比較結(jié)果T2DM組病人BMI、腰臀比顯著高于對照組（P＜0.05），T2DM病人血清FABP4、FBG、FINS、C肽、HOMA-IR水平高于對照組（P＜0.05），而HOMA-β水平低于對照組（P＜0.05），見表1。

2.2 胰島素抵抗的影響因素分析——單因素分析所有受試者中共有67例為胰島素抵抗（T2DM組60例，對照組7例），53例為非胰島素抵抗，單因素分析結(jié)果顯示，腰臀比是否低于0.8，F(xiàn)BG是否高于6 mmol/L，F(xiàn)INS是否高于2.5 mU/L，C肽是否高于1.5 ng/mL，HOMA-β是否低于110，F(xiàn)ABP4是否高于30 ng/L可能與受試者是否為胰島素抵抗有關(guān)（P＜0.05），具體如表2所示。

2.3 胰島素抵抗的影響因素的logisitc多因素回歸分析以受試者是否存在胰島素抵抗為因變量（賦值1＝是，0＝否），對單因素分析中結(jié)果為陽性的因素進行多因素logistic回歸分析，賦值如下：腰臀比是否低于0.8（0＝否，1＝是），F(xiàn)BG是否高于6 mmol/L（0＝否，1＝是），F(xiàn)INS是否高于2.5 mU/L（0＝否，1＝是），C肽是否高于1.5 ng/mL（0＝否，1＝是），HOMA-β是否低于110（0＝否，1＝是），F(xiàn)ABP4是否高于30 ng/L（0＝否，1＝是），變量納入方法為“進入”，結(jié)果顯示，F(xiàn)BG高于6 mmol/L，C肽高于1.5 ng/mL，F(xiàn)ABP4高于30 ng/L是導(dǎo)致受試者出現(xiàn)胰島素抵抗的獨立危險因素（P＜0.05），而腰臀比低于0.8，F(xiàn)INS高于2.5 mU/L，HOMA-β低于110尚不能認為是導(dǎo)致受試者出現(xiàn)胰島素抵抗的獨立危險因素，具體如表3所示。

表1 2型糖尿病60例和健康體檢者60例的一般資料及相關(guān)臨床指標比較

表2 2型糖尿病60例和健康體檢者60例的各項指標是否為胰島素抵抗的影響因素的單因素分析結(jié)果

表3 2型糖尿病60例和健康體檢者60例胰島素抵抗影響因素的logisitc多因素回歸分析

2.4 計算多因素分析中陽性結(jié)果指標對于有無胰島素抵抗的診斷價值以HOMA-IR是否大于等于2.80為“金標準”，利用FBG、C肽和FABP4三個指標對120例受試者進行有無胰島素抵抗的診斷價值分析。結(jié)果顯示：三個指標診斷的正確指數(shù)分別為0.343，0.310，0.221。具體如表4，圖1所示。

表4 FBG、C肽和FABP4三個指標對2型糖尿病60例和健康體檢者60例胰島素抵抗的診斷價值

圖1 利用FBG，C肽和FABP4三個指標對2型糖尿病60例和健康體檢者60例胰島素抵抗的診斷ROC曲線圖

3 討論

胰島素抵抗是指胰島素作用靶器官導(dǎo)致胰島素敏感性下降，它不僅是T2DM發(fā)病基礎(chǔ)，同時也是多種代謝疾病發(fā)生的共病基礎(chǔ)［4］。近些年來有研究表明［6］，細胞因子（如炎性因子）在T2DM病人產(chǎn)生胰島素抵抗的過程中，發(fā)揮了重要的作用，甚至直接參與胰島素抵抗的進展。

FABP4屬于脂肪酸結(jié)合蛋白，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，該因子和花生四烯酸等不飽和脂肪酸的親和力很高，在人體內(nèi)直接參與脂肪酸的代謝過程，而且證據(jù)表明該因子在糖類的代謝中也起到重要的作用，并與炎癥反應(yīng)有關(guān)聯(lián)［7］。在近些年來的報道中，出現(xiàn)了越來越多的關(guān)于FABP4與糖尿病發(fā)生發(fā)展之間關(guān)聯(lián)的文獻［8-9］。動物實驗［10］證明，敲除FABP4基因的小鼠，其胰島素的敏感性顯著增高，并且在血糖，胰島素濃度和胰島β細胞功能方面，都出現(xiàn)了不同程度的改善，在為小鼠模型服用FABP4后，其胰島素的敏感性就會出現(xiàn)明顯的下降，而血糖濃度也明顯增高。Zhang等［11］研究結(jié)果表明，F(xiàn)ABP4的水平與FBG、FINS、HOMA-IR的水平之間，呈現(xiàn)正相關(guān)的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示T2DM組的病人，其FABP4的水平比對照組有顯著升高，logistic回歸分析，結(jié)果顯示FABP4是導(dǎo)致T2DM病人出現(xiàn)胰島素抵抗的獨立危險因素，上述結(jié)果提示為體內(nèi)FABP4水平的升高與病人胰島素抵抗發(fā)生有關(guān)。

FABP4的相對分子質(zhì)量僅為（15～16）×103，包含126到134個氨基酸序列，其分子機構(gòu)中包括α螺旋和β折疊結(jié)構(gòu)，形成了特殊的開口結(jié)構(gòu)，加之其較小的分子質(zhì)量，使其容易與脂肪酸產(chǎn)生高度的親和力。FABP4是細胞內(nèi)重要的脂肪酸載體蛋白，在人體內(nèi)廣泛的參與脂肪酸的吸收，轉(zhuǎn)運和代謝過程，現(xiàn)已證實，F(xiàn)ABP4參與胰島素抵抗的機制，主要是通過調(diào)節(jié)脂類代謝實現(xiàn)的，在FABP4與脂肪酸結(jié)合之后，一方面限制了脂肪分子的移動，另外一方面也增加了脂肪酸的可溶性，促進其轉(zhuǎn)運到線粒體或者過氧化物酶體，在FABP4體內(nèi)濃度升高的情況下，可以對短鏈脂肪酸在細胞內(nèi)的聚集產(chǎn)生影響，使Akt磷酸化程度降低，導(dǎo)致肌肉及其他組織中葡萄糖氧化水平下降，使葡萄糖轉(zhuǎn)化為脂質(zhì)的過程發(fā)生障礙，最終導(dǎo)致胰島素抵抗的發(fā)生［12-13］。

從本研究結(jié)果可以看出，F(xiàn)BG、C肽和FABP4三個指標成為了受試者是否出現(xiàn)胰島素抵抗的獨立危險因素，并且利用三個指標對納入研究的人群進行診斷，其獲得的診斷價值幾乎一致，提示以這三種指標進行胰島素抵抗的診斷可能擁有著良好的發(fā)展前景，而且也說明了FABP4作為一個新興的監(jiān)測指標，其實用性與另外兩個指標不相上下，三種指標均為診斷靈敏度不高，但是特異度很理想，這非常符合對疾病進行診斷的需要。可以預(yù)見如果進行大規(guī)模的人群研究，對本研究的結(jié)果進行深入的探討，可能開發(fā)出新型的人體胰島素抵抗的診斷標準，比如制作三種指標進行并聯(lián)診斷的試劑盒等等，可以提高診斷的靈敏度。

綜上所述，血清FABP4水平與胰島素抵抗有密切的關(guān)系。但本研究系橫斷面小樣本的觀察，不能對FABP4基因在代謝綜合征發(fā)生發(fā)展過程中所起作用在全部因素中所占的比例進行分析評估，也難以就FABP4基因如何對糖尿病的發(fā)生發(fā)展起到作用進行闡明，有待今后進一步深入研究。