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    玉米中的黃曲霉毒素及檢測方法研究

    2019-04-27 01:37:48王慧迪
    科技資訊 2019年1期
    關(guān)鍵詞:檢測方法玉米

    王慧迪

    摘 要:玉米中含有一些黃曲霉毒素,而這些毒素如果進入到人與動物的身體中會產(chǎn)生肝癌等疾病問題。如果長期的服用低濃度的黃曲霉毒素飼料也會導致動物胚胎中毒,還會降低奶牛的產(chǎn)量,也會導致牛奶中含有轉(zhuǎn)型的黃曲霉毒素,如果黃曲霉毒素進入到人體內(nèi),會誘發(fā)肝癌等嚴重的后果?;诖耍撐闹饕獙τ衩S曲霉毒素進行了分析,探究了黃曲霉毒素的檢測方式與手段,僅供參考。

    關(guān)鍵詞:玉米 黃曲霉毒素 檢測方法

    中圖分類號:TS201 文獻標識碼:A 文章編號:1672-3791(2019)01(a)-0-02

    黃曲霉毒素是世界衛(wèi)生組織中劃定的一類致癌物,是霉菌中毒性較強的毒素。而在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,玉米中黃曲霉毒素超標問題較為嚴重,為了解決此種問題,就要探究黃曲霉毒素檢測方式,這樣才可以保障食品安全。

    1 玉米黃曲霉毒素

    玉米是我國第二大糧食作物,在我國主要在華北、東北、秦嶺以及青海東部等地區(qū)中栽培。玉米種植主要分為春夏兩季,北方多為春季播。在一般狀況之下玉米品種的生長期在90~120d左右,黏甜玉米的生長周期相對較少。

    玉米的胚部大,含有較為豐富的營養(yǎng)物質(zhì),具有呼吸旺盛以及帶菌量多的特征。而如果玉米的水分高于安全儲藏標準,就會導致玉米出現(xiàn)發(fā)熱、霉變等問題,會降低玉米的產(chǎn)量與質(zhì)量,也就造成較為嚴重的后果。

    而霉菌毒素則是一種在谷物中自然存在真菌誘發(fā)的一種有毒的化合物,在玉米谷物中存在著不同的霉菌毒素,而黃曲霉毒素則就是危害較大的一種類型。

    黃曲霉毒素會損傷肝臟,導致肝功能出現(xiàn)下降等問題,嚴重的降低了生產(chǎn)性能,也會降低免疫力,造成微生物感染等問題。同時,如果長期的服用低濃度的黃曲霉毒素飼料也會導致動物胚胎中毒。黃曲霉毒素會降低奶牛的產(chǎn)量,也會導致牛奶中含有轉(zhuǎn)型的黃曲霉毒素,如果黃曲霉毒素進入到人體內(nèi),會誘發(fā)肝癌等嚴重的后果。

    2 玉米中的黃曲霉毒素檢測方法研究

    現(xiàn)階段,在玉米的黃曲霉毒素檢測中主要的方式主要有以下幾種。

    2.1 薄層層析法(TLC法)

    薄層層析法(TLC法)是在20世紀60年代建立起來的一種檢測方式,可以有效地測定玉米中的黃曲霉薄層色譜分離處理,通過波長365nm紫外光進行處理,此種類型的紫外光會產(chǎn)生藍色熒光,分析在薄層板上的熒光強度,就可以確定黃曲霉毒素的具體含量。

    薄層層析法在操作中可以通過單向展開以及雙向展開法兩種方式進行處理。其中雙向展開法可以有效地去除樣品中含有的雜質(zhì),操作也較為簡單靈敏,在處理中有效地省略了柱層析等相關(guān)凈化流程。而通過薄層層析法進行玉米黃曲霉毒素測定的過程中,缺乏足夠的專一性,會造成一些測量誤差問題,對此,為了確定玉米中黃曲霉毒素的具體含量要通過其他實驗輔助應用。

    2.2 高效液相色譜法(HPLC法)

    高效液相色譜法是一種在20世紀80年代發(fā)展形成的一種檢測玉米黃曲霉毒素的方式,在檢測中主要就是通過熒光檢測進行檢驗處理,此種檢驗方式是一種化學手段與計算機技術(shù)的有效融合,具有自動化的特征。

    在進行檢測中,通過此種方式主要就是基于衍生后黃曲霉毒素在固定相、流動相之間的分配量為基礎(chǔ),實現(xiàn)分離的效果。在分離之后的黃曲霉毒素會產(chǎn)生一些發(fā)射特征性熒光,可以通過熒光檢測器進行測量分析。在檢測中可以通過正相色譜、反相色譜進行處理。

    2.3 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)

    ELISA是主要就是通過間接競爭酶聯(lián)免疫吸附法測量玉米的黃曲霉毒素,通過把黃曲霉毒素的特異性抗體放在聚苯乙烯微量的反應板中的孔穴上, 再通過添加待測樣品以及酶標的已知抗原, 在免疫競爭反應之后,放入酶底物進行顯色, 通過酶標儀,基于顯色反應顏色的具體濃度進行定量處理。此種方式精準穩(wěn)定,操作便捷,在處理中涉及到的儀器以及試劑設(shè)備相對較少,具有回收率高的特征,在操作中實驗的步驟也相對較為簡單,是一種在國內(nèi)外中應用范圍較廣的黃曲霉毒素檢測方式。但是因為檢測抗體必須要低溫保存,抗體的壽命相對較短,同時在測定過程中存在一定的假陽性率,主要就是在大量樣品篩查中應用。

    2.4 免疫學與儀器結(jié)合方法

    隨著黃曲霉毒素檢測標準越來越嚴格,為了提升玉米檢測效率,現(xiàn)階段主要就是通過免疫學與儀器組合的方式進行玉米黃曲霉毒素的檢測。

    2.4.1 免疫親和柱凈化熒光光度法

    免疫親和柱凈化結(jié)合熒光光度法檢測黃曲霉毒素的方式,主要就是利用抗原抗體的特異吸附性特征,將黃曲霉毒素作為克隆抗體、作為填充柱,而特異性則要選擇性的吸附黃曲霉毒素,將甲醇作為流動相結(jié)合的黃曲霉毒素,進行洗脫處理,利用溴溶液進行衍生,獲得的衍生物可以發(fā)射熒光,利用熒光光度計分析就可以測定黃曲霉毒素的含量。在處理中,應用的儀器設(shè)備較為簡單便捷,自動化程度也相對較高,操作簡單,靈敏度較高。但是在測定過程中會出現(xiàn)假陽性問題,要基于實際狀況合理選擇。

    2.4.2 免疫親和柱高效液相色譜法

    免疫親和柱高效液相色譜法則具有較為顯著的高度特異性特征,可以去除一些多數(shù)的干擾物質(zhì),具有快速、溶劑使用性少、自動化以及再生利用的特征,缺點就是柱成本高以及商品化IAC等特征,可以適合多種不同的毒素,可以加預柱凈化。

    2.5 超光譜(HS)法

    黃曲霉毒素的檢測均應用化學方法,這些化學方法檢測結(jié)果較為精準,但是化學方式會耗費都用化學方法,并且有些化學方法的檢測結(jié)果非常準確,但是化學方法都要耗費大量的檢測時間,檢測費用較高且損壞檢測樣品,所以研究一種快速、準確、無損樣品的檢測方法對糧食產(chǎn)業(yè)是至關(guān)重要的,超光譜法檢測黃曲霉毒就是這樣一種方法。它的原理是首先通過光源激發(fā)待測樣品,再通過設(shè)備捕捉成像,然后對成像進行特征抽取和特征排列,最后實現(xiàn)區(qū)別受黃曲霉毒素污染和未受黃曲霉毒素污染的樣品。

    2.6 免疫親和微柱檢測法

    免疫親和微柱檢測法就是在試樣提取液之后,對其進行過濾,稀釋處理,在利用黃曲霉毒素自身的免疫親和柱進行測試處理,樣液中黃曲霉毒素B1會被抗體捕獲,然后雜質(zhì)就會隨著洗滌液一起流出微柱,在通過甲醇就可以進行黃曲霉毒素B1的洗脫處理,通過熒光光度法,基于黃曲霉毒素檢測工作曲線進行含量的測定。

    3 結(jié)語

    玉米中黃曲霉毒素具有一定的致癌性與致畸性,隨著人們食品安全意識的不斷提升,要合理地應用各種技術(shù)手段進行黃曲霉毒素的檢測處理。現(xiàn)階段,對各種方法進行不斷改進與完善,現(xiàn)階段常用的黃曲霉毒素方法檢測速度慢,具有精準便捷的優(yōu)勢特征,而隨著各種技術(shù)手段的成熟,一些無侵入性,無損性的檢測方式也在不斷成熟。在今后,隨著各種技術(shù)手段的不斷發(fā)展完善,這些技術(shù)手段的成熟會推動玉米黃曲霉毒素檢測的不斷發(fā)展。

    參考文獻

    [1] 李翠萍.玉米抗黃曲霉菌種質(zhì)篩選及抗性相關(guān)途徑挖掘[D].安徽農(nóng)業(yè)大學,2017.

    [2] 王燕.玉米真菌毒素檢測技術(shù)的建立及其應用研究[D].山東農(nóng)業(yè)大學,2016.

    [3] 范國燕.玉米主要霉菌毒素體外評定與吸附劑研發(fā)[D].山東農(nóng)業(yè)大學,2015.

    [4] 依桂華,崔迪,劉加娟,等.玉米中黃曲霉毒素B1的檢測方法[J].養(yǎng)殖技術(shù)顧問,2014(4):221.

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