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    肉桂油對(duì)馬錢子總堿中馬錢子堿和士的寧透皮吸收的影響

    2019-04-25 00:01:58趙雪琪齊笑管慶霞馮宇飛關(guān)楓王艷宏
    中國中醫(yī)藥信息雜志 2019年4期

    趙雪琪 齊笑 管慶霞 馮宇飛 關(guān)楓 王艷宏

    摘要:目的? 探討肉桂油對(duì)馬錢子總堿透皮吸收的影響,為馬錢子相關(guān)制劑的開發(fā)和減毒增效研究奠定基礎(chǔ)。方法? 以體外SD大鼠皮膚為滲透屏障,F(xiàn)ranz擴(kuò)散池法考察不同濃度(0.5%、1%、3%、5%、10%)肉桂油對(duì)馬錢子總堿中馬錢子堿和士的寧透皮吸收的影響;采用飽和溶解度法測(cè)定馬錢子總堿中馬錢子堿和士的寧在不同濃度肉桂油中的平衡溶解度;采用HPLC測(cè)定馬錢子總堿角質(zhì)層/溶劑分配系數(shù);采用傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)測(cè)定肉桂油對(duì)皮膚角質(zhì)層的作用。結(jié)果? 不同濃度肉桂油促透馬錢子總堿中馬錢子堿的穩(wěn)態(tài)滲透速率(Jss)和增滲比(ER)分別為5.84~19.65 ?g/(cm2·h)、0.23~3.54,促透馬錢子總堿中士的寧的Jss和ER分別為1.36~18.38 ?g/(cm2·h)、0.19~2.55;馬錢子總堿中馬錢子堿、士的寧在不同濃度肉桂油中的平衡溶解度分別為6.10~10.97 g/L、4.10~6.58 g/L;馬錢子總堿中馬錢子堿和士的寧的角質(zhì)層/溶劑分配系數(shù)分別為0.74~1.39、0.24~0.35。結(jié)論? 不同濃度肉桂油對(duì)馬錢子總堿中的馬錢子堿及士的寧均有一定促透作用,以1%肉桂油作用最佳,其機(jī)制可能為通過影響角質(zhì)層內(nèi)角蛋白改變角質(zhì)層結(jié)構(gòu)而促透。

    關(guān)鍵詞:肉桂油;馬錢子總堿;馬錢子堿;士的寧;透皮吸收

    中圖分類號(hào):R285.5? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A? ? 文章編號(hào):1005-5304(2019)04-0078-07

    馬錢子為馬錢子科植物馬錢Strychnos nux-vomica L.的干燥成熟種子,具有通絡(luò)止痛、散結(jié)消腫功效,用于治療風(fēng)濕痹痛、肌膚麻木、牙痛、防風(fēng)、頑癬、惡性腫瘤、重癥肌無力、截癱、小兒麻痹后遺癥等[1-4]。2015年版《中華人民共和國藥典》中馬錢子的含量測(cè)定指標(biāo)為馬錢子堿、士的寧,二者既是馬錢子的主要有效成分,也是有毒成分。如何既保留或增強(qiáng)馬錢子的藥理活性又降低其毒性,是馬錢子相關(guān)制劑開發(fā)需解決的關(guān)鍵問題。由于具有恒定的血藥濃度,可降低藥物毒性,經(jīng)皮給藥成為目前馬錢子制劑開發(fā)的理想選擇[5]。研究表明,肉桂與馬錢子配伍可起到減毒作用[6-9]。肉桂油為肉桂的干燥枝、葉經(jīng)水蒸氣蒸餾提取的揮發(fā)油,是肉桂的主要成分,不僅具有驅(qū)風(fēng)健胃、抗真菌、解熱止痛作用,還可促進(jìn)藥物透皮吸收[5]。本試驗(yàn)以馬錢子堿和士的寧為評(píng)價(jià)指標(biāo),測(cè)定馬錢子總堿在不同濃度肉桂油中的飽和溶解度,采用Franz擴(kuò)散池法探討不同濃度肉桂油對(duì)馬錢子總堿經(jīng)皮滲透性的影響,進(jìn)一步測(cè)定馬錢子總堿角質(zhì)層/溶劑分配系數(shù),采用傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)探討肉桂油對(duì)皮膚角質(zhì)層的作用,旨在通過探討肉桂油對(duì)馬錢子總堿透皮吸收的影響,為馬錢子相關(guān)制劑的開發(fā)和減毒增效研究奠定基礎(chǔ)。

    1? 儀器、試藥與動(dòng)物

    AB265-S分析電子天平,上海梅特勒-托利多國際貿(mào)易有限公司;FA2004分析天平,上海良單儀器儀表有限公司;LC-20AD型高效液相色譜儀,日本島津公司;HC-188透皮儀、MSE-1600 Franz擴(kuò)散池,天津市矽新科技有限公司;SB-5200超聲波清洗機(jī),寧波新芝生物科技股份有限公司;IRTracer-100傅里葉變換紅外光譜儀,SHIMADZO島津制作所;HZS-HA水浴振蕩器,哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司;TGL-16C臺(tái)式離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠;Vacucell真空干燥箱,德國MMM公司;V3 S025渦旋振蕩器,德國IKA公司。

    馬錢子,哈爾濱市盛泰中藥飲片廠,批號(hào)20090165,經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院孫慧峰教授鑒定為馬錢科植物馬錢Strychnos nux-vomica L.的干燥成熟種子。馬錢子堿對(duì)照品(純度≥98%,批號(hào)B25064)、士的寧對(duì)照品(純度≥98%,批號(hào)B25079)中國食品藥品檢定研究院;三乙胺(天津市博迪化工有限公司,批號(hào)HG3121394),冰乙酸(天津市富宇精細(xì)化工有限公司,批號(hào)20160524),色譜甲醇(美國DIKMA),1,2-丙二醇(天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司),肉桂油(廣西平南縣六陳老謝肉桂場)。

    清潔級(jí)雄性SD大鼠,體質(zhì)量220 g,黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,動(dòng)物許可證號(hào)SCXK(黑)2013-004。

    2? 方法與結(jié)果

    2.1? 馬錢子總堿中馬錢子堿和士的寧分析方法的建立

    分別配制馬錢子堿和士的寧對(duì)照品溶液、馬錢子總堿提取物供試品溶液、體外透皮空白接受液及體外透皮試驗(yàn)接受液。考察方法的專屬性、線性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性及回收率。

    馬錢子總堿中馬錢子堿和士的寧HPLC分析條件為:采用DIKMA Diamonsil C18色譜柱(4.6 mm×250 mm,5 ?m),流動(dòng)相為甲醇∶水=24∶76(水∶冰乙酸∶三乙胺=230∶2.40∶0.30),流速1.0 mL/min,檢測(cè)波長254 nm,柱溫30 ℃,進(jìn)樣量10 ?L。以濃度為橫坐標(biāo),峰面積積分值為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,線性關(guān)系考察結(jié)果見表1,色譜圖見圖1。結(jié)果表明,馬錢子堿和士的寧的精密度RSD分別為0.42%、0.27%,24 h穩(wěn)定性RSD分別為0.87%、0.35%,重復(fù)性RSD分別為0.60%、0.33%,平均回收率分別為97.83%(RSD=0.28%)、98.65%(RSD=0.39%)。該分析方法的專屬性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、準(zhǔn)確性均良好。馬錢子堿和士的寧在提取物中的質(zhì)量濃度分別為0.04、0.10 g/L。

    2.2? 不同濃度肉桂油對(duì)馬錢子堿和士的寧透皮吸收的影響

    2.2.1? 供給液的制備

    用丙二醇-水(80∶20)[8]配制成不含肉桂油及含肉桂油0.5%、1%、3%、5%、10%(V/V)的溶液各50 mL,超聲混勻,以3%氮酮作為陽性對(duì)照。為確保其具有最大的熱力學(xué)活性和漏槽條件,分別取上述不同濃度肉桂油溶液配制成馬錢子堿和士的寧的飽和溶液作為供給液,低溫避光密閉保存?zhèn)溆谩?/p>

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