開墾和長(zhǎng)期施肥下青海黑鈣土中腐殖質(zhì)的光譜特征*

張 桐 何小松 李 猛? 劉元元 席北斗 張 慧 李 丹

（1 中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院環(huán)境基準(zhǔn)與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100012）（2 重慶大學(xué)城市建設(shè)與環(huán)境工程學(xué)院，重慶 400044）

腐殖質(zhì)是土壤中的重要組成部分，占土壤有機(jī)質(zhì)比重的50%～70%，主要來(lái)源于植物殘?bào)w或（微）生物體降解和土壤生物化學(xué)合成等過(guò)程［1］，常起到維持土壤碳平衡、調(diào)控土壤肥力、調(diào)節(jié)土壤理化性質(zhì)的作用［2］。腐殖質(zhì)并非單一的有機(jī)化合物，而是一系列在組成、結(jié)構(gòu)及性質(zhì)上既有共性又有差別的有機(jī)分子結(jié)合而成的復(fù)雜“生物超分子”結(jié)構(gòu)，含有豐富的功能基團(tuán)和有機(jī)組分［3］。應(yīng)用紫外—可見光譜、傅里葉變換紅外光譜和三維熒光光譜分析技術(shù)對(duì)土壤腐殖質(zhì)進(jìn)行綜合表征，可以鑒定其中的有機(jī)組分和官能團(tuán)組成，并解析出腐殖質(zhì)的性質(zhì)、來(lái)源與功能［4-6］。

土地利用方式的變化和施肥策略常是影響腐殖質(zhì)結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和功能發(fā)生動(dòng)態(tài)變化的關(guān)鍵因素［7-8］。有研究表明：土地利用的變化可能導(dǎo)致土壤腐殖質(zhì)在來(lái)源、結(jié)構(gòu)和性質(zhì)各層面上均發(fā)生顯著性改變［9］。而施肥則因其直接改變土壤營(yíng)養(yǎng)供給和基本理化性質(zhì)，如pH、陽(yáng)離子交換量，可能對(duì)腐殖質(zhì)的組成與性質(zhì)產(chǎn)生重要影響［10］。但目前在開墾和施肥對(duì)腐殖質(zhì)影響的研究上，主要關(guān)注于對(duì)腐殖質(zhì)含量的影響，而對(duì)腐殖質(zhì)分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)影響的研究較少。

青藏高原分布有大面積的高原或高山草甸，在土壤中長(zhǎng)期累積了大量的腐殖質(zhì)。由于農(nóng)業(yè)活動(dòng)，部分草甸被開墾為農(nóng)田，并長(zhǎng)期施入了化肥或有機(jī)肥。在青藏高原高寒環(huán)境下，土壤的生態(tài)環(huán)境較為脆弱，土壤腐殖質(zhì)的生物化學(xué)行為可能對(duì)環(huán)境變化較為敏感。而目前，土壤腐殖質(zhì)對(duì)開墾與長(zhǎng)期施肥的響應(yīng)尚不明確，因此也對(duì)優(yōu)化土地利用的管理和保持土壤肥力構(gòu)成了障礙［11］。本試驗(yàn)選取青海達(dá)板山的南麓谷地作為研究區(qū)，采取表層土樣，應(yīng)用紅外、紫外—可見、三維熒光光譜技術(shù)表征土壤腐殖質(zhì)，以研究開墾與長(zhǎng)期施肥對(duì)青海黑鈣土中腐殖質(zhì)光譜特征的影響。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)概況與樣品采集

研究區(qū)地處青藏高原寒溫濕潤(rùn)氣候帶，海拔為2 940～2 980 m，年平均氣溫為0.3oC，常年降雨量為530～560 mm，無(wú)絕對(duì)無(wú)霜期。研究區(qū)內(nèi)分布有大片油菜地及草甸，土壤類型為黑鈣土。

在研究區(qū)選取未開墾草甸（M）和不施肥（NF）、施肥13a（F13a）和26a（F26a）的油菜樣地各3塊樣地。其中，油菜地長(zhǎng)期種植北方白菜型小油菜（Brassica campestrisL.），種植密度為105萬(wàn)株·hm-2，其作物生長(zhǎng)期為110～120 d，本種植季播種于2017年4月中旬，品種為“青雜五號(hào)”。未開墾草甸植被主要為蒿草屬（Kovresia）。其中，每年分6次向油菜地施入無(wú)機(jī)復(fù)合肥（總計(jì)施氮 160～270 kg·hm-2·a-1、施磷80～120 kg·hm-2·a-1、施鉀135～225 kg·hm-2·a-1）和牦牛糞便堆肥（9 000 kg·hm-2·a-1）。其中，牦牛糞便堆肥中含碳量為325 g·kg-1、含氮量為19 g·kg-1、含磷量為10.5 g·kg-1。在種植季進(jìn)行2次漫灌。草甸無(wú)施肥和灌溉管理。于10月上旬油菜收割后，在各樣地采取混合表層土樣（0～20 cm），樣品低溫保存并迅速運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。在去除草根、砂粒后冷凍干燥，研磨過(guò)2 mm和0.15 mm尼龍篩，用于土壤理化性質(zhì)測(cè)定和有機(jī)質(zhì)提取。

1.2 土壤理化性質(zhì)測(cè)定

土壤pH采用電極法測(cè)定，有機(jī)質(zhì)采用重鉻酸鉀外熱法測(cè)定，陽(yáng)離子交換量（CEC）采用乙酸鈉法測(cè)定，碳酸鈣含量采用氣量法測(cè)定［12］。土壤粒度采用激光粒度儀（LS 13 320，Beckman Coulter，美國(guó)）測(cè)定，全氮含量采用元素分析儀（Elementar，德國(guó)）測(cè)定。

1.3 土壤腐殖質(zhì)提取

土壤中胡敏酸和富里酸的提取參考國(guó)際腐殖質(zhì)協(xié)會(huì)推薦的腐殖質(zhì)提取方法［13］。得到的胡敏酸粗品用超純水洗滌3～5次，以去除Cl-（以AgNO3溶液滴定法檢查），離心后凍干［14］。經(jīng)純化后的富里酸同樣進(jìn)行凍干，收集備用。

1.4 腐殖質(zhì)的光譜表征

采用傅里葉變換紅外光譜儀（Tensor II，德國(guó)布魯克），以KBr壓片法測(cè)定腐殖質(zhì)樣品的紅外光譜。掃描范圍為4 000～400 cm-1，分辨率為2 cm-1，掃描次數(shù)為64次。應(yīng)用OPUS V7.5軟件（德國(guó)布魯克）對(duì)測(cè)得的紅外光譜譜圖進(jìn)行平滑與基線校正后，分析特征吸收峰的峰高與位移等信息，對(duì)特征吸收峰與官能團(tuán)的鑒定參考相關(guān)文獻(xiàn)［14-15］。

腐殖質(zhì)的紫外—可見光譜應(yīng)用紫外—可見分光光度計(jì)（UV-4802，優(yōu)尼柯公司，美國(guó)）測(cè)定稱取約50 mg胡敏酸或富里酸的干燥樣品于50 mL離心管中，加入40 mL 0.1 mol·L-1磷酸緩沖溶液（pH=7），振蕩并超聲30 min使其完全溶解。胡敏酸或富里酸溶液則以總有機(jī)碳（TOC）分析儀（Multi N/C 2100S，耶拿公司，德國(guó)）測(cè)定TOC含量，并據(jù)此以超純水將溶液TOC濃度逐級(jí)調(diào)節(jié)至10 mg·L-1。以0.1 mol·L-1超純水為空白，應(yīng)用稀釋液的吸光值。測(cè)試時(shí)，掃描波長(zhǎng)范圍為：190～700 nm，掃描波長(zhǎng)間隔為1 nm。測(cè)定后，計(jì)算稀釋液在254 nm處的吸光值與TOC濃度的比值得到SUVA254，并分別計(jì)算其在240 nm與420 nm、250 nm與360 nm處的吸光度比值得到E2/E4與E2/E3。

腐殖質(zhì)樣品的三維熒光光譜以三維熒光光度計(jì)（F-7000，Hitachi，日本）測(cè)定。測(cè)定時(shí)，溶液TOC=10 mg·L-1，激發(fā)波長(zhǎng)（Ex）范圍為200～450 nm，發(fā)射波長(zhǎng)（Em）范圍為280～550 nm，掃描速度為2 400 nm·min-1，狹縫寬帶為5 nm。得到的三維熒光譜圖在去除散射后，應(yīng)用DOMFluor工具箱（MatLab v2017a，美國(guó)）以平行因子分析法確定腐殖質(zhì)中的有機(jī)組分及各組分的相對(duì)含量［16］，其特征峰的鑒定參考相關(guān)文獻(xiàn)［17-18］。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用單因素方差分析（One-way ANOVA）檢驗(yàn)不同處理間土壤理化性質(zhì)、腐殖質(zhì)光譜特性的顯著差異性（SPSS v22，IBM，美國(guó)）。應(yīng)用主成分分析法（PCA）檢驗(yàn)不同處理間土壤腐殖質(zhì)中各組分的差異性（XLSTAT v2014，Addinsoft，美國(guó)）。

2 結(jié)果與討論

2.1 開墾與長(zhǎng)期施肥對(duì)黑鈣土基本理化性質(zhì)的影響

青海草甸與油菜地中黑鈣土的pH為8.16～8.77，土壤呈弱堿性（表1）。草甸經(jīng)開墾后，土壤pH顯著下降（P＜0.05），而長(zhǎng)期施肥的土壤具有最低的pH（P＜0.05）。土壤中含有2.7%～5.3%的砂粒、22.4%～26.8%的粉粒、69.2%～72.3%的黏粒，土壤質(zhì)地可歸為黏壤土。各處理土壤中的砂粒組分因受土壤母質(zhì)等不均一因素的影響而產(chǎn)生差異性分布，可能會(huì)對(duì)土壤有機(jī)質(zhì)發(fā)育產(chǎn)生影響。草甸土中陽(yáng)離子交換量（CEC）平均為35.46 cmol·kg-1，高于全國(guó)土壤10～20 cmol·kg-1的CEC分布范圍，這可能與青海黑鈣土中含有較高的碳酸鈣有關(guān)（平均為18.2～53.6 mg·kg-1）。同時(shí)，研究區(qū)土壤質(zhì)地黏重，土壤膠體負(fù)電荷量大，所能吸附的Ca2+、Mg2+、Na+等陽(yáng)離子的能力較強(qiáng)［19］。不施肥而進(jìn)行長(zhǎng)期種植油菜后，土壤CEC顯著降低。而長(zhǎng)期施肥則導(dǎo)致CEC的顯著增高（P＜0.05），說(shuō)明：施肥使得土壤保肥與營(yíng)養(yǎng)供給能力增強(qiáng)（表1）。草甸土壤中含有平均為113.46 g·kg-1的有機(jī)質(zhì)，開墾后土壤中的有機(jī)質(zhì)含量顯著降低。但相比不施肥，長(zhǎng)期施肥的油菜地土壤中有機(jī)質(zhì)含量較高，可能說(shuō)明施肥減緩了有機(jī)質(zhì)的降低。同時(shí)，長(zhǎng)期施肥也使得油菜地土壤中全氮含量達(dá)0.54～0.91 g·kg-1，顯著高于不施肥油菜地和草甸土壤（P＜0.05）。

表1 不同處理下青海黑鈣土的基本理化性質(zhì)Table 1 Basic physic-chemical properties of chernozem relative to treatment

2.2 開墾與長(zhǎng)期施肥對(duì)黑鈣土腐殖質(zhì)紫外—可見光譜（UV-Vis）特征的影響

紫外—可見光譜（UV-Vis）能有效地反映出腐殖質(zhì)的特定分子結(jié)構(gòu)，單位濃度的吸收值或特定波長(zhǎng)吸收值之間的比值等指標(biāo)對(duì)腐殖質(zhì)的宏觀結(jié)構(gòu)具有指示意義。一般腐殖質(zhì)在254 nm處的單位有機(jī)碳含量的吸光度（SUVA254）可用于表征腐殖質(zhì)的腐殖化程度，其數(shù)值越大代表腐殖化越強(qiáng)［20］。E2/E3是指腐殖質(zhì)在250 nm與360 nm處吸光度的比值，可用以表征土壤中腐殖質(zhì)的相對(duì)分子量和芳香化程度，其數(shù)值越小代表腐殖質(zhì)的相對(duì)分子量和芳香度越大［21］。土壤腐殖質(zhì)的E2/E4值則是指其在254 nm和436 nm處的吸光度比值，可用以表征腐殖質(zhì)的來(lái)源，E2/E4值較高表示內(nèi)源貢獻(xiàn)較大，較小則表示以外源貢獻(xiàn)為主［22］。其中，外源貢獻(xiàn)指的是土壤中的腐殖質(zhì)是由外源物質(zhì)如枯枝落葉、生物殘?bào)w的腐殖化過(guò)程貢獻(xiàn)而來(lái)的，而內(nèi)源貢獻(xiàn)是指在土壤中的微生物作用下將原有的有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)化為腐殖質(zhì)的過(guò)程。

對(duì)青海黑鈣土中腐殖質(zhì)進(jìn)行UV-Vis分析，計(jì)算其SUVA254和E2/E3、E2/E4值，結(jié)果見表2。相比富里酸（SUVA254=21.78～32.86，E2/E3=3.04～3.66），胡敏酸具有較高的SUVA254（38.59～44.30）和較低的E2/E3值（2.21～3.14）。這可能說(shuō)明胡敏酸相較富里酸具有更高的腐殖度、較高的相對(duì)分子量和芳香性，這一結(jié)果與相關(guān)研究結(jié)果相符［23］。青海黑鈣土中腐殖質(zhì)E2/E4為4.55～7.02，整體處于較低水平，腐殖質(zhì)應(yīng)主要是外源如植物殘?bào)w腐解產(chǎn)生。E2/E4在草甸和不施肥油菜地土壤的胡敏酸與富里酸中無(wú)顯著性差異（表2）。但在施肥13 a與施肥26 a黑鈣土中，胡敏酸的E2/E4顯著低于富里酸，表明相比富里酸，施肥使得胡敏酸更依賴外源輸入。對(duì)比不施肥的油菜地，草甸土壤中胡敏酸具有較高的SUVA254和較低的E2/E4、E2/E3，而富里酸則具有較低的SUVA254。這可能說(shuō)明草甸經(jīng)開墾、不施肥處理后，胡敏酸的腐殖化程度、相對(duì)分子量和芳香性均降低。而胡敏酸的E2/E4則升高，這可能是由于外源植物殘?bào)w輸入的減少導(dǎo)致了腐殖質(zhì)內(nèi)源貢獻(xiàn)（如微生物作用）的相對(duì)增強(qiáng)。富里酸對(duì)草甸開墾的響應(yīng)與胡敏酸有重要差異。油菜地土壤富里酸較草甸有較高的SUVA254，表明其在油菜種植過(guò)程中，腐殖化增強(qiáng)。對(duì)比不施肥油菜地，長(zhǎng)期施肥（13 a與26 a）下的黑鈣土胡敏酸SUVA254較高，E2/E4和E2/E3則較低，表明長(zhǎng)期施肥可能導(dǎo)致了胡敏酸腐殖化程度增強(qiáng)、相對(duì)分子量和芳香性增大、對(duì)外源依賴性提高（表2）。這可能是因?yàn)槭┓适沟猛寥乐械奶脊┙o多樣化，有機(jī)質(zhì)分子結(jié)構(gòu)趨向于更復(fù)雜。在對(duì)長(zhǎng)期施肥的響應(yīng)上，富里酸表現(xiàn)出與胡敏酸較大的差異。施肥后，富里酸SUVA254未發(fā)生顯著變化，E2/E4和E2/E3則升高，表明長(zhǎng)期施肥可能導(dǎo)致了富里酸的相對(duì)分子量和芳香性降低、對(duì)內(nèi)源依賴性提高，其結(jié)果可能與微生物活動(dòng)有關(guān)。

表2 土壤腐殖質(zhì)紫外—可見光譜特性Table 2 UV-Vis spectral properties of soil humus

2.3 開墾與長(zhǎng)期施肥對(duì)黑鈣土腐殖質(zhì)傅里葉變換-紅外光譜（FT-IR）特征的影響

應(yīng)用傅里葉變換-紅外光譜法分析青海黑鈣土腐殖質(zhì)中官能團(tuán)的特征吸收峰，結(jié)果見圖1。不同處理下胡敏酸與富里酸FT-IR光譜中的官能團(tuán)特征峰位置未發(fā)生變化。黑鈣土中胡敏酸與富里酸的官能團(tuán)組成類似：在3 410 cm-1波數(shù)處的O-H或N-H伸展振動(dòng)峰，主要來(lái)自于碳水化合物、蛋白質(zhì)或氨基酸［23］；在2 922、2 851 cm-1波數(shù)處的脂肪族CH2與CH3伸展振動(dòng)峰，主要來(lái)自細(xì)胞膜、細(xì)胞壁等組織成分［24］；在1 718 cm-1的羧基C=O伸展振動(dòng)峰和在1 630 cm-1波數(shù)處的芳基C=C伸展振動(dòng)峰［8］；在1 120～1 240 cm-1波數(shù)處的羧基或酯中C-O伸展振動(dòng)峰［14］；在910～1 080 cm-1波數(shù)處的多糖C-O或C-C的特征吸收峰，主要來(lái)自于植物、微生物殘?bào)w中的碳水化合物［25］。

不同處理間土壤胡敏酸、富里酸的紅外譜圖均具有相似性，但多數(shù)特征吸收峰的強(qiáng)度有較大差異（圖1）。油菜地土壤胡敏酸各特征吸收峰強(qiáng)度相比草甸均降低，這與油菜地土壤有機(jī)質(zhì)的降低一致。長(zhǎng)期施肥下，胡敏酸的O-H、多糖類C-C和C-O、脂肪族CH和CH3的吸收峰強(qiáng)度弱于不施肥土壤，可能是由于施肥增加了作物生物量而大量消耗了土壤碳水化合物和脂肪族有機(jī)物［26］。同時(shí)，長(zhǎng)期施肥使得油菜地土壤胡敏酸中羧基C=O（1 718 cm-1）和C-O（1 221 cm-1）伸展振動(dòng)峰的強(qiáng)度相對(duì)不施肥土壤增強(qiáng)，可能是由于施肥提高了土壤中羧酸類物質(zhì)的生成。相比草甸，不施肥油菜地土壤中富里酸的羧酸類、芳香類、多糖類等的特征吸收峰強(qiáng)度均降低。但長(zhǎng)期施肥后，土壤富里酸的羧酸類、芳香類、多糖類等的特征吸收峰強(qiáng)度均增強(qiáng)。

圖1 土壤腐殖質(zhì)的傅里葉變換紅外光譜圖Fig. 1 FT-IR spectra of soil humus

2.4 開墾與長(zhǎng)期施肥對(duì)黑鈣土腐殖質(zhì)三維熒光光譜（3D-EEM）特征的影響

應(yīng)用三維熒光光譜技術(shù)分析黑鈣土中腐殖質(zhì)的熒光光譜，結(jié)合平行因子分析法識(shí)別出青海黑鈣土腐殖質(zhì)中的5個(gè)有機(jī)質(zhì)組分（圖2），分別為兩個(gè)類胡敏酸組分（C1，Ex/Em=260/420；C2，Ex/Em=270/480）、兩個(gè)UVC類富里酸組分（C3，Ex/Em=220/420；C5，Ex/Em=240/380）和一個(gè)水溶微生物副產(chǎn)物組分（C4，Ex/Em=300/350）［18］。其中，C3和C5組分的峰位置均與紫外光類腐殖質(zhì)（Ex/Em=220～260/380～460）相似，表明其可在吸收紫外光后發(fā)射出較強(qiáng)的熒光且熒光組分的分子量較低［14］。類胡敏酸組分C2中包含可見光類腐殖質(zhì)（Ex/Em=370/480），多來(lái)源為外源腐殖質(zhì)，分子量相對(duì)較高［14］。相比而言，C2的發(fā)射波長(zhǎng)（480 nm）高于C1（420 nm），說(shuō)明C2的分子結(jié)構(gòu)更復(fù)雜，相對(duì)分子量更高［6］。同時(shí)，C4含有類蛋白的組分（類色氨酸，Ex/Em=230/340），可能是來(lái)源于一部分微生物產(chǎn)生的酶或生物殘?bào)w中的蛋白質(zhì)。整體上，胡敏酸中的主要有機(jī)質(zhì)組分為C1、C2和C5，富里酸中的主要有機(jī)質(zhì)組分為C1和C3，C4在兩種腐殖質(zhì)中相對(duì)含量均較低。

比較不同處理間土壤腐殖質(zhì)的組成差異，發(fā)現(xiàn)開墾使得胡敏酸中C2相對(duì)增強(qiáng)、C3與C5相對(duì)減弱，表明開墾可能使得胡敏酸分子結(jié)構(gòu)趨向復(fù)雜，相對(duì)分子量升高（圖3a）。長(zhǎng)期施肥使得胡敏酸中C4相對(duì)含量顯著降低（圖3b），可能與植物殘?bào)w輸入的減少有關(guān)。對(duì)于富里酸，開墾顯著增強(qiáng)了C1、C3、C5這三個(gè)組分的峰強(qiáng)（圖3c），但C3的相對(duì)含量隨開墾降低（圖3d），表明開墾有利于富里酸中低分子量熒光組分的生成。同時(shí)，開墾也顯著提高了富里酸中的類胡敏酸組分C2的峰強(qiáng)度和相對(duì)含量。

圖2 三維熒光光譜分析與平行因子分析獲得的土壤腐殖質(zhì)組分(C1～C5)Fig. 2 Components (C1～C5) of soil humus by means of 3D EEM spectroscopy and PARAFAC

圖3 土壤腐殖質(zhì)中各組分(C1～C5)的相對(duì)含量和峰積分Fig. 3 Relative percentages of the components (C1～C5) of the soil humus

應(yīng)用主成分分析法進(jìn)一步分析開墾與施肥對(duì)腐殖質(zhì)組成的影響（圖4），結(jié)果顯示：未開墾草甸、不施肥和長(zhǎng)期施肥油菜地（13 a與26 a）土壤的胡敏酸與富里酸樣品散點(diǎn)均各自團(tuán)聚，且不同處理間散點(diǎn)相對(duì)分散。這可能進(jìn)一步表明施肥與開墾使得土壤腐殖質(zhì)組成發(fā)生了變化。其中，PC1與PC2分別解釋了不同處理下胡敏酸組分差異的66.9%和29.0%。沿PC1，導(dǎo)致樣品散點(diǎn)分散的主要因素是C1、C2、C3和C5組分在胡敏酸中相對(duì)含量上的差異，表明草甸土壤中胡敏酸中可能含有較多的類富里酸組分（C3與C5），開墾可能導(dǎo)致了這兩種組分相對(duì)含量的降低。沿PC2，導(dǎo)致其分散的主要因素則是C2和C4在胡敏酸中相對(duì)含量的差異?？赡鼙砻鳎洪L(zhǎng)期施肥有利于類胡敏酸C2在土壤胡敏酸中相對(duì)含量的增加，但顯著降低水溶微生物副產(chǎn)物的相對(duì)含量（C4），這可能與施肥后作物殘?bào)w向土壤的輸入減少相關(guān)。對(duì)于富里酸，PC1與PC2分別解釋了不同處理下其組分差異的47.7%和45.6%。沿PC1，草甸土壤樣品散點(diǎn)與其他樣品散點(diǎn)分散開的主要原因是草甸土壤富里酸中含有較高的類富里酸組分C3和水溶微生物副產(chǎn)物C4，且含有較低的類胡敏酸組分C2，表明開墾可能消耗了富里酸中的類富里酸組分C3和水溶微生物副產(chǎn)物，但有利于生成類胡敏酸組分C2。沿PC2，開墾但不施肥的油菜地樣點(diǎn)與其他樣點(diǎn)相對(duì)分散，可能較低的營(yíng)養(yǎng)狀況下導(dǎo)致了類富里酸組分C1的消耗。

圖4 土壤腐殖質(zhì)組分(C1～C5)的主成分分析的散點(diǎn)圖與得分圖Fig. 4 Score-plots and loading sectors of the PCA of components (C1～C5) of soil humus

3 結(jié) 論

開墾與長(zhǎng)期施肥顯著影響了黑鈣土的基本理化性質(zhì)、土壤中胡敏酸與富里酸的光譜特性和土壤腐殖質(zhì)中的分子組成，使土壤有機(jī)質(zhì)含量降低的同時(shí)發(fā)生土壤酸化現(xiàn)象。開墾但不施肥處理使土壤中胡敏酸的腐殖化程度、相對(duì)分子量和芳香性均降低，而開墾后長(zhǎng)期施肥則使胡敏酸的上述指標(biāo)呈現(xiàn)相反的趨勢(shì)。富里酸在開墾后長(zhǎng)期施肥的處理下，其相對(duì)分子量和芳香性均降低，而對(duì)內(nèi)源依賴性提高。開墾后不施肥與開墾后長(zhǎng)期施肥處理均使土壤中胡敏酸的大分子組分增多，小分子組分降低，并使土壤中富里酸的大分子組成數(shù)量和小分子組成數(shù)量均增加，且小分子組成的數(shù)量增加得更為顯著。綜上，青藏高原的農(nóng)墾活動(dòng)應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎進(jìn)行。對(duì)已開墾后的土壤應(yīng)當(dāng)長(zhǎng)期施用有機(jī)肥以有效減緩有機(jī)質(zhì)的降低。同時(shí)，由于施肥使得土壤富里酸對(duì)內(nèi)源依賴性增強(qiáng)，建議在此基礎(chǔ)上擴(kuò)展富里酸的來(lái)源。