MTA2、MMP-7蛋白在結(jié)腸癌與癌旁組織中的表達及意義

趙嶺嶺 李景光 劉艷彩 吳春平 劉學(xué)剛

隨著人們對結(jié)腸癌的深入研究，人們發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因MTA家族參與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移過程，所以對MTA基因的研究十分關(guān)鍵。MMP-7在惡性腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中起著重要作用，且其表達水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等存在緊密聯(lián)系。本文研究為探討MMP-7、MTA2在結(jié)腸癌組織中的表達情況，特對醫(yī)院收治患者進行研究，同時選擇患者癌旁組織進行比較，如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2017年8月于我院收治的結(jié)腸癌100例患者組織標本作為觀察組，其中男性65例、女性35例；年齡52～75歲，平均為(66.5±6.1)歲；高-中分化50例、低分化50例；40例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、60例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；90例未伴遠處轉(zhuǎn)移、10例遠處轉(zhuǎn)移；TNM分期：Ⅰ～Ⅱ期42例、Ⅲ～Ⅳ期58例。另選取結(jié)腸癌癌旁組織100例作為對照組。術(shù)前未進行化療等治療，患者知情且簽署知情同意書。

1.2 方法

采用免疫組化SP法分別檢測2組MTA2、MMP-7表達情況。染色步驟：先對組織標本進行切片、脫蠟和水化處理，并采用自來水沖洗；然后行抗原修復(fù)，滴加過氧化酶阻斷劑，切片上滴加動物非免疫血清，于室溫下孵育10 min，然后將血清去除，并滴加第一抗體，將切片放置于4 ℃環(huán)境下過夜，將PBS去除，再次滴加生物標記的第二抗體，于室溫下孵育10 min，采用PBS沖洗3次，每次沖洗3 min。再次滴加新鮮配制的DAB顯色劑，用水沖洗，并采用蘇木精復(fù)染，應(yīng)用梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。

1.3 判斷標準

陽性：細胞質(zhì)中出現(xiàn)棕黃色顆粒；選取陽性細胞較為集中的區(qū)域10個(400倍)，然后計算陽性細胞百分比，如陽性細胞≥10%則判斷為陽性，否則為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件處理，計數(shù)資料采用率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對照組MTA2、MMP-7陽性表達情況

觀察組中MTA2陽性表達率60.0%(60/100)，對照組中MTA2陽性表達率10.0%(10/100)，2組相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=54.945，P=0.000)。觀察組中MMP-7陽性表達率53.0%(53/100)，對照組中MMP-7陽性表達率17.0%(17/100)，2組相比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=28.484，P=0.000)。

2.2 觀察組癌組織中MTA2陽性表達情況

50例高-中分化結(jié)腸癌患者中，MTA2陽性表達率為40.0%(20/50)，明顯低于低分化結(jié)腸癌中MTA2陽性表達率80.0%(40/50)，χ2=16.667，P=0.000。40例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織中MTA2陽性表達率為32.5%(13/40)，明顯低于伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織MTA2陽性表達率78.3%(47/60)，χ2=21.007，P=0.000；90例未伴遠處轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織中MTA2陽性表達率為58.9%(53/90)與伴遠處轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織中MTA2陽性表達率70.0%(7/10)比較，χ2=0.463，P=0.496；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期結(jié)腸癌組織中MTA2陽性表達率28.6%(12/42)，明顯低于TNM分期Ⅲ～Ⅳ期82.8%(48/58)，χ2=29.803，P=0.000。50例高-中分化結(jié)腸癌患者中，MMP-7陽性表達率為32.0%(16/50)明顯低于低分化結(jié)腸癌中MMP-7陽性表達率74.0%(37/50)，χ2=16.026，P=0.000。40例無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織中MMP-7陽性表達率為25.0%(10/40)，明顯低于伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織MMP-7陽性表達率71.7%(43/60)，χ2=20.982，P=0.000；90例未伴遠處轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織中MMP-7陽性表達率為53.3%(48/90)與伴遠處轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌組織中MMP-7陽性表達率50.0%(5/10)比較，χ2=0.072，P=0.789；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期結(jié)腸癌組織中MMP-7陽性表達率19.0%(8/42)，明顯低于TNM分期Ⅲ～Ⅳ期77.6%(45/58)，χ2=33.511，P=0.000。見表1。

3 討論

結(jié)腸癌是一種常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤疾病，目前尚未完全清楚其發(fā)病機制，隨著人們生活飲食習(xí)慣和結(jié)構(gòu)的變化，結(jié)腸癌發(fā)病率逐漸升高，給人們生命健康造成極大威脅[1]。腫瘤發(fā)生和生長及浸潤、轉(zhuǎn)移是一個較為復(fù)雜的變化過程，與較多因素有關(guān)，因此了解腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移等誘發(fā)因子具有重要價值[2]。MTA2是腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因家族中的一員，其陽性表達率與腫瘤惡變程度等存在緊密聯(lián)系[3]。本文研究結(jié)果顯示，MTA2與結(jié)腸癌分化程度、臨床病理分期等存在緊密聯(lián)系，且在腫瘤侵襲中起著重要作用，該研究結(jié)果與當前各文獻報道結(jié)論相似。但因本文研究樣本數(shù)量有限，為進一步探討MTA2與結(jié)腸癌間的關(guān)系，還有待進一步深入研究以探討其作用機制，為臨床疾病預(yù)測和治療提供參考。

表1 觀察組癌組織中MTA2、MMP-7陽性表達情況 (例，%)

基質(zhì)金屬蛋白酶家族是一類作用于基底膜和細胞外基質(zhì)的肽鏈內(nèi)切酶，其幾乎可降解除多糖以外的細胞外基質(zhì)所有成分[4]。人體細胞遷移和細胞外基質(zhì)重建的動態(tài)平衡主要由基質(zhì)金屬蛋白酶共同來維持，然一旦當其動態(tài)平衡失常則會致腫瘤細胞侵襲和轉(zhuǎn)移；所以了解MMP-7與結(jié)腸癌間的關(guān)系具有重要意義[5]。有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)[6]，MMP-7異常表達與多種腫瘤發(fā)展存在緊密聯(lián)系；有學(xué)者[7]曾對食管癌患者進行研究，研究發(fā)現(xiàn)MMP-7在食管癌中具有較高表達水平，且與患者臨床病理分期存在緊密聯(lián)系。本文研究結(jié)果顯示，結(jié)腸癌組織中MMP-7與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理分期、浸潤程度等存在緊密聯(lián)系，且分化程度越高、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等，患者陽性表達率越高。由此說明通過檢測MMP-7可有助于臨床判斷患者病情程度，為臨床評估患者預(yù)后及制訂治療方案提供有力參考[8]。

綜上所述，結(jié)腸癌組織中MMP-7、MTA2表達水平明顯高于癌旁組織，同時其表達水平與腫瘤臨床分期和分化程度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等存在緊密關(guān)系，所以通過檢測MMP-7、MTA2表達水平可有助于臨床判斷患者預(yù)后，對醫(yī)師制訂治療方案有極大的指導(dǎo)價值。