焦作某醫(yī)院中段尿分離糞腸球菌與屎腸球菌耐藥性分析

任艷利 ，張偉 ，侯豫娜 ，薄濤 ，商安全

(1.焦作市第五人民醫(yī)院檢驗科，河南 焦作 454000；2.同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗科，上海 200065)

腸球菌是人類胃腸道與泌尿道的正常菌群，也是院內(nèi)感染的常見病原菌之一。隨著侵入性體內(nèi)插管、放化療、機(jī)械式通氣呼吸機(jī)、激素類、生物制劑及廣譜抗菌藥物的使用，使得腸球菌尤其是糞腸球菌與屎腸球菌的分離率及耐藥性不斷增加[1]。在細(xì)菌性尿路感染中，糞腸球菌與屎腸球菌的分離率是僅次于大腸埃希菌的致病菌[2]。由于腸球菌細(xì)胞壁厚，耐藥機(jī)制復(fù)雜，且對克林霉素、頭孢菌素等多種藥物天然耐藥，臨床治療可選擇藥物有限[3]。為了解本院中段尿分離糞腸球菌與屎腸球菌耐藥性，對2014年1月至2017年12月間中段尿培養(yǎng)分離出的326株糞腸球菌與屎腸球菌耐藥性進(jìn)行回顧性分析，為經(jīng)驗治療及感染防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌株來源 菌株來源于本院2014年1月至2017年12月門診及住院送檢的中段尿培養(yǎng)分離病原菌，同一患者剔除相同病原菌。

1.2 質(zhì)控菌株 糞腸球菌ATCC29212，屎腸球菌ATCC51299。

1.3 方法 按照 《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）[4]對中段尿標(biāo)本進(jìn)行接種、培養(yǎng)及分離。標(biāo)本留取嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，經(jīng)中段尿定量培養(yǎng)，革蘭陽性菌大于104CFU/ml作為感染病原菌，分離培養(yǎng)出的糞腸球菌與屎腸球菌納入分析數(shù)據(jù)。采用珠海黑馬微生物鑒定產(chǎn)品進(jìn)行細(xì)菌鑒定及藥敏實驗。藥物敏感性試驗依據(jù)美國實驗室臨床標(biāo)準(zhǔn)化委員會（CLSI）2015 版文件進(jìn)行判定[5]。

1.4 數(shù)據(jù)分析 應(yīng)用WHONET 5.6軟件對藥敏數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 糞腸球菌與屎腸球菌的檢出率 2014年1月至2017年12月中段尿培養(yǎng)標(biāo)本共分離出糞腸球菌與屎腸球菌326株，其中糞腸球菌188株，占57.67%；屎腸球菌138株，占42.33%。

2.2 糞腸球菌與屎腸球菌對常用抗菌藥物的藥敏結(jié)果 見表1。

3 討論

來自中段尿分離培養(yǎng)出的326株糞腸球菌與屎腸球菌，糞腸球菌188株，占57.7%，屎腸球菌138株，占42.3%，糞腸球菌分離率高于屎腸球菌，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=15.337，P<0.05），與文獻(xiàn)報道一致[6]。

藥敏結(jié)果顯示，糞腸球菌與屎腸球菌耐藥率差別較大，僅有高濃度慶大霉素和利奈唑胺對兩種腸球菌的耐藥性相近，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05）。糞腸球菌僅對氯霉素和四環(huán)素耐藥性高于屎腸球菌，而屎腸球菌對氨芐西林、紅霉素、青霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、呋喃妥因、利福平耐藥性均高于糞腸球菌，與所報道文獻(xiàn)一致[7]。

表1 糞腸球菌與屎腸球菌對各抗菌藥物耐藥率

糞腸球菌對青霉素和氨芐西林的耐藥率分別為4.8%、2.7%，屎腸球菌對青霉素和氨芐西林的耐藥率分別為 93.5%，92.8%，提示糞腸球菌引起感染時可使用青霉素、氨芐西林經(jīng)驗治療，而屎腸球菌則不適合使用此類藥物，其原因可能由于屎腸球菌青霉素結(jié)合蛋白和青霉素親嗜性減低，對青霉素和氨芐西林的敏感性降低有關(guān)[8]。糞腸球菌和屎腸球菌對呋喃妥因敏感性均較高，可作為泌尿系感染經(jīng)驗治療的首選藥物，但呋喃妥因?qū)δI臟有一定的毒性，應(yīng)謹(jǐn)慎使用[9]。糞腸球菌與屎腸球菌對高濃度慶大霉素耐藥率分別為68.6%和76.1%，可能是由于腸球菌產(chǎn)生的氨基糖苷修飾酶導(dǎo)致其耐藥性強(qiáng)[10]，因此在經(jīng)驗性用藥時，不建議使用高濃度慶大霉素與作用于細(xì)胞壁抗生素聯(lián)合使用。

糞腸球菌與屎腸球菌對環(huán)丙沙星的耐藥率分別為29.8%和88.4%，糞腸球菌與屎腸球菌對左氧氟沙星的耐藥率分別為23.4%和81.9%，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），因此糞腸球菌適宜使用此類抗菌藥物進(jìn)行治療，但因此類藥物可對兒童骨骼產(chǎn)生不良影響，即便藥敏結(jié)果為敏感，也不應(yīng)選用[11]。糞腸球菌與屎腸球菌對紅霉素耐藥率分別為81.4%和 93.5%，兩者耐藥率菌均超過 80%，高耐藥率的原因可能是由于腸球菌erm基因編碼紅霉素甲基化酶表達(dá)，導(dǎo)致紅霉素靶點(diǎn)位置發(fā)生改變[12]。糞腸球菌與屎腸球菌對利奈唑胺的耐藥率分別為1.1%和2.9%，糞腸球菌與屎腸球菌耐藥率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），兩種腸球菌對利奈唑胺耐藥率較文獻(xiàn)報道[13，14]數(shù)據(jù)稍高，屎腸球菌對利奈唑胺耐藥率稍高于2016年中國CHINET細(xì)菌耐藥性監(jiān)測耐藥率[15]，使用χ2檢驗與其報道耐藥數(shù)據(jù)分析，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=38.340，P＜0.05）。腸球菌對利奈唑胺這種新型抗菌藥物耐藥的原因，可能是因為23s rRNA突變、氯霉素－氟甲砜霉素耐藥（cfr)基因?qū)е耓16]，也可能與本院高頻率使用利奈唑胺治療腸球菌感染有關(guān)。糞腸球菌與屎腸球菌未檢出對萬古霉素與替考拉寧耐藥菌株，說明萬古霉素與替考拉寧仍對糞腸球菌與屎腸球菌有著很好的抗菌活性，但國內(nèi)已有耐藥菌株的報道[17]，作為腸球菌感染的最后一道防線，臨床醫(yī)生應(yīng)慎重使用此類藥物，以延緩耐藥菌株的出現(xiàn)。由于屎腸球菌與糞腸球菌對藥物敏感性差異較大，因此要求對菌種準(zhǔn)確鑒定到種，依據(jù)藥敏結(jié)果使用抗生素。

綜上述所，2014年1月至2017年12月中段尿培養(yǎng)標(biāo)本中，糞腸球菌分離率高于屎腸球菌，糞腸球菌多數(shù)藥物耐藥性要低于屎腸球菌，治療腸球菌引起的尿路感染，要求實驗室準(zhǔn)確鑒定到菌種，并依據(jù)抗菌藥物敏感性試驗來作為藥物使用的依據(jù)。檢出的利奈唑胺耐藥糞腸球菌與屎腸球菌，應(yīng)引起臨床醫(yī)生與感控人員的注意，加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性檢測，防止細(xì)菌耐藥性的增加。