氣相色譜法測定蔬菜中代森鋅的殘留量

葉 倩 ，朱富偉 ，黃聰靈 ，唐雪妹 ，趙曉麗 ，萬 凱 *

（1.廣東省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品公共監(jiān)測中心，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質量安全風險評估實驗室（廣州），廣州 510640；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品公共監(jiān)測中心，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質量安全檢測與評價重點實驗室，廣州 510640）

代森鋅為乙撐雙二硫代氨基甲酸鹽（EBDCs）類保護性殺菌劑，用于防治葡萄、油菜、萵苣、煙草、觀賞植物等霜霉病，漿果、蔬菜、觀賞植物等銹病，番茄、馬鈴薯等枯萎病，漿果、橄欖、芹菜等葉斑病，以及柑橘、葡萄炭疽病[1]。EBDCs類農(nóng)藥主要降解產(chǎn)物乙撐硫脲（ethylenethiourea）具有致癌、致畸和致突變效應[2]。EBDCs類農(nóng)藥通常不溶于水和大多數(shù)有機溶劑，其在農(nóng)產(chǎn)品中的殘留量常以酸解產(chǎn)生的CS2量來表達[3]，國內(nèi)外制定的最大殘留限量也以轉化的CS2量計[4-5]。歐盟規(guī)定此類農(nóng)藥的最大殘留限量（MRL）為2～7 mg/kg（以CS2表示）。GB 2763—2016規(guī)定EBDCs類農(nóng)藥在蔬菜、水果、油料、谷物等作物中的最大殘留限量為0.1～10 mg/kg（以CS2計），在啤酒花中的最大殘留限量為30 mg/kg（以CS2計）。

目前關于EBDCs類農(nóng)藥的殘留檢測方法主要有氣相色譜ECD法[6-7]、氣相色譜FPD-S法[8-12]、液相色譜-串聯(lián)質譜法[13-15]、頂空-氣相色譜質譜法[16]等。本研究采用氯化亞錫-鹽酸溶液對樣品進行處理，使用氣相色譜FPD-S方法測定正己烷溶液中CS2的量，進而對樣品中的代森鋅進行換算分析。目前關于菜心、芹菜以及葉用萵苣中EBDCs類農(nóng)藥的殘留檢測方法報道較少。本文建立一種操作簡單，準確度和精密度均符合殘留分析要求的分析方法，為進一步研究復雜蔬菜基質中EBDCs類農(nóng)藥的殘留測定提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

島津GC-2010 plus氣相色譜儀，配置FPD-S檢測器（日本Shimadzu公司）；電熱恒溫振蕩水槽（上海一恒科技有限公司）；MilliQ超純水系統(tǒng)（美國Millipore公司）。

鹽酸（優(yōu)級純）、氯化亞錫（分析純）、抗壞血酸（分析純）、正己烷（色譜純，德國Merck公司）、超純水、尼龍66微孔濾膜（天津津騰實驗設備有限公司）；CS2標準品1 000 mg/L、代森鋅標準品（81.0%，德國Dr.Ehrenstorfer公司）。

1.2 樣品前處理

實驗原理：樣品中的代森鋅在加熱的密閉頂空瓶中遇氯化亞錫-鹽酸溶液，反應生成的CS2氣體被瓶中的正已烷吸收，形成CS2的正已烷溶液，測定有機相中CS2量。用CS2定量代森鋅的含量。

菜心、葉用萵苣和芹菜從市場購買，去除枯黃葉片，組織勻漿機勻漿，-20℃保存?zhèn)溆?。稱取5.00 g樣品于60 mL頂空瓶中，加入0.050 g抗壞血酸、5 mL超純水、20 mL氯化亞錫-鹽酸溶液、5 mL正己烷，迅速蓋緊瓶蓋，置于80℃電熱恒溫振蕩水槽中，水浴反應2 h，每隔15 min，以100次/min的振蕩頻率振蕩1 min。反應后取出冷卻到室溫，取上層正己烷，過尼龍66微孔濾膜，置于樣品瓶中待測。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent DB-1色譜柱（50 m×0.32 mm，1.05 μm)；柱溫：50℃，保持6 min；進樣口溫度：150℃；檢測器溫度：200℃；柱流速：1 mL/min；尾吹：30 mL/min；分流比：5∶1；進樣量：1 μL。

1.4 標樣溶液的配制

準確稱取代森鋅標準品0.012 5 g于500 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成20 mg/L的儲備液，置于-4℃冰箱保存。由于代森鋅在甲醇中溶解度較小，用前超聲溶解2～3 min。

CS2標準品采用說明書標注的相應溶劑進行稀釋溶解并定容，配制成100 mg/L儲備液，置于-4℃冰箱保存。準確移取適量CS2標樣儲備液，用菜心、葉用萵苣和芹菜空白基質梯度稀釋配制成質量濃度為 0.027 5、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00、2.00 mg/L 的CS2標樣工作溶液。

1.5 添加回收率精密度和試驗

稱取空白樣品5.00 g，分別添加質量分數(shù)為0.05、0.50和2.0 mg/kg的代森鋅，渦旋混勻后放置12 h。按照1.2方法進行前處理。每個添加水平重復3次，考察方法回收率和精密度。

2 結果與討論

2.1 轉化率

代森鋅在SnCl2-HCl溶液中酸解生成CS2氣體，CS2氣體采用正己烷吸收，通過測定CS2含量，計算得到代森鋅的殘留量。為評價方法的可靠性，對目標化合物CS2的轉化率進行了研究，其處理方法和樣品前處理過程一致，每個處理重復3次。相同條件下，代森鋅在3種蔬菜基質中的CS2轉化率見表1，轉化率公式如下。

表1 代森鋅在3種蔬菜基質中的CS2轉化率

在相同條件下，代森鋅在不同蔬菜中的CS2轉化率差異較小。當添加質量分數(shù)為0.050 mg/kg時，代森鋅在菜心、芹菜和葉用萵苣3種基質中的CS2轉化率分別為98.2%、96.7%、92.0%。

2.2 方法的線性相關性

采用1.4中配制的系列CS2標樣工作溶液，以CS2峰面積的對數(shù)與相應質量濃度的對數(shù)進行雙對數(shù)線性回歸，結果見表2。CS2在質量濃度為0.027 5～2.0 mg/L時，方法線性關系良好，相關系數(shù)為0.990～0.997。以3倍信噪比（S/N=3）計算得到方法的檢出限（LOD）為0.000 5～0.001 2 mg/kg（以CS2計），以代森鋅最低添加濃度0.050 mg/kg為定量限（LOQ）（以CS2計為0.027 5 mg/kg）。方法的靈敏度可滿足農(nóng)藥殘留檢測的要求。

2.3 回收率與相對標準偏差

分別對3種不同基質進行0.050、0.50、2.0 mg/kg 3個質量分數(shù)的添加回收率試驗。按照1.2方法前處理，1.3方法測定，結果見表3。經(jīng)基質匹配標樣溶液校正后，代森鋅在3種蔬菜中的回收率為80.9%～111.9%，相對標準偏差（RSD）為2.9%～9.7%。該方法準確度和精密度良好，滿足蔬菜殘留分析要求。

表3 方法的回收率及相對標準偏差

3 討論與結論

由于代森鋅不溶于大多數(shù)有機溶劑，試驗中嘗試使用甲醇、丙酮、乙腈稀釋，或與無水硫酸鈉稀釋。使用甲醇、丙酮和乙腈進行稀釋，可觀察到代森鋅不溶于所用有機溶劑，因此需在使用前超聲溶解2～3 min。由于代森鋅標樣和無水硫酸鈉均為固體，兩者混合需渦旋30 min以上，以保證兩者分散均勻。經(jīng)過反復驗證，上述方法對代森鋅的殘留檢測無明顯影響。

CS2是揮發(fā)性氣體，可被正己烷吸收，形成CS2的正己烷溶液。液體進樣與氣體進樣相比，方便靈活，可操作性強。試驗過程中若操作不當也可能造成方法重復性差的問題，因此必須嚴格控制試驗過程中的每個環(huán)節(jié)。試驗過程中總結了一些關鍵操作：1）無論是配制代森鋅固體混合物還是液體標樣溶液，使用前需充分混勻標樣，通常使用渦旋或者超聲進行混勻，以保證均勻性。2）頂空瓶壓蓋正確，以保證試驗過程中的氣密性，試劑的加入順序要保持一致，水浴溫度、水浴加熱時間、振搖時間、冷卻溫度要嚴格控制，且每個樣品保持一致。在試驗過程中必須嚴格按照操作規(guī)程進行，最大限度減小誤差。

本研究建立的氣相色譜分析方法可用于代森鋅在蔬菜基質中的殘留測定，方法前處理簡單，準確度和精密度均符合農(nóng)藥殘留分析要求。同時，該方法適用于EBDCs類殺菌劑如代森錳鋅、代森銨、代森聯(lián)、福美雙等農(nóng)藥的殘留檢測。