老年AMI患者血漿microRNA-30a的表達水平及診斷效能分析

楊曉偉　閆泱錦

【摘要】目的分析老年急性心肌梗死（AMI）患者血漿microRNA-30a的表達水平及診斷效能。方法選取本院65例老年AMI患者為觀察組，另同期選取40例于本院體檢健康的老年人群為對照組。采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法（RT-PCR）對兩組血漿mieroRNA-30a的表達水平進行檢測，并通過繪制受試者工作特征（ROC）曲線分析microRNA-30a在老年AMI患者中的診斷效能，并計算診斷敏感度、特異度及準確性。結(jié)果RT-PCR檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組比較，觀察組血漿microRNA-30a的表達水平顯著上調(diào)（P<0.05）。ROC曲線結(jié)果顯示，microRNA-30a對預測老年AMI的ROC曲線下面積為0.82，其診斷最佳閾值為0.10，約登指數(shù)取得最大值為0.53，此時microRNA-30a的診斷敏感度為83.08%，特異度為70.00%，準確性為78.10%。結(jié)論microRNA-30a在老年AMI患者血漿中的表達水平顯著升高，且其對老年AMI的預測具有一定的臨床診斷效能。

【關(guān)鍵詞】急性心肌梗死;老年;microRNA-30a;診斷效能.

中圖分類號：R542.2+2

文獻標識碼：A

文章編號：1009-816X（2019）06-0528-03

doi：10.3969/j.issn.1009-816x.2019.06.013

急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是因冠狀動脈急性、持續(xù)性缺血缺氧而導致心肌壞死，該病在我國近年來的發(fā)病率及死亡率均逐年增高，并其在歐美發(fā)達國家的死亡率居于各類疾病之首【1，2】。AMI可因冠狀動脈斑塊破裂而促使人體凝血系統(tǒng)激活，使得冠狀動脈緊急閉塞，造成血流受阻及心肌壞死;患者在發(fā)生胸痛、心力衰竭或休克等癥狀后，容易引發(fā)心律失常、心臟驟停及猝死，對患者的生命安全極為不利【3】。AMI仍是目前引起心源性死亡的主要原因之一，據(jù)報道，此類患者在院內(nèi)死亡率仍高達17%【4】。因此，快速、準確、有效診斷AMI對及時挽救患者生命，改善患者預后狀況具有重要意義。已有研究表明，目前超出20個miRNA對AMI具有一定的臨床診斷價值【5】。另有研究報道，microR-NA-30a高表達于先天性心臟病患兒血漿中，且與患兒心功能密切相關(guān)【6】，但有關(guān)其在老年AMI血漿中表達水平及其對AMI診斷效能的研究報道并不多見。為此，本研究采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法，通過檢測老年AMI患者血漿microRNA-30a的表達水平，旨在分析其對老年AMI的診斷效能。

1資料與方法

1.1一般資料：選取本院2017年1月至2018年6月

65例老年AMI患者為觀察組，另同期選取40例在本院體檢健康的老年人群為對照組。入選標準：（1）觀察組均符合AMI的診斷標準【7】;（2年齡≥65歲;（3）觀察組均于AMI相關(guān)癥狀發(fā)生后12h內(nèi)采血;（4）對照組均于本院行常規(guī)體檢，結(jié)果未見異常。排除標準：（1）伴有心腦血管疾病史;（2）伴有肝、腎功能不全;（3）伴有重癥感染、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、自身免疫系統(tǒng)疾病;.（4）伴有精神性疾病，依從性差;（5）臨床資料不全。

1.2檢測方法：采集兩組靜脈血3mL通過miRNeasyRNA isolation試劑盒（美國Qiagen公司）對其血漿總RNA進行提取，嚴格按照試劑盒說明書指示進行操作;采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應法對兩組受試者血漿microRNA-30a的表達水平進行檢測，在實時熒光定量PCR儀（購自美國ABI公司，型號為7500）.上進行檢測，采用2-ACt對microRNA-30a相對表達量進行計算。

1.3統(tǒng)計學處理：將數(shù)據(jù)錄人SPSS23.0版統(tǒng)計學軟.件，計量資料用（x±s）表示并采用t檢驗，計數(shù)資料.的比較則用x2檢驗，通過繪制受試者工作特征（receiver operating characteristie，ROC）曲線分析microRNA-30a在老年AMI患者中的診斷效能，并計算診斷敏感度、特異度及準確性，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1兩組臨床基本資料的比較：兩組性別、年齡及體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）等一般資料的比較，均無統(tǒng)計學意義（均P>0.05），見表1。

2.2兩組血漿microRNA-30a表達水平的比較：RT-PCR檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組患者血漿microRNA-30a的表達水平為（0.17±0.04），對照組健康人群血漿m1-CroRNA-30a的表達水平為（0.09+0.02）。結(jié)果顯示與對照組比較，觀察組患者血漿microRNA-30a的表達水平顯著_上調(diào)（P<0.05）。

2.3血漿microRNA-30a對預測老年AMI的診斷效能：ROC曲線結(jié)果顯示，microRNA-30a對預測老年AMI的ROC曲線下面積為0.82，其診斷最佳閾值為0.10，約登指數(shù)取得最大值為0.53，此時microRNA-30a的診斷敏感度為83.08%，特異度為70.00%，準確性為78.10%，見圖1。

3討論

AMI是臨床常見的心肌壞死性疾病之一，是因冠狀動脈血供明顯減少或中斷而出現(xiàn)急性、持續(xù)性、嚴重缺血缺氧而致，使得心肌細胞出現(xiàn)不可逆性壞死【8】。該病具有起病急、死亡率高等特點，仍是目前導致患者死亡的一種主要疾病。心肌肌鈣蛋白等多種心肌相關(guān)酶是目前臨床診斷AMI的主要參數(shù)，但在各種心臟性疾病中，肌鈣蛋白的表達均可出現(xiàn)不同程度的差異，使之在臨床中的誤診率較高【9】，使其在臨床應用中存在一定局限性。因此，探索一種更為有效、準確的血清標志物以提高對AMI的診斷效能顯得尤為重要。

microRNA為一段非編碼小分子RNA單鏈，其具有高度保守性，是由21～25個核糖核苷酸組成，可通過干擾mRNA的翻譯及穩(wěn)定性而起到調(diào)控多細胞生物體中基因表達轉(zhuǎn)錄的作用，并且其在疾病發(fā)生、發(fā)展的病理過程及生物進化等方面起到重要的調(diào)控作用【10】。microRNA可特異性結(jié)合靶信使RNA，通過阻滯或降解其翻譯而在人體內(nèi)各種生理病理過程（如細胞增殖、分化、凋亡等方面）中起到重要作用【11】。同時，內(nèi)源性microRNA可抵抗核糖核酸酶的降解，即便在不同室溫、凍融條件或pH值等各種情況下仍可穩(wěn)定分布于血清中，其含量變化極小，因此有利于臨床檢測。因microRNA在血液中具有良好的穩(wěn)定性，且在不同病理生理狀態(tài)下的表達存在明顯變化，故此可作為理想的血清學生物標志物【12】。已有研究指出，microRNA與多種心血管疾?。ㄈ缧穆墒С！⑿牧λソ?或心肌梗死等）均存在一定關(guān)系【13】。另有研究顯示【14】，microRNA通過調(diào)控其靶基因表達而起到調(diào)節(jié)心肌細胞壞死與凋亡、改善心肌功能的重要作用，同時其在AMI的發(fā)生和發(fā)展的病理過程中起到重要作用，其在心肌梗死患者血漿中的水平顯著上升，可作為臨床診斷AMI的潛在血清標志物。另有研究指出，microRNA30a高表達于心力衰竭患者中，同時其與先天性心臟病患兒的心功能密切相關(guān)，可作為臨床.診斷先天性心臟病的一種潛在外周血生物標志物【15】。上述研究提示，microRNA30a異常表達與機體血清中，可能是臨床診斷老年AMI的潛在血清學標志物。

本研究結(jié)果表明，microRNA30a在老年AMI患者血漿中的表達水平顯著升高。此外，microRNA-30a對老年AMI的預測具有一定的臨床診斷效能，因此可作為臨床診斷老年AMI的潛在生物標志物。但在本文中未涉及與其它micRNA診斷心血管疾病的比較。

參考文獻

【1】Szczepanski A， Huang J， Baer T， et al. ST-segment elevation myocardialinfarction in China from 2001 to 2011 （ the China PEACERetrospective A-cute Myocardial Infarction Study ）： a retrospective analysis of hospital data【J】.Lancet， 2015， 385（ 9966 ）：441-451.

【2】Rentrop KP， Blanke H， Karsch KR， et al. Acute myocardial infarction：intracoronary application of nitroglycerin and streptokinase【J】.Clin Cardi-ol，2015，2（5 ）：354-363.

【3】任東，劉發(fā)俊.ADAMTS-13與hs-CRP水平在急性心肌梗死患者經(jīng)皮冠狀動脈介入術(shù)后無復流現(xiàn)象的相關(guān)性研究【J】.心腦血管病防治，2018，18（1）：7-9.

【4】盛瑾，劉文嫻，曹佳寧，等.主動脈內(nèi)球囊反搏輔助的急性心肌梗死院內(nèi)死亡患者臨床特征分析【J】.心肺血管病雜志，2016，35（3 ）：175-179.

【5】曹彬，郭仁維.microRNA在早期診斷急性心肌梗死中的研究進展【J】.中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2017，15（1）：44-47.

【6】Mukai N，Nakayama Y，Murakami S，et al. Potential contribution of erythrocyte microRNA to secondary erythrocytosis and thrombocytopenia in con-genital heart disease【J】.Pediatr Res，2018 ，83（4 ）：866-873.

【7】中華醫(yī)學會心血管病學分會.急性心肌梗死診斷和治療指南【J】.中華心血管病雜志，2001 ，29（12）：710-725.

【8】王喜福，楊鐸，曾玉杰，等.青年與老年急性心肌梗死患者血漿炎性因子的對比分析【J】.心肺血管病雜志，2015，34（6）：441-443.

【9】ChinaPEACE研究協(xié)作組.2001～2011年東部農(nóng)村地區(qū)醫(yī)院急性心肌梗死心肌標志物檢測的變化趨勢-ChinaPEACE回顧性急性心肌梗死研究結(jié)果【J】.中國循環(huán)雜志，2017，32（6）：272-284.

【10】Kazimierczyk E，Eljaszewicz A，Zembko P，et al. The relationships among monocyte subsets，miRNAs and inflammatory cytokines in patientswith acute myocardial infarction【J】. Pharmacol Rep，2018，71（1 ）：73-81.

【11】徐遠勝，王寧夫.急性心肌梗死的生物標志物研究進展【J】.心腦血管病防治，2017，17（4）：297-299，314.

【12】唐宇寧，彭瑜，張鉦.微小核糖核酸在急性心肌梗死診斷和治療中作用的研究進展【J】.中國循環(huán)雜志，2015，18（10 ）：1018-1020.

【13】Maciejak A，Kostarska-Srokosz E，Gierlak W，et al. Circulating miR30a-5p as a prognostic biomarker of left ventricular dysfunction after acutemyocardial infarction【J】. Sci Rep，2018，8（1 ）：9883.

【14】Cao W，Guo Q，Zhang T，et al. Prognostic value of microRNAs in acutemyocardial infarction：A systematic review and meta-analysisL【J】. Int JCardiol ，2015，189（1 ）：79-84.

【15】Dong Y，Liu C，Zhao Y，et al. Role of noncoding RNAs in regulation ofcardiac cell death and cardiovascular diseases【J】.Cell Mol Life Sci，2018，75（2 ）：291-300.

（收稿日期：2019-2-25 ）