葛枳口腔崩解片的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)

毛跟年, 胡 媛, 何亞娟, 侯景龍, 楊文娟

(陜西科技大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院, 陜西 西安 710021)

0 引言

我國(guó)酒文化歷史悠久，近年隨著人們生活水平的提高，飲酒過(guò)度較為常見(jiàn)，醉酒對(duì)人體的神經(jīng)和消化系統(tǒng)產(chǎn)生損傷，重則會(huì)導(dǎo)致肝硬化，肝功能衰竭等[1]疾病，因此，解酒產(chǎn)品一直被飲酒人士所重視.葛根、枳椇子是我國(guó)傳統(tǒng)用于解酒保肝的藥食兩用中藥[2,3].目前，我國(guó)已有葛枳組方的解酒保肝產(chǎn)品及相關(guān)制備工藝及解酒保肝作用研究[4,5].但市場(chǎng)上多數(shù)解酒醒酒產(chǎn)品是以固態(tài)或液態(tài)形式通過(guò)口服進(jìn)入消化道，使解酒物質(zhì)釋放、吸收并達(dá)到解酒保肝的目的，而且是在人們清醒狀態(tài)下或者主動(dòng)配合醒酒狀態(tài)下服用，如果已經(jīng)進(jìn)入酒醉狀態(tài)，自主的醒酒過(guò)程相對(duì)較為困難.

口腔崩解片服用時(shí)無(wú)需吞咽，無(wú)需用水送服，僅用唾液中少量的水即可崩解，并且在食道中無(wú)滯留現(xiàn)象[6].若將葛枳解酒藥物制成口腔崩解片，會(huì)非常適合醉酒等吞咽困難人群的使用[7].口腔崩解片既要具有一定的片劑硬度，又要求快速崩解，因此，在片劑成型設(shè)計(jì)時(shí)有一定的特點(diǎn)和要求.為解決目前市場(chǎng)上解酒產(chǎn)品的口服局限性，本研究以葛根、枳椇子等藥材為原料，對(duì)葛枳口腔崩解片的處方進(jìn)行考察，使其在口腔快速崩解，利用人們自主吞咽功能服用，進(jìn)而達(dá)到解酒保肝的效果.將口腔崩解片這種新劑型應(yīng)用于葛枳解酒保肝產(chǎn)品研究，不僅拓寬了口腔崩解片的應(yīng)用領(lǐng)域，而且大大提高了飲酒人群的服藥順應(yīng)性，避免了不必要的危害.

本研究按照中醫(yī)藥理論“君臣佐使”配伍規(guī)律，以葛根、枳椇子、枸杞、山楂為主藥，處方中君藥葛根的有效成分葛根素能夠減輕脂質(zhì)過(guò)氧化對(duì)細(xì)胞損害、解除血管痙攣、降低血液黏滯性，對(duì)急、慢性酒精中毒有保護(hù)作用，且一定程度上可抑制酒精導(dǎo)致的肝纖維化[8.9]；臣藥枳椇子中黃酮類(lèi)物質(zhì)具有抗炎、抗菌、抗病毒及較強(qiáng)的保肝作用[10]，佐藥枸杞、山楂為藥食同源中藥，能夠保肝、助消化、調(diào)節(jié)免疫.四藥配伍恰當(dāng)，結(jié)合口腔崩解片的制劑形式，使解酒保肝活性物質(zhì)快速充分釋放，以期達(dá)到有效解酒保肝的目的.

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 主要材料

葛根、枳椇子、山楂、枸杞，西安市鹿鳴飲片廠(chǎng)；葛根素標(biāo)準(zhǔn)品，中國(guó)食品藥品檢定研究院；微晶纖維素(MCC)、低取代羥丙纖維素(L-HPC)，安徽山河藥用輔料有限公司；甘露醇，明月海藻集團(tuán)；乳糖，鎮(zhèn)江市康復(fù)生物工程有限公司；檸檬酸，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；碳酸氫鈉，天津市天力化學(xué)試劑有限公司.以上試劑均為分析純.

甲醇,色譜純,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司.

1.1.2 主要儀器

TPD單沖壓片機(jī) 上海天祥健臺(tái)機(jī)械有限公司；LB-2D型崩解時(shí)限測(cè)定儀 上海南海藥檢儀器廠(chǎng)；RCZ-8A智能藥物溶出儀 天津大學(xué)精密儀器廠(chǎng)；Agilent 1200高效液相色譜儀 美國(guó)安捷倫科技公司.

1.2 方法

1.2.1 葛枳浸膏的制備

按照主藥處方量稱(chēng)取葛根、枳椇子、山楂、枸杞，粉碎過(guò)篩，以10倍量60%乙醇回流提取1 h，提取2次，提取液合并，濃縮，干燥即得主藥葛枳浸膏.

1.2.2 葛枳口腔崩解片制備方法

采用濕法制粒法制備，將主藥浸膏、崩解劑、填充劑、發(fā)泡劑混合均勻，50%乙醇為粘合劑，18目標(biāo)準(zhǔn)篩制粒，濕顆粒65 ℃干燥30 min，16目標(biāo)準(zhǔn)篩整粒，加入潤(rùn)滑劑、矯味劑等混合均勻，壓片，片重0.3 g，片劑直徑5 mm，硬度2.5～3.5 kg.

1.2.3 崩解時(shí)限測(cè)定方法

葛枳口腔口崩片的工藝考察指標(biāo)為崩解時(shí)限.按照2015年版《中國(guó)藥典》(四部)口崩片的崩解時(shí)限檢查法[11,12]要求進(jìn)行測(cè)定.測(cè)定方法：取葛枳口腔口崩片12片放入崩解儀吊籃，于37 ℃水溫下觀測(cè)片劑從接觸水面開(kāi)始至顆粒完全通過(guò)篩網(wǎng)所需要的時(shí)間，記錄平均崩解時(shí)間.

1.2.4 基礎(chǔ)處方的確定

根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)及文獻(xiàn)來(lái)設(shè)定葛枳口腔崩解片的基礎(chǔ)處方.處方各組成用量為：崩解劑(MCC、L-HPC)30%，填充劑(甘露醇、乳糖)46%，發(fā)泡劑(檸檬酸、碳酸氫鈉)3%，潤(rùn)滑劑(硬脂酸鎂)0.3%，矯味劑(阿斯巴甜)0.7%，主藥(葛枳浸膏)20%.

1.2.5 崩解劑的確定

(1) 崩解劑組成的確定

確定崩解劑種類(lèi)為MCC與L-HPC，設(shè)置MCC與L-HPC的比例為7∶1、8∶1、9∶1、10∶1、11∶1，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測(cè)定崩解時(shí)限，確定最佳崩解劑組成.

(2)崩解劑用量的確定

設(shè)置崩解劑用量為30%、35%、40%、45%、50%，填充劑用量相應(yīng)調(diào)整，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測(cè)定崩解時(shí)限，確定最佳崩解劑用量.

1.2.6 填充劑組成的確定

確定填充劑為甘露醇和乳糖，設(shè)置甘露醇和乳糖的比例為0.5∶1、1∶1、1.5∶1、2∶1、3∶1，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測(cè)定崩解時(shí)限，確定最佳填充劑組成.

1.2.7 主藥用量的確定

設(shè)置主藥浸膏添加量為10%、15%、20%、25%、30%，填充劑相應(yīng)調(diào)整，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測(cè)定崩解時(shí)限，確定最佳主藥添加量.

1.2.8 正交試驗(yàn)優(yōu)化處方

崩解劑和填充劑是口腔崩解片的重要輔料，對(duì)口腔崩解片的崩解時(shí)限具有顯著影響，因此在主藥添加量確定的基礎(chǔ)上，采用L9(34)正交表對(duì)崩解劑組成、崩解劑用量及填充劑組成3因素進(jìn)行考察，因素和水平如表1所示.

表1 因素水平表

1.2.9 葛枳口腔崩解片中葛根素含量測(cè)定

(1) 色譜條件及線(xiàn)性關(guān)系考察

色譜條件[13]：WatersC18柱(250 nm×4.6 mm，5μm)；流動(dòng)相為甲醇-水(35∶65)，流速1 mL/min，柱溫25 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)250 nm，進(jìn)樣量20μL.精密稱(chēng)取葛根素對(duì)照品10.0 mg，30%乙醇溶解制得0.2 mg/mL的對(duì)照品溶液，分別取0.1、0.5、1.6、2.5、3.2 mL置于10 mL量瓶中，加30%乙醇至刻度，搖勻，0.22μm過(guò)濾，取續(xù)濾液注入色譜儀，測(cè)定色譜峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，葛根素濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，并計(jì)算回歸方程.

(2)供試品溶液的制備

取葛枳口腔崩解片10片，粉碎過(guò)80目篩，精密稱(chēng)取6.0 g，30%乙醇超聲，定容至100 mL，取2 mL至5 mL量瓶中，定容至刻度，0.22μm過(guò)濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液.

(3)陰性樣品溶液的制備

按處方組成，取除葛根外的其他藥材，按照葛枳口腔崩解片制備工藝要求，制備不含葛根的陰性口腔崩解片，按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法制成陰性樣品溶液.

1.2.10 葛枳口腔崩解片中葛根素溶出度測(cè)定

取葛根口腔崩解片2片，照溶出度測(cè)定法[12]，以蒸餾水900 mL為介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r·min-1，分別于2 min、5 min、10 min、20 min、30 min取樣5 mL(同時(shí)補(bǔ)充同溫蒸餾水5 mL)，0.22 m過(guò)濾，精密量取濾液20μL進(jìn)行葛根素含量測(cè)定，計(jì)算溶出度，繪制溶出度曲線(xiàn).

2 結(jié)果與討論

2.1 崩解劑的確定

口腔崩解片最重要的輔料為崩解劑.常用崩解劑有MCC和L-HPC,MCC具有良好的流動(dòng)性和可壓性，可用于直接壓片，但用量過(guò)多會(huì)引起砂礫感[14]，因此常與L-HPC合用改善其性質(zhì)[15].

2.1.1 崩解劑組成的確定

將崩解劑按不同組成加入，結(jié)果如圖1所示，當(dāng) MCC與L-HPC的比例為8∶1時(shí)崩解時(shí)間為17.91 s，與其他崩解劑組成相比，崩解時(shí)間最短，因此崩解劑組成采用MCC∶L-HPC比例為8∶1.

圖1 崩解劑組成對(duì)崩解時(shí)限的影響

2.1.2 崩解劑用量的確定

將崩解劑按照不同用量加入，結(jié)果如圖2所示，在崩解劑用量為45%和50%時(shí)，崩解時(shí)間較短，為10.76 s和10.32 s，但用量為50%時(shí)，口腔崩解片成型性及口感較差，硬度降低，沙粒感明顯，考慮到人體順應(yīng)性，因此選擇崩解劑用量45%為最佳用量.

圖2 不同用量崩解劑對(duì)崩解時(shí)限的影響

2.2 填充劑的確定

填充劑是口腔崩解片的主要輔料之一，常用填充劑有甘露醇和乳糖.甘露醇水溶性好，口感清涼，但流動(dòng)性差，將流動(dòng)性好的乳糖與其合用，明顯能夠改善流動(dòng)性[16,17]，進(jìn)而制備口感佳、粉體流動(dòng)性好的口腔崩解片[18].本實(shí)驗(yàn)將填充劑按不同組成加入，結(jié)果如圖3所示，甘露醇與乳糖的比例為1.5∶1時(shí)，崩解時(shí)間最短為7.95 s，相對(duì)于其他比例所用的崩解時(shí)間最短，因此選擇1.5∶1為甘露醇與乳糖的最佳比例.

圖3 不同組成比例填充劑對(duì)崩解時(shí)限的影響

2.3 主藥添加量的確定

主藥按一定量加入，結(jié)果如圖4所示，當(dāng)添加量在25%以下時(shí)，制粒容易，所制顆粒均勻，具有較理想的流動(dòng)性，片劑成型性好，硬度能夠達(dá)到要求，崩解時(shí)限較短.隨著主藥添加量的增加，崩解時(shí)限隨之增加，當(dāng)添加量達(dá)到30%時(shí)，崩解時(shí)限超過(guò)了60 s，其原因是中藥浸膏成分復(fù)雜，粘性較大，影響了顆粒崩解，此時(shí)制粒困難，片劑無(wú)法成型，因此，不予考慮30%以上的添加量.綜合片劑成型性、崩解時(shí)限及藥物藥效的要求，擬定主藥添加量為20%.

圖4 不同添加量主藥對(duì)崩解時(shí)限的影響

2.4 正交試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，影響因素主次順序?yàn)锽>A>C，其中最主要影響因素為崩解劑用量.由直觀分析及正交試驗(yàn)結(jié)果可知最佳處方組合為A1B2C2，即崩解劑MCC∶L-HPC為9∶1，用量為處方量45%，填充劑甘露醇：乳糖為1.5∶1，在最優(yōu)處方組合下，葛枳口腔崩解片的崩解時(shí)限最短，在30 s內(nèi)崩解.

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析表

經(jīng)正交試驗(yàn)優(yōu)化，確定葛枳口腔崩解片的最佳處方為：主藥浸膏用量20%、崩解劑45%(MCC∶L-HPC 9∶1)、填充劑31%(甘露醇∶乳糖1.5∶1)、發(fā)泡劑3%(檸檬酸∶碳酸氫鈉1∶1)、潤(rùn)滑劑0.3%(硬脂酸鎂)、矯味劑0.7%(阿斯巴甜).

采用濕法制粒法壓片制得葛枳口腔崩解片色澤均勻，大小均一，表面光滑，外觀良好.

2.5 葛根素含量測(cè)定結(jié)果

2.5.1 線(xiàn)性關(guān)系考察結(jié)果

線(xiàn)性關(guān)系考察結(jié)果如圖5所示，擬合回歸方程Y=92 062X+94.972,R2=0.999 2，表明葛根素在2～64μg/mL內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好.

圖5 葛根素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

2.5.2 供試品及陰性樣品測(cè)定結(jié)果

如圖6所示，葛根素對(duì)照品保留時(shí)間為5.088 min，葛枳口腔崩解片在5.036 min出現(xiàn)明顯色譜峰,且與相鄰峰分離效果較好，而不含葛根的陰性樣品在相應(yīng)位置處無(wú)葛根素色譜峰，表明除葛根外其他藥材及輔料對(duì)測(cè)定無(wú)干擾.

(a)葛根素對(duì)照品HPLC測(cè)定結(jié)果

(b)對(duì)照品溶液HPLC測(cè)定結(jié)果

(c)陰性樣品溶液HPLC測(cè)定結(jié)果圖6 HPLC測(cè)定結(jié)果

2.5.3 葛根素含量測(cè)定結(jié)果

取10片葛枳口腔崩解片，按照供試品溶液項(xiàng)下測(cè)定方法進(jìn)行測(cè)定.由測(cè)定結(jié)果計(jì)算可知，平均每片口崩片含葛根素1.41 mg.

2.6 葛根素溶出度測(cè)定結(jié)果

對(duì)藥物溶出度的考察能夠評(píng)價(jià)口腔崩解片的制劑質(zhì)量[19]，所以本實(shí)驗(yàn)采用葛根素溶出度測(cè)定方法進(jìn)行了葛枳口腔崩解片的質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果如圖7所示，葛枳口腔崩解片中葛根素在5 min溶出度達(dá)到71.55%，20 min基本釋放完全，葛根素溶出度符合要求.

圖7 葛根素溶出度結(jié)果

3 結(jié)論

本研究通過(guò)單因素及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)崩解劑組成及用量、填充劑組成、主藥添加量進(jìn)行考察，優(yōu)選出葛枳口腔崩解片的最佳處方：主藥浸膏6g、微晶纖維素(MCC)12.15 g、低取代羥丙纖維素(L-HPC)1.35 g、甘露醇5.58 g、乳糖3.72 g、檸檬酸0.3 g、NaHCO30.3 g、硬脂酸鎂0.09 g、阿斯巴甜0.21 g，制成100片，制得葛枳口腔崩解片硬度2.5～3.5 kg，外觀良好，30 s內(nèi)崩解，20 min基本溶出完全，平均每片含葛根素1.41 mg，符合要求.葛枳口腔崩解片的制備為醉酒人群提供了一種簡(jiǎn)單易服的新型解酒保肝產(chǎn)品.