彭燕群,徐國琴,翁錫全,藍道忠
1 廣州體育學院運動生物化學重點實驗室(廣東廣州 510500); 2 江西工業(yè)工程職業(yè)技術學院(江西萍鄉(xiāng) 337000)
枸杞子是茄科落葉小灌木——枸杞的成熟果實,具有滋陰補血,益精明目之功效[1]。研究證明枸杞子的有效成分為枸杞多糖,具有提高免疫、抗氧化、抗疲勞等作用[2-4]。枸杞汁,是用枸杞鮮果為原料經(jīng)過物理方法如壓榨、離心、萃取等得到的汁液產(chǎn)品,一般分為果肉飲料、果漿、純枸杞汁、枸杞飲料等類型。其中純枸杞汁為新型零添加、非濃縮還原枸杞果汁,充分保留了枸杞鮮果的主要功能成分及營養(yǎng)要素[5]。研究表明,青海枸杞有相對多量的多糖和黃酮類物質(zhì),具有豐富的營養(yǎng)價值[6],且目前純枸杞汁對人體免疫功能影響的研究報道較少。因此,本研究采用產(chǎn)自青海枸杞制成的果汁,于2014年10月至2015年2月對31~65歲成年男性進行飲用試驗觀察,以探討純枸杞汁對不同年齡階段成年男性免疫功能的影響,為飲用純枸杞汁增強成年男性免疫保健效果提供依據(jù)。
1.1 一般資料 招募31~65歲成年男性,身體健康,無明顯心、腦、血液疾病,并排除近期存在感染性疾病、免疫性疾病患者,最終確定40例為研究對象,并按年齡分為2個年齡組,其中31~40歲組有18例,41~65歲組有22例,受試者均已婚,有配偶,其身高、體重、體質(zhì)指數(shù)(BMI)等基本情況見表1。31~40歲組體重和BMI均高于41~65歲組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。實驗前受試者均了解實驗內(nèi)容,承諾嚴格按照實驗要求進行,并簽署知情同意書。
組別31~40歲組(n=18)41~65歲組(n=22)身高(cm)172.76±4.85169.90±5.70體重(kg)75.82±8.7865.79±8.53?BMI(kg/m2)25.37±2.4622.85±3.20?
*與31~40歲組比較P<0.05
1.2 材料與方法 實驗中純枸杞汁由新鮮采摘的枸杞經(jīng)清洗、紅外消毒后勻漿而成,為零添加枸杞果汁。實驗期間受試者每天睡覺前飲用純枸杞汁100 mL,持續(xù)飲用32 d。受試者在實驗開始日和實驗結束日晨7:30-8:30取肘靜脈血,其中抗凝管收集全血2 mL用于T淋巴細胞亞群和自然殺傷細胞測試,非抗凝管收集全血2 mL后分離血清,用于血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的測試。
1.3 觀察指標測試方法 流式細胞法測試全血T淋巴細胞亞群輔助性T細胞(Th細胞,CD3+、CD4+)和抑制性T細胞(TS細胞,CD3+、CD8+)的、自然殺傷細胞(NK細胞,CD3+、CD16+、CD56+),并計算飲用枸杞汁后各免疫指標的增加值;免疫比濁法測試血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM的含量。
2.1 飲用純枸杞汁對成年男性T淋巴細胞亞群變化的影響 飲用純枸杞汁前,41~65歲組成年男性Th細胞顯著低于31~40歲組(P<0.05)。飲用純枸杞汁后,不同年齡組成年男性Th細胞均有所升高,尤其是41~65歲年齡組Th細胞在飲用枸杞汁后增加尤其明顯,其飲用前后的增加值顯著性高于31~40歲年齡組(P<0.05)。飲用純枸杞汁前后,不同年齡組成年男性TS細胞和Th細胞/TS細胞比值的變化均差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。
組別31~40歲組41~65歲組飲用前飲用后增加值飲用前飲用后增加值Th細胞(%)56.59±8.91 57.17±9.200.58±0.2746.64±16.40?51.08±10.934.44±1.89?TS細胞(%)33.36±7.2434.78±6.690.42±0.3838.36±15.4037.75±11.34-0.21±0.13Th細胞/TS細胞1.81±0.631.75±0.600.06±0.041.50±0.941.51±0.670.02±0.01
*與31~40歲組比較P<0.05
2.2 飲用純枸杞汁對成年男性NK細胞變化的影響 飲用純枸杞汁后,不同年齡組成年男性NK細胞均有所增加,且41~65歲組NK細胞的增加比例較大,各年齡組成年男性在飲用枸杞汁后NK細胞數(shù)量與飲用前相比較均差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),但41~65歲組成年男性在飲用枸杞汁后NK細胞的增加值顯著高于31~40歲組(P<0.05)。見表3。
2.3 飲用純枸杞汁對成年男性血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM變化的影響 飲用純枸杞汁后,不同年齡組成年男性血清免疫球蛋白IgA、IgG均有所增加,IgM稍有降低,但血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM在服用枸杞汁前后的變化差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表4。
組別31~40歲組(n=18)41~65歲組(n=22)飲用前2.48±1.102.49±1.29飲用后3.19±1.013.98±1.72增加值0.71±0.161.50±0.69?
*與31~40歲組比較P<0.05
組別31~40歲組41~65歲組飲用前飲用后飲用前飲用后IgA2.59±1.202.99±1.982.12±0.672.31±0.97IgG9.00±1.779.95±1.618.94±2.169.46±2.29IgM1.29±0.361.19±0.281.23±0.261.10±0.37
人體在增齡過程中各組織器官均會產(chǎn)生一定的衰退,免疫系統(tǒng)是較早地產(chǎn)生衰老的組織結構改變的系統(tǒng)之一,主要表現(xiàn)在T、B 細胞數(shù)量及抗原受體的減少、自身抗體的產(chǎn)生和免疫耐受性的障礙等方面[7]。人體中樞免疫器官胸腺在性成熟期就開始退化,到60歲時只剩15%,因而由胸腺產(chǎn)生的T 淋巴細胞更容易因衰老而受到影響,繼而降低細胞吞噬及分泌干擾素的能力[8]。本研究中也證實,41~65歲組成年男性的免疫機能與31~40歲組相比較已有顯著性降低,主要表現(xiàn)在Th細胞有明顯地下降,免疫球蛋白IgA隨著年齡的增加也有降低的趨勢,直接影響到機體抗感染的能力。
隨著人民生活水平的提高以及保健意識的提高,中老年人在注重體育鍛煉的同時也開始關注營養(yǎng)保健,各種營養(yǎng)保健品也應運而生。祖國傳統(tǒng)醫(yī)學研究表明,增齡過程中免疫功能衰退大多是由腎虛和脾虛引起的,滋補虛衰類中藥是目前抗衰老及增強免疫能力的重要考慮內(nèi)容[9],其中枸杞是廣受中老年人喜愛的營養(yǎng)保健食品。枸杞具有滋陰補血,益精明目等功效,許多研究都表明枸杞對機體免疫機能都有很好的調(diào)節(jié)作用[4,10]。實驗研究[11]發(fā)現(xiàn),枸杞中的有效成份可有效提高機體的非特異免疫功能和特異免疫功能,可明顯促進T淋巴細胞的增殖,但其作用并不隨劑量的增加而增強[12]。枸杞中的重要成份枸杞多糖(LBP)可發(fā)揮各種免疫調(diào)節(jié)功能,包括T細胞和B細胞的活化,LBP不僅能激活Th細胞并誘導白細胞介素-21分泌,還可誘導Tfh細胞的產(chǎn)生[13];還可增加總T淋巴細胞及其亞群百分比和淋巴細胞轉(zhuǎn)化率,提高人外周血單核細胞、白細胞介素2和腫瘤壞死因子-α基因的表達水平[14]。
成年人隨著年齡的增長,胸腺的退化,機體的免疫機能也呈下降趨勢[15-16],枸杞在預防增齡過程中的免疫機能下降方面具有一定的效果。研究表明,無論是枸杞補充[17]還是枸杞重要成份的飲食攝入[18],都可提高老年大鼠免疫機能的適應性和免疫反應能力,增加CD4+T細胞和NK細胞的數(shù)量,提高機體白細胞介素-4的含量。本研究發(fā)現(xiàn),41~65歲組Th細胞顯著低于31~40歲組,這和前人的研究是一致的,增齡過程中存在免疫機能下降的現(xiàn)象,但不同年齡組成年男性飲用純枸杞汁后,雖不同年齡組Th細胞均有所升高,但41~65歲組Th細胞的增加值顯著性高于31~40歲組;不同年齡組成年男性NK細胞數(shù)量雖在飲用枸杞汁前無差異,但在飲用枸杞汁后也呈現(xiàn)這種現(xiàn)象,即41~65歲組NK細胞的增加值顯著性高于31~40歲組。表明飲用純枸杞汁對免疫機能趨向低下的41~65歲組的免疫機能增強效果明顯優(yōu)于免疫機能正常的31~40歲組,其原因可能為免疫機能在正常機體處于一種穩(wěn)定狀態(tài),免疫能力太高和太低均不利于身體健康,飲用純枸杞汁不會干擾機體正常的免疫機能穩(wěn)定狀態(tài),而對于免疫機能偏低者,飲用枸杞汁就能達到有效的免疫力正向調(diào)節(jié)作用。
血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM 也是增齡過程中評價免疫機能的重要指標,研究顯示老年大鼠機體的血清 IgG、IgA水平呈顯著下降[19]。給某有色金屬冶煉廠接觸氟化鈉的28名工人服用復合枸杞多糖1周后,其血清免疫球蛋白 IgG、IgA、IgM 的含量[20]顯著高于服用前,表明復合枸杞多糖對接觸氟化物的工人具有增強免疫功能的作用。本研究中不同年齡組成年男性飲用純枸杞汁后,血清免疫球蛋白IgA、IgG含量雖有所增加,但無論是哪一年齡組,其增加均差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
在本研究中發(fā)現(xiàn)無論是41~65歲組還是31~40歲組成年男性,其飲用純枸杞汁后許多免疫機能指標與飲用前相比較都有提高,但和飲用前相比較其差異并無統(tǒng)計學意義,其原因可能與本研究中所使用的枸杞汁中有效物質(zhì)的劑量以及使用時間長短有關,前人的研究大多使用的是枸杞多糖[11,13-14,20-21],且使用劑量也比較大(20 mg/kg以上),而本實驗所使用是100%的枸杞汁,其所含有的枸杞多糖相對劑量較小,且研究時限僅32 d。
綜上所述,飲用純枸杞汁對成年男性機體的免疫功能有一定的增強作用,尤其是年齡較大、免疫機能有不同程度降低的41~65歲組,無論是Th細胞還是NK細胞數(shù)量的增加,枸杞汁均有較好的正向調(diào)節(jié)作用,而對免疫機能較為正常的年輕人(31~40歲)免疫調(diào)節(jié)作用不明顯。因此,是否可以通過飲用純枸杞汁提高人體的免疫力仍需要通過大樣本和長時間的實驗觀察去進一步驗證。