NaCl脅迫下3種檉柳屬植物生長、鹽離子分布和SOS1基因相對表達量的比較

劉詠梅， 程 聰， 姜 黎， 於丙軍

(1. 南京農(nóng)業(yè)大學生命科學學院， 江蘇 南京 210095； 2. 中國科學院新疆生態(tài)與地理研究所， 新疆 烏魯木齊 830011)

全世界的檉柳屬(TamarixLinn.)植物約90種，中國的檉柳屬植物有多枝檉柳(T.ramosissimaLedeb.)、多花檉柳(T.hohenackeriBunge)、剛毛檉柳(T.hispidaWilld.)、甘肅檉柳(T.gansuensisH. Z. Zhang)、長穗檉柳(T.elongataLedeb.)、細穗檉柳(T.leptostachysBunge)和短穗檉柳(T.laxaWilld.)等，共18種1變種[1]。檉柳屬植物是中國干旱區(qū)和半干旱區(qū)的沙漠荒地和鹽堿化土地廣泛分布的一類重要落葉灌木或小喬木，在鹽生荒漠植被類型中占有主要地位[2]，該屬植物屬于泌鹽鹽生植物，耐鹽能力極強，例如，檉柳(T.chinensisLour.)能夠在含鹽量3.5%(約600 mmol·L-1NaCl)的土壤中生存[3]。

檉柳屬植物主要依靠根避鹽，莖和葉細胞內無機離子或有機小分子親和性溶質參與滲透調節(jié)，以及嫩枝或葉鹽腺泌鹽3種機制來適應鹽漬環(huán)境[4]。目前，關于檉柳屬植物耐鹽性的研究大多集中在鹽腺的發(fā)生及泌鹽機制上。檉柳屬植物的鹽腺主要位于嫩枝或葉的表面，每個鹽腺由1個原表皮細胞發(fā)育而成，包括2個液泡化的收集細胞和6個細胞質濃稠的分泌細胞[5-7]。近年來，有關泌鹽鹽生植物耐鹽機制的研究已深入分子水平[8-10]。SOS1為植物耐鹽基因，最先在擬南芥〔Arabidopsisthaliana(Linn.) Heynh.〕中被發(fā)現(xiàn)，是植物鹽脅迫信號轉導過程中鹽過敏(salt overly sensitive， SOS)離子穩(wěn)態(tài)調控途徑的主要成員[11-12]，編碼質膜Na+/H+逆向轉運蛋白(membrane Na+/H+antiporter)SOS1，該蛋白質的首要功能是控制鹽脅迫下植物根系的Na+外排，降低體內的Na+含量，利于植物耐受鹽脅迫環(huán)境[13-14]。迄今為止，SOS1基因多數(shù)從甜土植物中分離獲得，少數(shù)從鹽生植物中分離獲得[15-16]。目前，關于檉柳屬植物SOS1基因的研究報道較少[17]，關于不同檉柳屬植物SOS1基因的序列和器官表達差異尚不清楚，關于SOS1基因與檉柳屬植物耐鹽性的關系也不清楚，亟待研究。

為此，以檉柳屬植物甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳為研究對象，采用液體培養(yǎng)法對100、200和300 mmol·L-1NaCl脅迫20 d后3種植物的生長和鹽離子分布進行了比較，在此基礎上對300 mmol·L-1NaCl脅迫30 d后3種植物的生長和生理指標進行了比較，并對300 mmol·L-1NaCl脅迫0、3、6、12和24 h后3種植物地上部和根中SOS1基因的表達水平進行了比較，以期探討供試3種檉柳屬植物的適鹽特性、耐鹽性差異及可能原因，并為深入研究檉柳屬植物的耐鹽生理機制和分子機制提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

供試甘肅檉柳種子采自甘肅省張掖市郊區(qū)，多枝檉柳和細穗檉柳種子采自新疆維吾爾自治區(qū)中國科學院吐魯番沙漠植物園。選取籽粒飽滿的種子，播種到裝有蛭石的塑料盆中，將塑料盆置于裝有1/2 Hoagland營養(yǎng)液的周轉箱中培養(yǎng)，每周更換1次營養(yǎng)液；取2月齡幼苗，洗凈根部，移栽到具45孔的泡沫板中，每孔1株，置于裝有1/2 Hoagland營養(yǎng)液的塑料周轉箱中，在光照強度74 μmol·m-2·s-1、晝溫(25±2) ℃和夜溫 (20±2) ℃條件下培養(yǎng)3 d，選取長勢基本一致的幼苗進行脅迫實驗。整個脅迫實驗在南京農(nóng)業(yè)大學生命科學學院植物逆境生物學實驗室溫室完成。

1.2 方法

1.2.1 不同濃度NaCl脅迫對植株生長和鹽離子分布的影響

1.2.1.1 處理方法 實驗設置CK組、T1組、T2組和T3組，每組45株幼苗，平均分成3份，每份(15株)為1個重復。CK組為對照組，用1/2 Hoagland營養(yǎng)液培養(yǎng)，即0 mmol·L-1NaCl；T1組、T2組和T3組分別用含100、200和300 mmol·L-1NaCl的1/2 Hoagland營養(yǎng)液培養(yǎng)，每10 d更換1次培養(yǎng)液，培養(yǎng)20 d后觀察幼苗的形態(tài)，同時測定幼苗的株高、單株干質量以及地上部和根的Na+、K+和Cl-含量，并計算Na+/K+比。

1.2.1.2 指標測定方法 隨機選取每組3種植物幼苗各5株，用直尺(精度0.1 cm)測量幼苗的株高。將上述幼苗分別放入信封中，置于105 ℃殺青15 min，80 ℃烘干至恒質量，用千分之一電子天平稱量單株干質量。參照屈婭娜等[18]的方法測定Na+和K+含量，并計算Na+/K+比，參照Zhou等[19]的方法測定Cl-含量，各離子含量均重復測定3次。

1.2.2 NaCl脅迫對植株生長和生理指標的影響

1.2.2.1 處理方法 在前述實驗基礎上，設置對照組和處理組，每組45株幼苗，平均分成3份，每份(15株)為1個重復。對照組用1/2 Hoagland營養(yǎng)液培養(yǎng)，即0 mmol·L-1NaCl；處理組用含300 mmol·L-1NaCl的1/2 Hoagland營養(yǎng)液培養(yǎng)，每10 d更換1次培養(yǎng)液，培養(yǎng)30 d后觀察幼苗形態(tài)，使用桂光XTL-500型顯微鏡(桂林桂光儀器有限公司)觀察泌鹽狀況并拍照，同時測定和計算幼苗的相對株高增長量、根冠比、根系活力、地上部相對含水量、地上部離體失水率和光合色素含量。

1.2.2.2 指標測定方法 隨機選取每組3種植物幼苗各5株，用直尺分別測量培養(yǎng)前和培養(yǎng)后幼苗的株高，根據(jù)公式“相對株高增長量=〔(處理組培養(yǎng)后株高-處理組培養(yǎng)前株高)/(對照組培養(yǎng)后株高-對照組培養(yǎng)前株高)〕×100%”計算相對株高增長量；用去離子水將上述5株幼苗沖洗干凈，濾紙吸干表面水分，每株分成地上部和根2個部分，分別稱量單株地上部和根的鮮質量，根據(jù)公式“根冠比=單株根鮮質量/單株地上部鮮質量”計算根冠比；參照Tian等[20]的方法，先將上述5株幼苗的地上部完全浸入去離子水中，4 ℃靜置24 h，稱量單株地上部飽和鮮質量，再將其置于105 ℃殺青15 min，80 ℃烘干至恒質量，稱量單株地上部干質量，最后根據(jù)公式“地上部相對含水量=〔(單株地上部鮮質量-單株地上部干質量)/(單株地上部飽和鮮質量-單株地上部干質量)〕×100%”計算地上部相對含水量。

稱取每組3種植物幼苗根尖各0.2 g，參照Wang等[21]的方法測定根系活力，重復測定3次。

隨機選取每組3種植物幼苗各3株，立即稱量單株地上部鮮質量，并參照Wang等[22]的方法每隔20 min稱量1次單株地上部鮮質量，連續(xù)稱量6 h，根據(jù)公式“地上部離體失水率=〔(單株地上部鮮質量初始值-單株地上部鮮質量瞬時值)/單株地上部鮮質量初始值〕×100%”計算地上部離體失水率。

稱取每組3種植物幼苗地上部各0.5 g，參照Tian等[20]的方法測定光合色素(包括葉綠素a、葉綠素b和類胡蘿卜素)含量，并計算總葉綠素含量(葉綠素a含量和葉綠素b含量的總和)和Chla/Chlb(葉綠素a含量與葉綠素b含量的比值)，各指標均重復測定3次。

橋梁工程施工過程中，為了滿足工程在質量方面的要求，經(jīng)常需要應用不同的施工技術，在具體施工過程中會涉及到多種不同類型的施工技術，墩臺施工技術是其中比較常見的一項技術。墩臺翻模和墩臺液壓滑模是兩項常用的技術，并且這兩種施工技術對施工人員的技術水平有著較高要求，因此，要做好相應的分析工作，從而使橋梁工程墩臺施工技術水平能夠得到進一步提升。

1.2.3 NaCl脅迫對SOS1基因表達的影響 供試3種植物各選取15株幼苗，用含300 mmol·L-1NaCl的1/2 Hoagland營養(yǎng)液培養(yǎng)，在培養(yǎng)0、3、6、12和24 h分別取3株幼苗進行實時熒光定量PCR分析，每株視為1個重復。

根據(jù)剛毛檉柳ThSOS1基因序列[17]設計引物，正向引物序列為5′-T￣C￣G￣G￣T￣G￣T￣T￣G￣T￣G￣G￣A￣T￣T￣G￣G￣G￣T￣-3′，反向引物序列為5′-C￣A￣G￣C￣T￣C￣C￣C￣T￣C￣T￣T￣G￣A￣G￣C￣A￣G￣T￣G￣-3′；以剛毛檉柳的actin基因為內參基因，正向引物序列為5′-T￣C￣G￣T￣A￣G￣C￣A￣G￣A￣G￣C￣A￣T￣C￣G￣G￣A￣G￣A￣A￣-3′，反向引物序列為5′-T￣G￣A￣C￣C￣C￣A￣T￣G￣C￣C￣A￣A￣C￣C￣A￣T￣A￣A￣C￣A￣-3′。分別取不同脅迫時間幼苗的地上部和根各250 mg，采用TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit試劑盒〔寶生物工程(大連)有限公司〕提取總RNA，利用HifairTMⅡ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus)試劑盒(上海翊圣生物科技有限公司)合成cDNA第1條鏈，以cDNA第1條鏈為模板進行擴增反應。擴增體系總體積為20.0 μL，包括10 μmol·L-1正向引物和反向引物各0.4 μL，200 ng·μL-1cDNA第1條鏈2.0 μL，2×HifairTMqPCR SYBR? Green Master Mix 10.0 μL，ddH2O 7.2 μL。使用ABI 7500 PCR儀(美國ABI公司)進行擴增反應，擴增程序為：95 ℃預變性5 min；95 ℃變性10 s、55 ℃退火20 s、72 ℃延伸20 s，共40個循環(huán)；72 ℃延伸10 min。采用2-ΔΔCT法[23]計算基因的相對表達量。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

使用SPSS 25.0統(tǒng)計分析軟件計算所有實驗數(shù)據(jù)的均值和標準差，并對所有實驗數(shù)據(jù)進行差異顯著性分析。

2 結果和分析

2.1 不同濃度NaCl脅迫對3種檉柳屬植物生長和鹽離子分布的影響

2.1.1 對生長指標的影響 形態(tài)觀察結果(圖1)表明：在100 mmol·L-1NaCl脅迫下甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的生長狀況均優(yōu)于0 mmol·L-1NaCl(對照)，但是，隨著NaCl濃度提高，供試3種檉柳屬植物的生長狀況越來越差?？傮w來看，多枝檉柳的生長狀況隨NaCl濃度提高的變化幅度最小，細穗檉柳的生長狀況隨NaCl濃度提高的變化幅度最大。

CK： 0 mmol·L-1 NaCl； T1： 100 mmol·L-1 NaCl； T2： 200 mmol·L-1 NaCl； T3： 300 mmol·L-1 NaCl. TG： 甘肅檉柳 Tamarix gansuensis H. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳 T. ramosissima Ledeb.； TL： 細穗檉柳 T. leptostachys Bunge.

研究結果(表1)表明：100 mmol·L-1NaCl脅迫下甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的株高和單株干質量均高于對照，其中多枝檉柳的株高顯著(P<0.05)高于對照。隨著NaCl濃度提高，供試3種檉柳屬植物的株高和單株干質量均逐漸下降；與對照相比，300 mmol·L-1NaCl脅迫下多枝檉柳的株高和單株干質量的下降幅度均最小。

NaCl濃度/(mmol·L-1)Conc. of NaCl株高/cm Height單株干質量/g Dry mass per plantTGTRTLTGTRTL0(CK)14.62±1.97bc13.18±1.81a11.12±1.13ab0.13±0.03ab0.19±0.03ab0.08±0.02ab10015.58±1.18c16.58±1.65b13.12±2.06b0.14±0.04b0.21±0.06b0.10±0.03b20012.98±2.05ab14.46±3.64ab10.10±2.30a0.10±0.03ab0.14±0.02ab0.06±0.02ab30010.96±1.80a12.14±3.64a9.48±2.05a0.09±0.01a0.11±0.03a0.06±0.02ab

1)TG： 甘肅檉柳TamarixgansuensisH. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳T.ramosissimaLedeb.； TL： 細穗檉柳T.leptostachysBunge. 同列中不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05) Different lowercases in the same column indicate the significant (P<0.05) difference.

2.1.2 對鹽離子分布的影響 研究結果(圖2和圖3)表明：隨著NaCl濃度提高，甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳地上部和根的Na+和Cl-含量及Na+/K+比基本上逐漸升高，且顯著高于對照；而供試3種檉柳屬植物地上部和根的K+含量卻總體上隨著NaCl濃度提高而逐漸降低，且大部分地上部和根的K+含量在不同濃度NaCl脅迫間差異不顯著。值得注意的是，供試3種檉柳屬植物根的Cl-含量明顯低于地上部?？傮w上看，細穗檉柳地上部和根的Na+和Cl-含量及Na+/K+比高于甘肅檉柳和多枝檉柳。

TG： 甘肅檉柳 Tamarix gansuensis H. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳 T. ramosissima Ledeb.； TL： 細穗檉柳 T. leptostachys Bunge.： 0 mmol·L-1 NaCl (CK)； ： 100 mmol·L-1 NaCl； ： 200 mmol·L-1 NaCl； ： 300 mmol·L-1 NaCl.

TG： 甘肅檉柳 Tamarix gansuensis H. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳 T. ramosissima Ledeb.； TL： 細穗檉柳 T. leptostachys Bunge.： 0 mmol·L-1 NaCl (CK)； ： 100 mmol·L-1 NaCl； ： 200 mmol·L-1 NaCl； ： 300 mmol·L-1 NaCl.

2.2 NaCl脅迫對3種檉柳屬植物生長和生理指標的影響

2.2.1 對生長指標的影響 形態(tài)觀察結果(圖4-A)表明：與對照組(0 mmol·L-1NaCl)相比，處理組(300 mmol·L-1NaCl)甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的生長均受到抑制，但均表現(xiàn)出一定的耐鹽性，并且甘肅檉柳和多枝檉柳的耐鹽性較細穗檉柳更明顯。泌鹽狀況觀察結果(圖4-B)顯示：與對照組相比，處理組甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的地上部(包括莖和葉)表面均泌鹽明顯，葉片更為皺縮且更加貼合莖生長。

研究結果(表2)表明：處理組甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的相對株高增長量均低于100%，其中，多枝檉柳的相對株高增長量最大(68.84%)，甘肅檉柳的相對株高增長量次之(62.90%)，細穗檉柳的相對株高增長量最小(34.33%),且多枝檉柳和甘肅檉柳的相對株高增長量均極顯著(P<0.01)高于細穗檉柳，說明300 mmol·L-1NaCl 脅迫下供試3種檉柳屬植物的株高生長均受抑制，且多枝檉柳株高生長受抑制程度最小，甘肅檉柳株高生長受抑制程度較小，而細穗檉柳株高生長受抑制程度卻較大。

由表2還可見：處理組供試3種檉柳屬植物的根冠比差異極顯著，其中，細穗檉柳的根冠比最大(0.47)，甘肅檉柳的根冠比次之(0.30)，多枝檉柳的根冠比最小(0.25)。與對照組相比，處理組甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的根冠比均極顯著增加，其中，細穗檉柳根冠比的增幅最大，較對照組升高了3.29倍。

CK： 0 mmol·L-1 NaCl； T： 300 mmol·L-1 NaCl. TG： 甘肅檉柳 Tamarix gansuensis H. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳 T. ramosissima Ledeb.； TL： 細穗檉柳 T. leptostachys Bunge.

種類Species相對株高增長量/%Relative height increment根冠比 Root/shoot ratioCKT甘肅檉柳 Tamarix gansuensis62.90±2.88Bb0.14±0.00Bb0.30±0.01Bb??多枝檉柳 Tamarix ramosissima68.84±1.70Bc0.15±0.00Bb0.25±0.01Aa??細穗檉柳 Tamarix leptostachys34.33±1.03Aa0.11±0.01Aa0.47±0.01Cc??

1)CK： 0 mmol·L-1NaCl； T： 300 mmol·L-1NaCl. 同列中不同大寫和小寫字母分別表示差異極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05) Different capitals and lowercases in the same column indicate the extremely significant (P<0.01) and significant (P<0.05) differences， respectively. ** ： 表示與對照組差異極顯著(P<0.01) Indicating the extremely significant (P<0.01) difference with the control group.

2.2.2 對生理指標的影響 研究結果(表3)表明：處理組甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的根系活力均較對照組極顯著下降，并且，處理組和對照組細穗檉柳的根系活力均最高；對照組供試3種檉柳屬植物的地上部相對含水量均在80%以上，處理組供試3種檉柳屬植物的地上部相對含水量差異極顯著，并且，處理組甘肅檉柳和細穗檉柳的地上部相對含水量較對照組極顯著下降，而多枝檉柳的地上部相對含水量較對照組顯著(P<0.05)下降。

研究結果(圖5)表明：處理組甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的地上部離體失水率均低于對照組，其降幅隨時間延長而增大，其中，多枝檉柳的地上部離體失水率降幅最小，甘肅檉柳和細穗檉柳的地上部離體失水率降幅較大，說明300 mmol·L-1NaCl脅迫對多枝檉柳地上部水分的影響相對較小。

比較結果(表4)表明：處理組甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳地上部的葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素和類胡蘿卜素含量均高于對照組，其中，處理組甘肅檉柳和細穗檉柳地上部的葉綠素a、葉綠素b、總葉綠素和類胡蘿卜素含量以及多枝檉柳地上部的葉綠素a和總葉綠素含量均極顯著高于對照組，而處理組多枝檉柳地上部的類胡蘿卜素含量顯著高于對照組，其葉綠素b含量略高于對照組。就葉綠素a含量與葉綠素b含量的比值(Chla/Chlb)而言，處理組和對照組甘肅檉柳地上部的Chla/Chlb值差異不明顯，而處理組多枝檉柳和細穗檉柳地上部的Chla/Chlb值分別顯著和極顯著高于對照組。

種類Species根系活力/(mg·g-1·h-1)Root vigor地上部相對含水量/%Relative water content in above-ground partCKTCKT甘肅檉柳 Tamarix gansuensis419.93±16.17Aa76.79±6.30Aa??84.42±0.87Aa65.56±1.33Cc??多枝檉柳 Tamarix ramosissima460.54±26.60Ab193.85±5.99Bb??88.33±0.84Bbc86.62±0.58Aa?細穗檉柳 Tamarix leptostachys563.33±18.53Bc225.23±18.37Bc??87.88±0.56Bc73.55±0.31Bb??

1)CK： 0 mmol·L-1NaCl； T： 300 mmol·L-1NaCl. 同列中不同大寫和小寫字母分別表示差異極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05) Different capitals and lowercases in the same column indicate the extremely significant (P<0.01) and significant (P<0.05) differences， respectively. ** ： 表示與對照組差異極顯著(P<0.01) Indicating the extremely significant (P<0.01) difference with the control group； *： 表示與對照組差異顯著(P<0.05) Indicating the significant (P<0.05) difference with the control group.

○： 0 mmol·L-1 NaCl (CK)； ●： 300 mmol·L-1 NaCl.

種類2)Species2)葉綠素a含量/(mg·g-1)Chlorophyll a content葉綠素b含量/(mg·g-1)Chlorophyll b contentChla/ChlbCKTCKTCKTTG0.97±0.06Aa1.34±0.03ABa??0.29±0.03Aa0.41±0.02Aa??3.31±0.18ABb3.27±0.10ABabTR1.24±0.03Bb1.39±0.08Ba??0.40±0.03Bc0.41±0.01Aa3.11±0.17ABab3.38±0.25ABab?TL1.01±0.01Aa1.51±0.00Cb??0.34±0.01Ab0.44±0.02Aa??2.93±0.07Aa3.45±0.17Bb??種類2)Species2)總葉綠素含量/(mg·g-1) Total chlorophyll content類胡蘿卜素含量/(mg·g-1) Carotenoid contentCKTCKTTG1.26±0.09Aa1.75±0.05ABa??0.13±0.01Aa0.19±0.02Aab??TR1.64±0.06Bb1.80±0.08BCa??0.18±0.01Bb0.20±0.01Ab?TL1.35±0.02Aa1.95±0.02Cb??0.13±0.01Aa0.23±0.01Bc??

1)Chla/Chlb： 葉綠素a含量與葉綠素b含量的比值 Ratio of chlorophyllacontent to chlorophyllbcontent. CK： 0 mmol·L-1NaCl； T： 300 mmol·L-1NaCl. 同列中不同大寫和小寫字母分別表示差異極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05) Different capitals and lowercases in the same column indicate the extremely significant (P<0.01) and significant (P<0.05) differences， respectively. ** ： 表示與對照組差異極顯著(P<0.01) Indicating the extremely significant (P<0.01) difference with the control group； *： 表示與對照組差異顯著(P<0.05) Indicating the significant (P<0.05) difference with the control group.

2)TG： 甘肅檉柳TamarixgansuensisH. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳T.ramosissimaLedeb.； TL： 細穗檉柳T.leptostachysBunge.

2.3 NaCl脅迫對3種檉柳屬植物SOS1基因表達的影響

研究結果(表5)表明：與脅迫0 h相比，300 mmol·L-1NaCl脅迫3～24 h甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳地上部和根中SOS1基因的相對表達量大多升高，僅脅迫3、6和12 h甘肅檉柳地上部中SOS1基因的相對表達量以及脅迫3 h多枝檉柳地上部中SOS1基因的相對表達量及細穗檉柳地上部和根中SOS1基因的相對表達量略降低?？傮w來看，NaCl脅迫期間，甘肅檉柳根中SOS1基因的相對表達量高于其地上部，而多枝檉柳和細穗檉柳根中SOS1基因的相對表達量卻低于其地上部。

比較而言，脅迫24 h甘肅檉柳根和多枝檉柳地上部中SOS1基因的相對表達量增幅最大，甘肅檉柳地上部和多枝檉柳根中SOS1基因的相對表達量增幅居中，而細穗檉柳地上部和根SOS1基因的相對表達量增幅最小。

時間/hTime在地上部中的相對表達量Relative expression in above-ground part在根中的相對表達量Relative expression in rootTGTRTLTGTRTL00.42±0.29ab0.89±0.07a0.94±0.22a1.07±0.07a0.86±0.09a0.87±0.15a30.08±0.00a0.86±0.08a0.77±0.08a1.28±0.20a0.93±0.05ab0.79±0.21a60.14±0.02a0.99±0.25a1.04±0.27a2.10±0.16a1.80±0.58ab0.90±0.11a120.28±0.05a2.19±0.42b2.13±0.34b1.89±0.09a1.89±0.14b0.96±0.03a240.76±0.07b2.63±0.55b1.45±0.06ab3.13±0.65b1.47±0.23ab1.17±0.02a

1)TG： 甘肅檉柳TamarixgansuensisH. Z. Zhang； TR： 多枝檉柳T.ramosissimaLedeb.； TL： 細穗檉柳T.leptostachysBunge. 同列中不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05) Different lowercases in the same column indicate the significant (P<0.05) difference.

3 討論和結論

檉柳屬植物的適應性廣、生命力強，具有耐鹽堿、耐干旱、耐瘠薄、耐風蝕和沙埋等諸多優(yōu)點，是防風固沙、水土保持、鹽堿地改良和造林及城鎮(zhèn)綠化的一類優(yōu)良樹種[1]。相關研究結果表明：檉柳屬植物對NaCl脅迫的耐受性有一定的閾值[24]；在質量體積分數(shù)4.0%NaCl(約685 mmol·L-1)脅迫下甘蒙檉柳的生長受到抑制，并隨著脅迫時間延長基本停止生長[25]。本研究結果表明：與0 mmol·L-1NaCl脅迫(對照)相比，300 mmol·L-1NaCl脅迫下甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳的生長受到明顯抑制，株高、單株干質量、根系活力和地上部相對含水量顯著下降，但這3種植物地上部表面泌鹽明顯增多，葉綠素(包括葉綠素a、葉綠素b和總葉綠素)和類胡蘿卜素含量基本上顯著升高?？傮w來看，多枝檉柳的相對株高增長量最大，根冠比最小，地上部相對含水量和地上部離體失水率的降幅均最小，說明多枝檉柳地上部生長受NaCl脅迫的抑制程度較小。

本研究結果表明：總體來看，供試3種檉柳屬植物地上部和根中SOS1基因的相對表達量在300 mmol·L-1NaCl脅迫0 h無明顯差異，但在脅迫24 h不同程度升高，其中，多枝檉柳地上部中SOS1基因的相對表達量增幅最大，其根中SOS1基因的相對表達量增幅也較大。關于該基因在NaCl脅迫條件下檉柳屬植物各器官尤其是鹽腺分泌細胞中的表達量，以及其與檉柳屬植物泌鹽的關系，均值得深入研究。

綜上所述，甘肅檉柳、多枝檉柳和細穗檉柳均表現(xiàn)出較強的耐鹽能力，但其地上部和根受NaCl脅迫影響程度存在差異，多枝檉柳地上部和細穗檉柳根受NaCl脅迫影響均相對較小。總體來看，多枝檉柳受NaCl脅迫的影響最小，可作為檉柳屬植物耐鹽生理和分子機制研究的備選材料。