冠心病患者外周血中CD36表達(dá)水平及與Toll樣受體4信號(hào)的相關(guān)性分析

張 震

（右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，廣西百色533000）

冠心?。╟oronary heart disease，CHD）是我國(guó)最常見(jiàn)的心血管疾病之一，隨著我國(guó)老齡化人口的不斷擴(kuò)大，CHD的發(fā)病率及死亡率均呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，且發(fā)病率逐漸由老年群體轉(zhuǎn)向中青年人群發(fā)展，該病已經(jīng)成為危害人類(lèi)健康的“第一殺手”[1]。國(guó)外研究發(fā)現(xiàn)，CD36與單核細(xì)胞泡沫化有關(guān)，且近年來(lái)有學(xué)者認(rèn)為免疫應(yīng)答在CHD的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，Toll樣受體屬介導(dǎo)天然免疫的跨膜信號(hào)傳遞受體家族，是聯(lián)系天然免疫與獲得性免疫的橋梁[2]。臨床對(duì) CD36、Toll樣受體 4（TLR4）與 CHD 相關(guān)性研究較多，但對(duì)其在冠心病中，CD36與TLR4之間的相關(guān)性研究較少，本研究現(xiàn)探討冠心病患者外周血中CD36表達(dá)水平及與TLR4的相關(guān)性，報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)過(guò)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，研究對(duì)象為150例CHD患者及150例健康體檢者，均為我院2014年2月-2017年2月期間所收治，患者均已簽署知情同意書(shū)，冠心病患者中男74例，女76例，年齡 50-70歲，平均（59.21±5.14）歲，其中急性心肌梗死（AMI）74例，穩(wěn)定性心絞痛（ASP）44例，不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）32例。健康體檢者中男77例，女73例，年齡 51-70歲，平均（59.25±5.17）歲，CHD 患者與健康體檢者在性別、年齡等基礎(chǔ)信息上無(wú)差異（P＞0.05）。

1.2 方 法

1.2.1 試劑與儀器 CD36檢測(cè)試劑盒由武漢CUSABIO公司提供（批號(hào)：V08134635）；酶標(biāo)儀選擇美國(guó)賽默飛世爾科技公司的Thermo multiskan MK3。

1.2.2 CD36與TLR4檢測(cè) CD36：采集研究對(duì)象4mL晨起空腹靜脈血，其中AMI于入院當(dāng)時(shí)采集靜脈血4mL。置真空采血管中，分離血清后，-20℃保存。采用ELISA法檢測(cè)CD36，均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

TLR4：采集研究對(duì)象4mL晨起空腹靜脈血，以密度梯度離心法獲取外周血白細(xì)胞，以外周血白細(xì)胞總RNA為模板，引物為上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司設(shè)計(jì)，合成的cDNA稀釋后，以熒光定量PCR法進(jìn)行TLR4檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

探究不同患者CD36、TLR4表達(dá)水平，探究CD36、TLR4之間相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究中計(jì)量資料表示方法為（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差），用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用%表示，使用χ2檢驗(yàn)，采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件，對(duì)所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以P值是否＜0.05為判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 比較研究對(duì)象CD36、TLR4表達(dá)

冠心病患者相比健康體檢者在CD36、TLR4上顯著較高（P＜0.05），且呈 ASP＜UAP＜AMI趨勢(shì)，AMI在CD36、TLR4上顯著比其他類(lèi)型的CHD患者高（P＜0.05），參考表 1。

表1 比較研究對(duì)象CD36、TLR4表達(dá)（±s）

表1 比較研究對(duì)象CD36、TLR4表達(dá)（±s）

注：*表示與健康體檢者相比存在顯著差異P＜0.05，#表示與ASP相比存在顯著差異P＜0.05，&表示與UAP相比存在顯著差異 P＜0.05。

組別健康體檢者（n=150）ASP（n=44）UAP（n=32）AMI（n=74）F值P值CD36（pg/ml）3.78±0.35#&17.45±1.67*&23.62±2.51*#27.38±2.35*#&4336.75 0.000 TLR4（拷貝/μgRNA）1.27±0.12#&3.74±0.21*&4.29±0.25*#4.97±0.35*#&5343.76 0.000

2.2 相關(guān)性

CD36與 TLR4互為正相關(guān)（P＜0.05），TLR4升高，CD36也會(huì)升高，反之，CD36降低，TLR4也會(huì)降低，參考表2。

表2 CD36與TLR4相關(guān)性

3 討 論

冠心病的發(fā)病原因至今未明，但唯一確定的是冠狀動(dòng)脈硬化是該病發(fā)生的先決條件，若未得到及時(shí)的治療，將增加心臟負(fù)擔(dān)，危急患者生命安全。炎癥與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系正受到人們的廣泛關(guān)注[3]。

動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中表達(dá)多種脂蛋白受體，CD36就是其中之一，該物質(zhì)又被稱(chēng)為糖蛋白Ⅳ，能識(shí)別、吞噬氧化低密度脂蛋白，是B類(lèi)清道夫受體家族的一員，使巨噬細(xì)胞形成泡沫細(xì)胞[4]。CD36廣泛存在于巨噬細(xì)胞膜上，對(duì)脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)吞和信號(hào)傳導(dǎo)非常重要，通過(guò)病原體結(jié)合使巨噬細(xì)胞吞噬細(xì)菌內(nèi)毒素、凋亡細(xì)胞片段[5]。本次研究顯示，CD36在正常動(dòng)脈壁上的巨噬細(xì)胞內(nèi)表達(dá)很低，但隨著冠心病病情發(fā)展，呈顯著上升趨勢(shì)，這表明CD36不僅參與冠心病的發(fā)生發(fā)展，且可能在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定及斑塊破裂過(guò)程中發(fā)揮重要作用。近年來(lái)研究證實(shí)，肺炎衣原體感染與冠心病的發(fā)生明顯相關(guān)，而TLRs家族在誘導(dǎo)病源微生物感染過(guò)程中具有重要作用，在誘導(dǎo)相關(guān)炎癥性損害中具有非常重要的作用。本次研究結(jié)果顯示，隨著冠心病病情發(fā)展，TLR4呈顯著上升趨勢(shì)。表明TLR4可能提供了一種潛在的連接脂質(zhì)、感染和動(dòng)脈粥樣硬化的途徑。本次研究結(jié)果中，冠心病患者相比健康體檢者在CD36、TLR4 上顯著較高（P＜0.05），且呈 ASP＜UAP＜AMI趨勢(shì)，AMI在CD36、TLR4上顯著比其他類(lèi)型的冠心病患者高（P＜0.05），CD36與 TLR4互為正相關(guān)，因此，CD36與TLR4均可以作為冠脈粥樣斑塊不穩(wěn)定的指標(biāo)，也可作為判斷冠心病嚴(yán)重度的敏感指標(biāo)。

綜上所述，外周血中CD36表達(dá)水平及與TLR4在冠心病中呈互為正相關(guān)，可作為預(yù)測(cè)冠心病炎癥的2個(gè)指標(biāo)。