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    應(yīng)用穩(wěn)定同位素分析遼東灣池塘仿刺參的食性

    2019-03-29 07:19:34田甲申周遵春張淑麗
    水產(chǎn)科學(xué) 2019年2期
    關(guān)鍵詞:刺參硅藻底泥

    王 擺,田甲申,董 穎,陳 仲,周遵春,宋 鋼,張淑麗

    ( 1.遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院,遼寧省海洋生物資源和生態(tài)學(xué)重點實驗室,遼寧 大連 116023; 2.凌海市達(dá)蓮海珍品養(yǎng)殖有限責(zé)任公司,遼寧 錦州 121211 )

    仿刺參(Apostichopusjaponicus)是黃、渤海重要底棲生物類群,亦是我國北方重要海水增養(yǎng)殖品種之一。海水池塘養(yǎng)殖是仿刺參主要的養(yǎng)殖方式之一。遼東灣海水池塘位于我國沿海最北端,具有顯著的地域特點。每年11月下旬至翌年3月上旬為池塘的冰封期,水溫為-4~0 ℃;夏季池塘水溫升至23 ℃以上時,不同規(guī)格的仿刺參陸續(xù)進(jìn)入夏眠;春季和秋季池塘水溫適宜,仿刺參攝食旺盛。其中,春季化冰后仿刺參的免疫力處于低谷期[1],亦是各種病害的高發(fā)期。掌握池塘仿刺參周年的攝食規(guī)律對其生態(tài)健康養(yǎng)殖具有重要意義。張寶琳等[2]通過胃含物法分析發(fā)現(xiàn),山東靈山島淺海巖礁區(qū)仿刺參主要攝食動植物碎屑和沉積物。金波昌等[3]利用碳穩(wěn)定同位素法分析人工飼料對仿刺參幼參的生長貢獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),人工飼料對幼參的食物貢獻(xiàn)隨著養(yǎng)殖密度的增加而升高,養(yǎng)殖密度為35 個/m2時,人工飼料的食物貢獻(xiàn)率最大,為(29.48±3.31)%。與傳統(tǒng)胃含物法相比,碳氮穩(wěn)定同位素法根據(jù)消費者穩(wěn)定同位素比值與其食物相應(yīng)同位素比值相近的原則來判斷其食物來源,分析食物貢獻(xiàn)比例[4]。碳氮穩(wěn)定同位素技術(shù)在分析植食性動物、肉食性動物,無脊椎動物、脊椎動物的食性,及陸生和水生生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)級和食物網(wǎng)結(jié)構(gòu)中得到了廣泛的應(yīng)用[5-8]。Feng等[9]利用碳氮穩(wěn)定同位素技術(shù)研究了山東靖海灣混養(yǎng)池塘的營養(yǎng)級關(guān)系,發(fā)現(xiàn)幾種大型藻對仿刺參的餌料貢獻(xiàn)率較高。Wen等[10]報道了試驗條件下幾種大型藻對仿刺參的餌料貢獻(xiàn)率。目前,有關(guān)遼東灣池塘仿刺參的食性特征研究鮮見報道。

    為探明遼東灣生態(tài)養(yǎng)殖池塘仿刺參的食性特征,筆者采用碳氮穩(wěn)定同位素技術(shù)檢測生態(tài)養(yǎng)殖池塘中仿刺參的肌肉、體壁、消化管和消化管內(nèi)含物,以及浮游植物、浮游動物、顆粒有機(jī)物、底棲硅藻和表層底泥的δ13C和δ15N值,運用IsoSource線性混合模型計算出生態(tài)養(yǎng)殖池塘仿刺參的食物來源,為海水池塘仿刺參的生態(tài)健康養(yǎng)殖提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 養(yǎng)殖池塘

    仿刺參生態(tài)池塘位于遼東灣的濱海潮上帶(N 40°53.46′,E 121°29.53′),池塘面積6.67 hm2,水深1.4~2.0 m。春季至秋季每次的活汛期(約15 d)換水1次,換水量約為池塘總體水量的50%。養(yǎng)殖過程中不投餌。池塘的仿刺參采取輪捕輪放的投苗養(yǎng)殖方式,秋季投放體質(zhì)量3.5~4.5 g/頭的幼參,投放密度6.5×104~8.5×104頭/hm2。采捕規(guī)格100 g以上的成參,年采捕量為900~1100 kg/hm2。池塘底部放置以石塊為材料的參礁和聚乙烯網(wǎng)礁,養(yǎng)殖期間池塘內(nèi)未出現(xiàn)底棲大型藻類。

    1.2 樣品采集

    分別于2016年3月25日、5月19日、7月7日、9月29日、12月1日采集池塘的仿刺參、浮游植物、浮游動物、顆粒有機(jī)物和底棲硅藻、表層底泥(-1~0 cm),樣品立即用5%的甲醛溶液固定,4 ℃保存,帶回實驗室進(jìn)行預(yù)處理,仿刺參的取樣數(shù)量為3~5頭,體質(zhì)量為(46.0±5.3) g。池塘海水鹽度、水溫、pH和溶解氧采用多參數(shù)水質(zhì)分析儀(YSI Professional plus,美國YSI)現(xiàn)場測定。

    1.2 樣品處理

    仿刺參取肌肉、體壁、消化管等組織和消化管內(nèi)含物,Whatman GF/F濾膜過濾水樣獲得顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物樣品,使用1 mol/L鹽酸對顆粒有機(jī)物、浮游生物、底泥和消化管內(nèi)含物進(jìn)行3 h酸化,去除碳酸鹽的影響,用去離子水沖洗。所有樣品在冷凍干燥機(jī)(Christ Alpha 2-4 LD plus,德國)中-80 ℃凍干后,瑪瑙研缽充分磨勻,底泥和消化管內(nèi)含物再經(jīng)80目篩絹過濾后,用于δ15N測定。仿刺參各組織和魚、蝦、貝類樣品用脫脂溶液(甲醇∶氯仿∶水=2∶1∶0.8)浸泡除脂[11],超純水水洗后,再烘干至恒等質(zhì)量,經(jīng)瑪瑙研缽研磨后,與其他樣品用于δ13C測定。

    1.3 碳氮穩(wěn)定同位素測定

    所有樣品在遼寧省海洋水產(chǎn)科學(xué)研究院穩(wěn)定同位素實驗室測定,穩(wěn)定同位素質(zhì)譜儀為菲尼根Flash 2000 HT型元素分析儀(美國)和菲尼根Delta V Advantage同位素比率質(zhì)譜儀(美國)相連而成,測定15N、13C。穩(wěn)定C、N同位素的自然豐度為:

    δX=([R樣品/R標(biāo)準(zhǔn)]-1)×103

    式中,X代表13C或15N。R代表13C/12C或15N/14N。δ13C值是相對于PDB標(biāo)準(zhǔn)的自然豐度,δ15N值是相對空氣中氮氣的豐度[12-14]。

    為保證結(jié)果準(zhǔn)確性,同一樣品的碳、氮穩(wěn)定同位素分別進(jìn)行測定。每個樣品測定3個平行樣品,為保持試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和儀器的穩(wěn)定性,每測定5個樣品后插測1個標(biāo)準(zhǔn)樣。δ15N精密度<±0.15‰,δ13C精密度<±0.15‰。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    使用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,檢測結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用IsoSource線性混合模型[15]計算餌料貢獻(xiàn)率。采用Origin 7.5作圖。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 池塘海水理化參數(shù)周年變化

    仿刺參池塘的理化參數(shù)周年變化見表1,海水溫度周年變化較大,0.7~27.4 ℃,冬季水溫最低,夏季水溫最高,春季和秋季水溫適中。海水的溶解氧與溫度呈顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系(r2=0.931,P<0.05)。海水鹽度和pH周年變化不大。

    表1 樣品采集時池塘海水溫度、鹽度、pH和溶解氧

    2.2 仿刺參的δ15N和δ13C值特征

    通過比較海水養(yǎng)殖池塘仿刺參不同組織和消化管內(nèi)含物的δ15N和δ13C值發(fā)現(xiàn),肌肉組織的δ13C值最高,其次是體壁,消化管組織的δ13C值最低;仿刺參體壁的δ15N值最高,其次是肌肉,消化管組織的δ15N值最低(表2)。

    2.3 不同餌料對仿刺參餌料貢獻(xiàn)率

    采用IsoSource軟件計算得出不同類別餌料對仿刺參的平均餌料貢獻(xiàn)率見表3、圖1。試驗結(jié)果顯示,各采樣月底棲硅藻對仿刺參的平均餌料貢獻(xiàn)率最高,為78.5%~85.7%。其中,3月底棲硅藻的平均貢獻(xiàn)率為85.4%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為7.9%、2.1%、2.2%和2.3%;5月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為78.5%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為7.5%、3.0%、3.3%和7.7%;7月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為85.7%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為3.1%、3.4%、3.6%和4.2%;9月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為78.5%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為3.6%、5.1%、5.6%和7.1%;12月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為79.4%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為6.2%、4.2%、4.8%和5.2%。表明遼東灣海水養(yǎng)殖池塘仿刺參的主要食物來源為底棲硅藻,其次為表層底泥、浮游動物、浮游植物和顆粒有機(jī)物。

    表2 仿刺參不同組織的δ15N和δ13C值 ‰

    表3 不同餌料對仿刺參的平均餌料貢獻(xiàn)率 %

    圖1 不同餌料對仿刺參的平均餌料貢獻(xiàn)率

    不同類別餌料對仿刺參消化管內(nèi)含物δ13C值的平均貢獻(xiàn)率見表4、圖2。試驗結(jié)果顯示,各采樣月底棲硅藻對消化管內(nèi)含物δ13C值的平均貢獻(xiàn)率最高,為25.8%~74.5%。其中,3月底棲硅藻的平均貢獻(xiàn)率為74.4%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為13.5%、3.9%、4.0%和4.2%;5月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為48.3%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為17.7%、7.5%、18.3%和18.3%;7月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為74.5%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為5.6%、6.0%、6.4%和7.5%;9月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為63.4%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為6.3%、8.7%、9.5%和12.0%;12月底棲硅藻的平均餌料貢獻(xiàn)率為25.8%,表層底泥、顆粒有機(jī)物、浮游植物和浮游動物的平均貢獻(xiàn)率分別為22.2%、15.3%、17.3%和19.4%。試驗結(jié)果表明,仿刺參主要攝食底棲硅藻、底泥以及沉降的浮游動植物和顆粒有機(jī)物。

    表4 不同餌料對仿刺參消化管內(nèi)含物δ13C值的平均貢獻(xiàn)率 %

    圖2 不同餌料對仿刺參消化管內(nèi)含物δ13C值的貢獻(xiàn)率

    3 討 論

    3.1 仿刺參的δ15N和δ13C值的周年變化

    穩(wěn)定碳氮同位素在食性研究中,通過對比動物不同組織與餌料的δ13C值,可以獲得各組織對餌料的轉(zhuǎn)化率[16]。通過比較仿刺參不同組織的δ15N和δ13C值發(fā)現(xiàn),肌肉組織的δ13C值最高,其次是體壁、消化管組織,表明肌肉組織對食物的轉(zhuǎn)化率低于體壁組織和消化管組織。體壁的δ15N值最高,其次是肌肉、消化管組織。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),仿刺參的δ15N和δ13C值具有顯著的周年變化特點,這可能與池塘理化參數(shù)、仿刺參不同季節(jié)攝食的餌料和其自身新陳代謝規(guī)律有關(guān)。Sun等[17]研究發(fā)現(xiàn),仿刺參的δ15N和δ13C值具有季節(jié)變化特征,其δ13C值季節(jié)變化較大,δ15N值較為穩(wěn)定。

    3.2 仿刺參的食性特征

    仿刺參攝食過程中主要依靠觸手抓或掃,將附著物表面的無機(jī)物、有機(jī)碎屑、藻類等一并吞入消化管中[3,18]。胃含物法分析表明,山東靈山島淺海巖礁區(qū)仿刺參主要攝食動植物碎屑和沉積物[2]。本研究采用碳氮穩(wěn)定同位素技術(shù)發(fā)現(xiàn),底棲硅藻對遼東灣池塘生態(tài)養(yǎng)殖的仿刺參的平均餌料貢獻(xiàn)率周年變化為78.5%~85.7%,表明仿刺參主要食物來源為底棲硅藻。Feng等[9]利用碳氮穩(wěn)定同位素技術(shù)研究發(fā)現(xiàn),山東靖海灣混養(yǎng)池塘大型藻對仿刺參的餌料貢獻(xiàn)率較高。這可能與池塘的生物環(huán)境差異有關(guān),山東靖海灣混養(yǎng)池塘位于潮間帶,每日利用潮汐進(jìn)行海水交換,大型藻類資源豐富。Wen等[10]報道,試驗條件下幾種大型藻可作為仿刺參主要的餌料。與之相比,本研究的生態(tài)養(yǎng)殖池塘每月?lián)Q水2~3次,池塘中無大型藻類,初級生產(chǎn)者主要為浮游植物和底棲硅藻,其中,底棲硅藻主要為圓篩藻屬(Coscinodiscus)。

    遼東灣池塘生態(tài)養(yǎng)殖的仿刺參周年經(jīng)歷春季快速生長期、夏眠期、秋季快速生長期和越冬期,快速生長期為仿刺參攝食的活躍期。劉曉威等[19]對大連地區(qū)仿刺參池塘底棲硅藻初級生產(chǎn)狀況的周年變化研究發(fā)現(xiàn),池塘底棲硅藻初級生產(chǎn)力均值為(3.52±0.21) g/(m2·d),變化為1.12~7.63 g/(m2·d),最高值出現(xiàn)在8月,最低值出現(xiàn)在3—4月,春季底棲硅藻初級生產(chǎn)力隨著水溫上升有明顯升高的趨勢,秋季隨著水溫降低棲硅藻初級生產(chǎn)力逐漸下降。王吉橋等[20]研究發(fā)現(xiàn),仿刺參消化管的長度和蛋白酶、淀粉酶的活力具有周年變化特性,2月消化管長度達(dá)到峰值,是體長的4.6~5.9倍,蛋白酶和淀粉酶作為仿刺參的主要消化酶在4—5月酶活力達(dá)到最高值。對比幾種餌料對仿刺參消化管內(nèi)含物δ13C值的平均貢獻(xiàn)率發(fā)現(xiàn),不同月份中底棲硅藻的δ13C值最高,為25.8%~74.5%,其中,12月出現(xiàn)最低值。水溫接近0 ℃后,池塘中底棲硅藻的生物量降低[19],同時低溫影響了仿刺參攝食的活躍程度,導(dǎo)致底棲硅藻對消化管內(nèi)含物δ13C值的平均貢獻(xiàn)率出現(xiàn)最低值。此外,低溫雖然降低了仿刺參消化管中消化酶的活力,但消化管長與體長比較大[21],可能對仿刺參吸收同化消化管內(nèi)含物中底棲硅藻的能力影響不大。

    因此,在遼東灣地區(qū),穩(wěn)定和改善池塘底質(zhì)環(huán)境,提高底棲硅藻初級生產(chǎn)力,在春季、秋季仿刺參攝食活躍期和快速生長期進(jìn)行適當(dāng)餌料投喂,增加仿刺參有效攝食量,增強(qiáng)其免疫力,對池塘生態(tài)健康養(yǎng)殖仿刺參具有重要意義。為進(jìn)一步提高遼東灣海水池塘仿刺參養(yǎng)殖技術(shù)和池塘的養(yǎng)殖效益,還應(yīng)深入開展混養(yǎng)池塘仿刺參、混養(yǎng)生物的食性特征和餌料投喂策略研究,為海水池塘仿刺參的生態(tài)健康養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)。

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