銅和鎘對(duì)草魚腎臟中3種白細(xì)胞介素基因表達(dá)的影響

江紅霞，凌潔彬，葉凱甲，李學(xué)軍

( 河南師范大學(xué) 水產(chǎn)學(xué)院，河南 新鄉(xiāng) 453007 )

隨著工農(nóng)業(yè)的發(fā)展，大量的重金屬?gòu)U棄物流入河流、湖泊和水庫(kù)等水域中，對(duì)水域生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的污染。在水環(huán)境中，重金屬離子先富集于底泥中，然后被浮游生物富集，再通過(guò)食物鏈進(jìn)入魚體大量蓄積，并最終進(jìn)入人體，對(duì)人體的生長(zhǎng)發(fā)育造成危害，甚至危及人類的生命安全。為保護(hù)水生態(tài)環(huán)境，并最終保護(hù)人類的健康，研究重金屬對(duì)魚類的毒性作用具有非常重要的意義。重金屬銅(Cu)是魚類必需的微量元素之一，也是水產(chǎn)養(yǎng)殖中的常用藥物成分，但過(guò)量的銅又對(duì)魚類有毒害作用，會(huì)損傷魚類的神經(jīng)生理功能，破壞嗅覺(jué)器官的結(jié)構(gòu)以及內(nèi)分泌等[1-2]。重金屬鎘(Cd)是生物機(jī)體非必需元素之一，其毒性極強(qiáng)，痕量鎘的短期脅迫就可對(duì)魚類產(chǎn)生毒性效應(yīng)及其他生物學(xué)效應(yīng)，導(dǎo)致魚類各組織器官出現(xiàn)損害，從而對(duì)其生長(zhǎng)發(fā)育及生殖造成影響[3-4]。

草魚(Ctenopharyngodonidellus)是我國(guó)特有的淡水性魚類，為我國(guó)四大家魚之一，是人工養(yǎng)殖的主要種類之一，每年產(chǎn)量居于世界前列。目前有關(guān)草魚的研究主要集中在營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、轉(zhuǎn)基因抗病、人工繁殖、疾病防治等方面，有關(guān)養(yǎng)殖水環(huán)境重金屬污染對(duì)草魚的毒性效應(yīng)的研究也有較多報(bào)道[5-9]，但水環(huán)境重金屬銅和鎘對(duì)草魚免疫系統(tǒng)的破壞以及對(duì)其免疫基因表達(dá)的影響均未見(jiàn)報(bào)道。筆者主要研究水體中不同含量的Cu2+和Cd2+暴露對(duì)草魚腎臟組織中3種免疫基因——白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-8和白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)的影響，以期為研究重金屬對(duì)魚類的免疫毒性機(jī)制提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)魚購(gòu)自新鄉(xiāng)市水產(chǎn)市場(chǎng)，體長(zhǎng)(8.0±1.0) cm、體質(zhì)量(10.0±1.0) g，實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng)7 d后進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)容器為100 cm×50 cm×40 cm的200 L塑料水箱，每箱放水100 L，放魚10尾。試驗(yàn)期間使用小型增氧機(jī)增氧，溶解氧>9 mg/L，光暗周期為12L∶12D，水溫為(26±2) ℃，pH 7～8。每日投喂市售商品飼料1～2次，并及時(shí)清除殘餌及糞便。

1.2 重金屬處理

將分析純CuSO4·5H2O和CdCl2·2.5H2O用去離子水配制成1 g/L的母液。按照國(guó)家漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)中Cu2+的質(zhì)量濃度≤0.01 mg/L以及Cd2+的質(zhì)量濃度≤0.005 mg/L，重金屬Cu2+和Cd2+分別設(shè)置了5個(gè)質(zhì)量濃度梯度。Cu2+的質(zhì)量濃度梯度分別0.10、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/L(依次為國(guó)家漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)允許質(zhì)量濃度的10、20、40、60、80倍)；Cd2+的質(zhì)量濃度梯度分別為0.05、0.10、0.20、0.30、0.40 mg/L(依次為國(guó)家漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)允許質(zhì)量濃度的10、20、40、60、80倍)。對(duì)照組中不添加CuSO4·5H2O和CdCl2·2.5H2O，Cu2+和Cd2+的質(zhì)量濃度均以0.00 mg/L計(jì)。試驗(yàn)期間，日換水1次，使Cu2+和Cd2+的質(zhì)量濃度保持穩(wěn)定。并分別于暴露2、4、6 d和8 d后在每個(gè)處理組和對(duì)照組中隨機(jī)采集5尾試驗(yàn)魚，冰盤解剖，取出草魚完整的腎臟(包括頭腎和中腎)，液氮迅速冷凍后置于冰箱-80 ℃保存。

1.3 RNA提取

按試劑盒Total RNA kit Ⅱ(Omega 公司)的說(shuō)明書提取各處理組草魚腎臟組織的總RNA。利用NanoDrop 2000c微量紫外分光光度計(jì)(Thermo，美國(guó))測(cè)定RNA的含量和純度，并利用1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)RNA的完整性。

1.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR

使用PrimeScript?RT reagent Kit with gDNA Eraser(TaKaRa)試劑盒對(duì)各樣品的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。將反轉(zhuǎn)成的第一鏈cDNA置于-20 ℃保存。采用Primer Premier 5.0軟件設(shè)計(jì)用于實(shí)時(shí)熒光定量PCR的特異性引物(表1)，引物設(shè)計(jì)所依據(jù)的基因模板序列來(lái)源于美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心cDNA數(shù)據(jù)庫(kù)。以β-肌動(dòng)蛋白基因作為內(nèi)參基因，使用CFX96實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)系統(tǒng)(Bio-Rad，USA)和SYBR? Premix Ex TaqTMⅡ(TaKaRa，大連)試劑進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR。PCR反應(yīng)體系(25 μL)為：SYBR?Premix Ex Taq Ⅱ 12.5 μL，上、下游引物各1.0 μL，cDNA模板2.0 μL，ddH2O 8.5 μL。反應(yīng)程序?yàn)椋?5 ℃預(yù)變性30 s；95 ℃ 5 s，60 ℃ 30 s，共40個(gè)循環(huán)。每個(gè)樣本設(shè)置3個(gè)重復(fù)，依據(jù)2-ΔΔCt法分析試驗(yàn)樣本中3種白細(xì)胞介素基因的相對(duì)表達(dá)量。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示, 采用單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn), 利用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性水平設(shè)定為0.05。

表1 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列

注：引物名稱中IL為白細(xì)胞介素，β-actin為β-肌動(dòng)蛋白.

2 結(jié) 果

2.1 銅和鎘對(duì)草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)的影響

在0.80 mg/L Cu2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量顯著高于2 d暴露組(P<0.05)；在其他各質(zhì)量濃度的Cu2+暴露下，2、4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖1a)。在6 d時(shí)，0.40、0.60 mg/L暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在8 d時(shí)，0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在2、4 d時(shí)，各質(zhì)量濃度Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

在0.05 mg/L Cd2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量顯著高于4 d暴露組(P<0.05)；在0.20、0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量顯著高于2、4、6 d暴露組(P<0.05)；在0.10 mg/L Cd2+暴露下，2、4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖1b)。在6 d時(shí)，0.40 mg/L Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在8 d時(shí)，0.20、0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在2、4 d時(shí)，各質(zhì)量濃度Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

圖1 不同質(zhì)量濃度Cu2+和Cd2+暴露對(duì)草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β 基因表達(dá)的影響不同小寫字母代表同一暴露質(zhì)量濃度的不同暴露時(shí)間組之間差異顯著(P<0.05)，相同小寫字母表示差異不顯著(P>0.05)；*代表同一暴露時(shí)間的不同暴露質(zhì)量濃度組與對(duì)照組相比差異顯著(P<0.05).其他圖同.

2.2 銅和鎘對(duì)草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)的影響

在0.10 mg/L Cu2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量顯著高于2 d暴露組(P<0.05)；在0.40 mg/L Cu2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量顯著高于2、4、6 d暴露組(P<0.05)；在0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露下，4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量顯著高于2 d暴露組(P<0.05)；在0.20 mg/L Cu2+暴露下，2、4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖2a)。在4、6 d時(shí)，0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在8 d時(shí)，0.40、0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

在0.05 mg/L Cd2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量顯著高于4 d暴露組(P<0.05)；在0.10 mg/L Cd2+暴露下，6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量顯著高于2、4 d暴露組(P<0.05)；在0.20、0.30 mg/L Cd2+暴露下，6 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量顯著高于2、4 d暴露組(P<0.05)；在0.40 mg/L Cd2+暴露下，2、4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖2b)。在2、4 d時(shí)，0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在6、8 d時(shí)，0.05、0.10、0.20、0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

圖2 不同質(zhì)量濃度Cu2+和Cd2+暴露對(duì)草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)的影響

2.3 銅和鎘對(duì)草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)的影響

在0.60 mg/L Cu2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著高于2、4、6 d暴露組(P<0.05)；在0.80 mg/L Cu2+暴露下，6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著高于2 d暴露組(P<0.05)；0.10、0.20、0.40 mg/L Cu2+暴露下，2、4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖3a)。在6 d時(shí)，0.80 mg/L Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在8 d時(shí)，0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在2、4 d時(shí)，各質(zhì)量濃度Cu2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

圖3 不同質(zhì)量濃度Cu2+和Cd2+暴露對(duì)草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)的影響

在0.20 mg/L Cd2+暴露下，8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著高于2、4 d暴露組(P<0.05)；在0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露下，6 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量均顯著高于2、4、8 d暴露組(P<0.05)；在0.05、0.10 mg/L Cd2+暴露下，2、4、6、8 d暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量均無(wú)顯著差異(P>0.05)(圖3b)。在6、8 d時(shí)，0.20、0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；在2、4 d時(shí)，各質(zhì)量濃度Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

3 討 論

近年來(lái)，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)暴發(fā)性病害的相繼發(fā)生引起了養(yǎng)殖魚類的大規(guī)模死亡，造成了漁業(yè)生產(chǎn)的巨大經(jīng)濟(jì)損失。病害發(fā)生的原因之一就是工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中排放的大量污水使得養(yǎng)殖水域污染不斷加重，水環(huán)境質(zhì)量逐年惡化。因此，研究水體污染物包括水環(huán)境中的重金屬對(duì)養(yǎng)殖魚類的免疫毒性及其毒性機(jī)制，對(duì)養(yǎng)殖水環(huán)境保護(hù)和魚類病害防治均有重要的意義。腎臟是魚類重要的免疫器官，外界病原和污染物的刺激會(huì)使腎臟產(chǎn)生相應(yīng)的免疫細(xì)胞和免疫因子，從而對(duì)魚體進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。白細(xì)胞介素是魚體中的一類重要的免疫因子，它是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子，由于最初是由白細(xì)胞產(chǎn)生又在白細(xì)胞間發(fā)揮作用，所以由此得名。迄今，已發(fā)現(xiàn)有33種白細(xì)胞介素參與免疫調(diào)節(jié)、造血、炎癥反應(yīng)等過(guò)程[10]。近年來(lái)，白細(xì)胞介素作為魚類重要的免疫細(xì)胞因子，已得到廣泛研究，相繼在各種魚類中克隆得到了白細(xì)胞介素-1[11]、白細(xì)胞介素-2[12]、白細(xì)胞介素-4[13]、白細(xì)胞介素-8[14]和白細(xì)胞介素-10[15]的全長(zhǎng)基因，這些白細(xì)胞介素在魚類的免疫調(diào)節(jié)中均發(fā)揮著重要的作用。

3.1 草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因在銅和鎘脅迫下的表達(dá)變化

白細(xì)胞介素-1是在局部和全身炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵作用的細(xì)胞因子，是重要的炎癥和一般起始反應(yīng)的介質(zhì)，在級(jí)聯(lián)反應(yīng)中可調(diào)控其他細(xì)胞因子的表達(dá)。在哺乳動(dòng)物中已發(fā)現(xiàn)11種白細(xì)胞介素-1家族成員，包括白細(xì)胞介素-1α、白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-1ra、白細(xì)胞介素-18、白細(xì)胞介素-1F5和白細(xì)胞介素-33等[16]，但目前在魚類中只發(fā)現(xiàn)了白細(xì)胞介素-1β和白細(xì)胞介素-18[17]。本試驗(yàn)研究了Cu2+和Cd2+暴露對(duì)草魚腎臟白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)Cu2+和Cd2+暴露到第8 d時(shí)，0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露組、0.20、0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露組的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，說(shuō)明長(zhǎng)時(shí)間高質(zhì)量濃度的Cu2+和Cd2+暴露，對(duì)草魚的腎臟造成了一定的損傷，引起了草魚腎臟細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，其炎癥細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1β的基因表達(dá)量顯著升高，從而促進(jìn)腎臟細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)。

3.2 草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因在銅和鎘脅迫下的表達(dá)變化

白細(xì)胞介素-8是典型的促炎癥因子，也是一種CXC型趨化性細(xì)胞因子，對(duì)中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和T細(xì)胞有趨化作用，同時(shí)具有刺激血管生成、促有絲分裂和免疫調(diào)節(jié)等作用[18]。白細(xì)胞介素-8調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，對(duì)感染組織有一定的恢復(fù)作用[19]。本試驗(yàn)中，草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量在較高質(zhì)量濃度和較長(zhǎng)時(shí)間的Cu2+暴露下(0.40 mg/L，8 d;0.60 mg/L,4、6、8 d;0.80 mg/L,4、6、8 d)顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，而在Cd2+暴露下，在暴露時(shí)間較長(zhǎng)(6、8 d)時(shí)，各質(zhì)量濃度組的白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但在高質(zhì)量濃度Cd2+(0.30、0.40 mg/L)暴露下，在僅暴露2、4 d時(shí)，白細(xì)胞介素-8基因表達(dá)量就已顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。以上結(jié)果說(shuō)明，白細(xì)胞介素-8基因的表達(dá)對(duì)Cd2+的暴露要比對(duì)Cu2+的暴露更加敏感，這可能是由于Cd2+對(duì)草魚的毒性要比Cu2+強(qiáng)，Cd2+的暴露比Cu2+暴露對(duì)草魚腎臟的損傷更快更嚴(yán)重，從而引起草魚腎臟細(xì)胞更加靈敏的炎癥反應(yīng)。

3.3 草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因在銅和鎘脅迫下的表達(dá)變化

白細(xì)胞介素-10又稱細(xì)胞因子合成抑制因子，參與炎癥反應(yīng)并能緩解炎癥，對(duì)機(jī)體具有保護(hù)作用，在硬骨魚中具有免疫調(diào)節(jié)作用[20]。白細(xì)胞介素-10 mRNA的表達(dá)增加可抑制炎癥反應(yīng)，緩解炎癥疾病，有助于治療炎癥[21]。本試驗(yàn)中，高質(zhì)量濃度和長(zhǎng)時(shí)間的Cu2+暴露(0.60 mg/L,8 d；0.80 mg/L,6、8 d)，以及高質(zhì)量濃度(0.20、0.30、0.40 mg/L)和長(zhǎng)時(shí)間(6、8 d)的Cd2+暴露均使草魚腎臟中白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，這可能是腎臟細(xì)胞為了抑制和緩解Cu2+、Cd2+暴露對(duì)腎臟所造成的炎癥反應(yīng)而大量合成白細(xì)胞介素-10所致。

3.4 草魚腎臟中白細(xì)胞介素基因表達(dá)量與銅和鎘的脅迫時(shí)間的關(guān)系

在本研究中，在0.80 mg/L Cu2+，0.30、0.40 mg/L Cd2+暴露下的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量，以及在0.60、0.80 mg/L Cu2+暴露下的草魚腎臟中白細(xì)胞介素-8和白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量，均隨著暴露時(shí)間的增加而逐漸升高，在第8 d時(shí)達(dá)到最大值，且在第8 d時(shí)的基因表達(dá)量均顯著高于第2 d時(shí)(P<0.05)。這些結(jié)果說(shuō)明在高質(zhì)量濃度的Cu2+暴露下的白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-8和白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量，以及在高質(zhì)量濃度Cd2+暴露下的白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量，均與暴露時(shí)間呈現(xiàn)出一定的正相關(guān)關(guān)系，其表達(dá)量具有一定的時(shí)間依賴性。這可能是因?yàn)镃u2+和Cd2+暴露的時(shí)間越長(zhǎng)，草魚腎臟受到的損傷越嚴(yán)重，其炎癥反應(yīng)也越強(qiáng)烈，腎臟細(xì)胞產(chǎn)生的各種促炎癥因子和細(xì)胞因子合成抑制因子也越多。

4 結(jié) 論

總之，本研究利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR初步分析了草魚在水體銅和鎘脅迫下，其腎臟中的免疫細(xì)胞因子——白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-8和白細(xì)胞介素-10的基因表達(dá)量的變化，試驗(yàn)結(jié)果表明，高質(zhì)量濃度和長(zhǎng)時(shí)間的Cu2+和Cd2+暴露會(huì)使草魚腎臟中的白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-8和白細(xì)胞介素-10基因表達(dá)量顯著增加，且高質(zhì)量濃度的Cu2+暴露下的白細(xì)胞介素-1β、白細(xì)胞介素-8和白細(xì)胞介素-10以及高質(zhì)量濃度Cd2+暴露下的白細(xì)胞介素-1β基因表達(dá)量具有一定的時(shí)間依賴性。本研究結(jié)果為后續(xù)深入研究重金屬對(duì)魚類的免疫毒性機(jī)制，提高環(huán)境污染條件下的魚類抗病力奠定了基礎(chǔ)。