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    HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢與確證結(jié)果分析

    2019-03-27 02:48:16周昀楊新智周秋穎王建華孫玉萍楊政權(quán)
    關(guān)鍵詞:初篩艾滋病陽(yáng)性率

    周昀,楊新智,周秋穎,王建華,孫玉萍,楊政權(quán)

    (丹東市疾病預(yù)防控制中心,遼寧 丹東 118000)

    艾滋病是一種全球性的傳染性疾病,目前還沒(méi)有可以根治的藥物。由于人類免疫缺陷病毒(HIV)變異迅速,給疫苗的研制造成很大困難,嚴(yán)重威脅人類健康[1]。艾滋病檢測(cè)是艾滋病防治工作的重要組成部分,目前我國(guó)的艾滋病檢測(cè)策略是先初篩,再?gòu)?fù)檢,最后進(jìn)行確證。某艾滋病檢測(cè)確證實(shí)驗(yàn)室是一個(gè)地市級(jí)確證實(shí)驗(yàn)室,承擔(dān)了轄區(qū)內(nèi)疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)及采供血機(jī)構(gòu)艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢與確證工作。為探討HIV抗體復(fù)檢與確證試驗(yàn)結(jié)果之間的關(guān)系,了解本地區(qū)艾滋病檢測(cè)工作開(kāi)展情況,現(xiàn)將2011至2017年HIV抗體復(fù)檢和確證試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。

    1 材料與方法

    1.1 標(biāo)本 收集2011年1月至2017年10月轄區(qū)內(nèi)各艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室送檢的HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本及經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室初篩為陽(yáng)性的自愿咨詢檢測(cè)(VCT)標(biāo)本,共656份。

    1.2 復(fù)檢方法 初篩陽(yáng)性標(biāo)本分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法和膠體硒法進(jìn)行復(fù)檢。ELISA法采用珠海麗珠公司的HIV1+2型抗體診斷試劑,膠體硒法采用美艾利爾公司(Alere Inc)的膠體硒試劑。TECAN酶標(biāo)儀(Infinite F50)、TECAN洗板機(jī)(Hydro Flex)均為瑞士帝肯公司產(chǎn)品。

    1.3 確證試驗(yàn)方法 復(fù)檢試驗(yàn)均呈陽(yáng)性或一陰一陽(yáng)的標(biāo)本均進(jìn)行確證試驗(yàn),采用Western blot法。采用新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的HIV1+2型抗體免疫印跡試劑盒,試驗(yàn)所用試劑均在有效期內(nèi)使用,嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。試驗(yàn)結(jié)果按照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2009年、2015年修訂版)》進(jìn)行判定。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 收集數(shù)據(jù)采用Excel軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù),采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn),ELISA法確證陽(yáng)性標(biāo)本S/CO值與確證帶型相關(guān)性采用Goodman-Kruskal Gamma檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 復(fù)檢試驗(yàn)結(jié)果 656份HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本中,經(jīng)2種方法復(fù)檢均為陰性的標(biāo)本34份,初篩假陽(yáng)性率5.2%;622份標(biāo)本復(fù)檢陽(yáng)性,復(fù)檢陽(yáng)性率為94.8%。

    2.1.1 各年份HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢陽(yáng)性率比較 2011年1月至2017年10月各年份復(fù)檢陽(yáng)性率分別為 88.9%(64/72)、94.8%(55/58)、98.7%(75/76)、93.8%(106/113)、98.3%(115/117)、95.9%(116/121)、91.9%(91/99),但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=12.53,P=0.51)。

    2.1.2 不同來(lái)源HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本的復(fù)檢陽(yáng)性率比較 656份HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本中,4類不同來(lái)源HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本復(fù)檢陽(yáng)性率由高到低排列為VCT標(biāo)本、醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢標(biāo)本、縣區(qū)疾控送檢標(biāo)本、采供血機(jī)構(gòu)送檢標(biāo)本,復(fù)檢陽(yáng)性率依次為 100%(127/127)、96.8%(394/407)、96.6%(56/58)、70.3%(45/64),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=88.774,P<0.05)。

    2.2 確證試驗(yàn)結(jié)果 對(duì)490份信息齊全受檢者標(biāo)本進(jìn)行確證試驗(yàn),確證陽(yáng)性標(biāo)本450份(91.8%),陰性 11份(2.3%),不確定 29份(5.9%)。

    2.2.1 各年份HIV抗體復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本確證結(jié)果 2011年1月至2017年10月各年份HIV抗體復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本確證陽(yáng)性率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=17.95,P=0.117),見(jiàn)表1。

    表1 各年份HIV抗體復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本確證結(jié)果[n(%)]

    2.2.2 不同來(lái)源HIV抗體復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本確證結(jié)果 4類不同來(lái)源HIV抗體復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本確證陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=101.76,P<0.01),見(jiàn)表2。

    表2 不同來(lái)源HIV抗體復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本確證結(jié)果[n(%)]

    2.3 復(fù)檢試驗(yàn)與確證試驗(yàn)結(jié)果比較

    2.3.1 2種復(fù)檢方法各自確證陽(yáng)性率比較 490份做HIV抗體確證檢測(cè)的初篩陽(yáng)性標(biāo)本中,ELISA法復(fù)檢陽(yáng)性的488份,經(jīng)確證陽(yáng)性450份,陰性11份,不確定27份,確證陽(yáng)性率為92.2%;膠體硒法復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本454份,確證陽(yáng)性450份,不確定4份,沒(méi)有確證陰性結(jié)果,確證陽(yáng)性率為99.1%。2種方法確證陽(yáng)性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=31.22,P<0.01)。

    2.3.2 2種復(fù)檢方法確證試驗(yàn)結(jié)果 2種復(fù)檢方法均為陽(yáng)性的標(biāo)本452份,確證陽(yáng)性率為99.6%(450/452);2例不確定標(biāo)本經(jīng)4周后復(fù)查帶型均有進(jìn)展,可確證為陽(yáng)性。2種復(fù)檢方法結(jié)果一陰一陽(yáng)的標(biāo)本38份,沒(méi)有確證陽(yáng)性結(jié)果,其中不確定27份標(biāo)本因未全部進(jìn)行跟蹤隨訪,本文不進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。見(jiàn)表3。

    表3 2種復(fù)檢方法(ELISA/膠體硒法)確證試驗(yàn)(Western blot法)結(jié)果[n(%)]

    2.3.3 488份ELISA法S/CO值與確證結(jié)果的關(guān)系 將ELISA法復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本按照其S/CO值大小分為3組,S/CO值>6組與3≤S/CO值≤6組、1≤S/CO值<3組的確證陽(yáng)性率比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=96.33、301.15,P<0.01),見(jiàn)表4。

    表4 488份ELISA法S/CO值與確證試驗(yàn)(Western blot法)結(jié)果的關(guān)系[n(%)]

    2.3.4 450份ELISA法確證陽(yáng)性標(biāo)本S/CO值與確證陽(yáng)性條帶數(shù)量的關(guān)系 將ELISA法確證陽(yáng)性標(biāo)本按照其S/CO值大小分為3組,統(tǒng)計(jì)出現(xiàn)條帶數(shù)量,經(jīng)Goodman-Kruskal Gamma方法(簡(jiǎn)稱Gamma法)數(shù)據(jù)分析差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=109.24,P<0.01),Gamma系數(shù)為0.788,見(jiàn)表5。

    表5 450份ELISA法確證陽(yáng)性標(biāo)本S/CO值與確證帶型相關(guān)性[n(%)]

    3 討論

    3.1 復(fù)檢試驗(yàn)結(jié)果 從本研究結(jié)果可以看出,本地區(qū)各篩查實(shí)驗(yàn)室送檢的HIV抗體初篩陽(yáng)性標(biāo)本,復(fù)檢陽(yáng)性率較高(94.8%,622/656),2011至2017年10月各年份復(fù)檢陽(yáng)性率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示本地區(qū)各艾滋病檢測(cè)篩查實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)質(zhì)量較高,檢測(cè)水平發(fā)展平穩(wěn)。初篩假陽(yáng)性率為 5.2%(34/656),說(shuō)明通過(guò)復(fù)檢可以排除一些假陽(yáng)性標(biāo)本,從而降低確證試驗(yàn)的成本,也為患者減輕了心理負(fù)擔(dān)。

    3.2 復(fù)檢與確證試驗(yàn)結(jié)果的關(guān)系 2種復(fù)檢方法均為陽(yáng)性的452份標(biāo)本最終確證陽(yáng)性率高達(dá)99.6%(450/452),高于黎鋒等[2]和高賽珍等[3]報(bào)道的采用兩種ELISA法復(fù)檢的確證陽(yáng)性率,說(shuō)明采用ELISA法+膠體硒法進(jìn)行復(fù)檢可以大大提高確證陽(yáng)性率。膠體硒法確證陽(yáng)性率高于ELISA法,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可見(jiàn)膠體硒法的陽(yáng)性符合率高于ELISA法,后者更容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。在2種復(fù)檢方法一陰一陽(yáng)的38份標(biāo)本中,無(wú)論是膠體硒法陰性或是ELISA法陰性均有不確定結(jié)果的情況,需進(jìn)一步復(fù)查與隨訪,表明2種復(fù)檢方法均有漏檢的可能性,結(jié)合使用才能既減少假陽(yáng)性的產(chǎn)生,又可以有效地避免漏檢,這與王曉敏的報(bào)道[4]相符。

    3.3 ELISA法S/CO值與確證結(jié)果的關(guān)系 本研究中,488份ELISA法復(fù)檢陽(yáng)性標(biāo)本隨著S/CO值的增大確證陽(yáng)性率也越高,這與國(guó)內(nèi)的一些報(bào)道[5-8]一致。另?yè)?jù)文獻(xiàn)報(bào)道,全帶和次全帶的WB譜型表示HIV感染者處于HIV復(fù)制活躍時(shí)期[9-10],本研究S/CO值>6組出現(xiàn)全帶和次全帶所占比例最高(91.5%,389/425),3≤S/CO值≤6組和1≤S/CO值<3組條帶數(shù)量≤5條帶所占比例也明顯增大,經(jīng)數(shù)據(jù)分析提示兩者呈正相關(guān),確證條帶數(shù)量隨著ELISA法S/CO值增大而增加,提示較高S/CO值的樣品感染HIV的可能性較大,且病毒處于活躍期具有較強(qiáng)感染性的可能性也增大。但是,S/CO值>6組仍有1例確證為陰性,3≤S/CO值≤6組和1≤S/CO值<3組也有25例確證為陽(yáng)性,因此,不能僅憑S/CO值的大小判斷感染情況,必須進(jìn)一步做確證試驗(yàn)。

    3.4 不同來(lái)源標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果 4類不同來(lái)源標(biāo)本中,采供血機(jī)構(gòu)送檢標(biāo)本的復(fù)檢陽(yáng)性率(70.3%,45/64)和確證陽(yáng)性率(42.9%,12/28)均為最低,這與國(guó)內(nèi)的一些報(bào)道[11-12]一致。其中10份不確定標(biāo)本帶型以p24和p24+p17為主(80.0%,8/10),這應(yīng)該與本市采供血單位采用能檢測(cè)HIV-1 P24抗原的四代試劑有關(guān),根據(jù)《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2015年修訂版)》的要求,建議做P24抗原檢測(cè)或采用核酸檢測(cè)或2~4周后隨訪,以避免因處于抗體產(chǎn)生的窗口期而導(dǎo)致的漏檢,提高用血安全。

    綜上所述,由于膠體硒法陽(yáng)性符合率高于ELISA法,且試驗(yàn)操作簡(jiǎn)單方便快捷,可以優(yōu)先選擇,結(jié)果陽(yáng)性即可做確證試驗(yàn),結(jié)果陰性再用ELISA法復(fù)檢以避免漏檢。由于本實(shí)驗(yàn)室目前沒(méi)有開(kāi)展HIV核酸檢測(cè),針對(duì)采供血機(jī)構(gòu)的不確定結(jié)果標(biāo)本只能建議其2~4周后隨訪或去上級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè),建議應(yīng)盡快開(kāi)展相關(guān)檢測(cè)工作。

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