乳腺癌患者血清性激素、IGF-1、VEGF和組織LOX水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

邢海霞 趙明燕 郭勇

乳腺癌為我國(guó)常見(jiàn)惡性腫瘤，隨著大眾飲食結(jié)構(gòu)及生活習(xí)慣的改變，乳腺癌呈現(xiàn)發(fā)病年輕化趨勢(shì)[1]。淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移為乳腺癌轉(zhuǎn)移的主要途徑之一，轉(zhuǎn)移狀態(tài)是影響患者預(yù)后的重要因素[2]。故探析乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生的影響因素，有其必要性。近期有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者可發(fā)生不同程度性激素代謝紊亂，性激素水平與患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床特征具有一定相關(guān)性[3]。賴(lài)氨?；福╨ysyl oxidase，LOX）是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分，可氧化膠原蛋白及彈性蛋白上的特殊氨基酸殘基，對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)發(fā)育、成熟及維持其穩(wěn)定性具有重要作用。LOX與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[4]。另外，近年來(lái)，胰島素樣生長(zhǎng)因子1（insulin-like growth factor 1，IGF-1）、血管內(nèi)皮生 長(zhǎng) 因 子（vascular endothelial growth factor，VEGF）與惡性腫瘤的關(guān)系受到學(xué)術(shù)界廣泛關(guān)注，IGF-1可刺激乳腺癌細(xì)胞分裂，而增加其惡性程度及轉(zhuǎn)移潛力；VEGF則為刺激血管和淋巴微管形成的信號(hào)蛋白，可促進(jìn)惡性腫瘤細(xì)胞增殖[5]?；诖?，本研究回顧性分析駐馬店市中心醫(yī)院86例行手術(shù)治療的乳腺癌患者臨床資料，以評(píng)估組織LOX表達(dá)情況、血清性激素及IGF-1、VEGF水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性，為臨床盡早診治乳腺癌提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2015年2月至2017年12月我院86例行手術(shù)治療的乳腺癌患者臨床資料，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者44例（轉(zhuǎn)移組），無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者42例（無(wú)轉(zhuǎn)移組），并將同期入院的40例乳腺良性腫瘤患者納入良性組。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)手術(shù)病理學(xué)檢查確診為乳腺癌或乳腺良性腫瘤者；年齡為18～65歲者；臨床資料完整者。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴嚴(yán)重感染、糖尿病等手術(shù)禁忌證者；既往放化療或激素治療者；合并其他惡性腫瘤者；妊娠或哺乳期婦女。3組患者均為女性。轉(zhuǎn)移組年齡40～63歲，平均（51.15±9.65）歲；體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）18～24 kg/m2，平均（21.68±2.05）kg/m2。無(wú)轉(zhuǎn)移組年齡 41～63歲，平均（50.84±9.17）歲；BMI 19～24 kg/m2，平均（21.92±1.94）kg/m2。良性組年齡 40～62歲，平均（50.22±9.36）歲；BMI 18～24 kg/m2，平均（22.04±2.11）kg/m2。3 組年齡、BMI等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 研究方法

轉(zhuǎn)移組及無(wú)轉(zhuǎn)移組乳腺癌患者均行改良乳腺癌根治術(shù)，良性組患者均予以弧形切口切除手術(shù)治療。于術(shù)前，使用化學(xué)發(fā)光免疫法檢測(cè)3組血清雌二醇（estradiol，E2）、睪酮（testosterone，T）、孕酮（progesterone，P）水平；使用酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)3組血清IGF-1、VEGF水平；通過(guò)灌膠、電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉后加抗體檢測(cè)LOX在乳腺癌患者乳腺癌組織及良性組良性病變組織中表達(dá)情況，并利用發(fā)光法以目的條帶面積灰度值做半定量檢測(cè)LOX相對(duì)表達(dá)量。

1.3 試劑及儀器

化學(xué)發(fā)光免疫法試劑購(gòu)自德國(guó)羅氏公司；酶聯(lián)免疫分析法試劑購(gòu)自美國(guó)R&D公司；LOX抗體試劑購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；化學(xué)發(fā)光儀購(gòu)自德國(guó)羅氏公司；酶標(biāo)儀購(gòu)自澳大利亞博賽生物公司。

1.4 觀察指標(biāo)

3組患者術(shù)前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF 水平及組織（乳腺癌患者取乳腺癌組織、良性組取良性病變組織）LOX相對(duì)表達(dá)量和術(shù)后4周時(shí)血清IGF-1、VEGF水平差異，同時(shí)分析乳腺癌患者術(shù)前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平、組織LOX相對(duì)表達(dá)量與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理用SPSS 19.0軟件，計(jì)量資料以表示，多組間比較使用多因素方差分析，2組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性分析使用Spearman相關(guān)性分析法；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組術(shù)前血清血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及組織LOX相對(duì)表達(dá)量比較

3組術(shù)前血清T水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；而血清E2、P、IGF-1、VEGF水平及組織LOX相對(duì)表達(dá)量比較，均為轉(zhuǎn)移組高于無(wú)轉(zhuǎn)移組及良性組（P＜0.05），且無(wú)轉(zhuǎn)移組高于良性組（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 3組術(shù)前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及組織LOX相對(duì)表達(dá)量比較（±s）Table 1 Comparison of preoperative serum levels of E2，T，P，IGF-1，VEGF and relative expression level of tissue LOX in the 3 groups（± s）

表1 3組術(shù)前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及組織LOX相對(duì)表達(dá)量比較（±s）Table 1 Comparison of preoperative serum levels of E2，T，P，IGF-1，VEGF and relative expression level of tissue LOX in the 3 groups（± s）

與轉(zhuǎn)移組比較，aP＜0.001；與無(wú)轉(zhuǎn)移組比較，bP＜0.001。

組別轉(zhuǎn)移組無(wú)轉(zhuǎn)移組良性組n 44 42 40 F P E2（pg/mL）210.41±15.49 175.22±12.36a 93.45±10.17ab 17.452 0.000 T（ng/dL）50.78±9.45 52.47±9.12 52.98±9.09 1.743 0.214 P（ng/mL）0.39±0.05 0.32±0.06a 0.28±0.04ab 9.476 0.000 IGF-1（ng/mL）232.54±19.47 153.78±15.46a 114.26±10.69ab 22.652 0.000 VEGF（pg/mL）229.45±18.72 189.74±17.46a 134.26±14.33ab 19.869 0.000 LOX相對(duì)表達(dá)量0.65±0.12 0.41±0.10a 0.15±0.04ab 26.874 0.000

2.2 轉(zhuǎn)移組及無(wú)轉(zhuǎn)移組手術(shù)前后血清IGF-1、VEGF水平比較

術(shù)前，無(wú)轉(zhuǎn)移組血清IGF-1、VEGF水平低于轉(zhuǎn)移組（P＜0.05）；術(shù)后4周時(shí)，2組血清 IGF-1、VEGF水平均較術(shù)前降低（P＜0.05），且無(wú)轉(zhuǎn)移組仍低于轉(zhuǎn)移組（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 2組手術(shù)前后血清IGF-1、VEGF水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum IGF-1 and VEGF levels before and after operation in the 2 groups（± s）

表2 2組手術(shù)前后血清IGF-1、VEGF水平比較（±s）Table 2 Comparison of serum IGF-1 and VEGF levels before and after operation in the 2 groups（± s）

組別n t P t P轉(zhuǎn)移組無(wú)轉(zhuǎn)移組44 42 27.284 26.581 0.000 0.000 12.888 14.821 0.000 0.000 t P IGF-1（ng/mL）術(shù)前232.54±19.47 153.78±15.46 20.712 0.000術(shù)后160.23±15.69 101.26±10.15 20.587 0.000 VEGF（pg/mL）術(shù)前229.45±18.72 189.74±17.46 10.161 0.000術(shù)后195.41±16.32 152.36±15.23 12.633 0.000

2.3 乳腺癌患者術(shù)前血清E2、T、P、IGF-1、VEGF水平及組織LOX與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

將乳腺癌轉(zhuǎn)移定義為1，無(wú)轉(zhuǎn)移定義為0，經(jīng)Spearman相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)乳腺癌患者血清T及P水平與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)相關(guān)性（P＞0.05），而血清E2、IGF-1、VEGF水平、乳腺癌組織LOX相對(duì)表達(dá)量與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)（P＜0.05），見(jiàn)表3。

表3 乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析（n=86）Table 3 Correlation analysis of lymph node metastasis in breast cancer（n=86）

3 討論

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移在乳腺癌中發(fā)生率較高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移不僅影響手術(shù)療效，亦是導(dǎo)致患者預(yù)后不良的重要因素[6]。目前，臨床診斷乳腺癌患者是否發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，多通過(guò)電子計(jì)算機(jī)斷層掃描（computed tomography，CT）、鉬靶等影像學(xué)檢查，均可出現(xiàn)一定漏診及誤診[7]。影像學(xué)檢查常造成不同程度輻射損傷，使其使用受到一定限制。故利用血清學(xué)指標(biāo)篩選出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較高者，對(duì)其予以重點(diǎn)監(jiān)測(cè)，受到學(xué)術(shù)界廣泛關(guān)注。

乳腺癌病因與遺傳基因缺損、內(nèi)源性性激素-免疫激素-細(xì)胞基因受體等生理病理變化有關(guān)，其中內(nèi)源性性激素可促進(jìn)乳腺局部E2合成增多，E2具有刺激乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞增生等作用，可提高乳腺癌細(xì)胞增殖能力及轉(zhuǎn)移潛力[8]。故乳腺癌患者血清E2水平與其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能存在相關(guān)性。T、P等性激素能刺激乳腺細(xì)胞增殖，并促進(jìn)乳腺上皮組織內(nèi)生長(zhǎng)因子合成，與乳腺癌惡性程度具有一定聯(lián)系[9]。外國(guó)學(xué)者[10]研究發(fā)現(xiàn)，血清T水平與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)呈正相關(guān)。而本研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)移組血清E2、P水平均高于無(wú)轉(zhuǎn)移組及良性組，但3組T水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示E2、P能通過(guò)性激素代謝等生理病理反應(yīng)，使乳腺癌細(xì)胞增殖，并增加淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率。血清T水平則對(duì)乳腺癌增殖及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等情況影響較小，與上述外國(guó)學(xué)者研究結(jié)果不同?？紤]造成該結(jié)果的原因有人種差異、內(nèi)分泌代謝不同或檢驗(yàn)方法不一致。

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，LOX可參與胃癌、乳腺癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展，并推測(cè)其原因可能為L(zhǎng)OX異常表達(dá)使細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)及功能異常，進(jìn)而破壞腫瘤轉(zhuǎn)移的生理屏障，達(dá)到促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的作用[11]。而本研究也發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)移組乳腺癌組織LOX相對(duì)表達(dá)量顯著高于無(wú)轉(zhuǎn)移組，且轉(zhuǎn)移組及無(wú)轉(zhuǎn)移組的組織LOX相對(duì)表達(dá)量均高于良性組的良性病變組織，與上述報(bào)道結(jié)果一致。然而，組織LOX表達(dá)情況需要通過(guò)病理活檢檢出，在術(shù)前評(píng)估中受到一定限制。但也有學(xué)者指出，仍可利用術(shù)后病理組織檢查L(zhǎng)OX表達(dá)情況等方式，分析惡性腫瘤情況發(fā)展?fàn)顟B(tài)，對(duì)手術(shù)效果及患者預(yù)后情況作出預(yù)測(cè)[12]。

另外，日本學(xué)者 Mahdavi等[13]指出，IGF-1 不僅能作用于乳腺細(xì)胞基質(zhì)，還能刺激乳腺癌患者雌激素活性，同時(shí)促進(jìn)卵巢功能興奮，使機(jī)體雌激素水平升高，并與雌激素產(chǎn)生協(xié)同作用，以促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖，提高其轉(zhuǎn)移潛能。本研究結(jié)果也顯示，轉(zhuǎn)移組術(shù)前血清IGF-1水平高于無(wú)轉(zhuǎn)移組和良性組，與上述學(xué)者研究結(jié)果一致。說(shuō)明血清IGF-1在惡性腫瘤增殖中具有重要作用，能通過(guò)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞增殖等方式，刺激癌細(xì)胞淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，進(jìn)而影響患者預(yù)后。不僅如此，大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，VEGF不僅能導(dǎo)致乳腺組織血管增生，還能刺激癌周?chē)g質(zhì)淋巴管增生擴(kuò)張，而促進(jìn)癌細(xì)胞進(jìn)入淋巴管，引起淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[14]。本研究中，轉(zhuǎn)移組術(shù)前血清VEGF水平高于無(wú)轉(zhuǎn)移組及良性組，且無(wú)轉(zhuǎn)移組血清VEGF水平高于良性組，與學(xué)術(shù)界研究結(jié)果一致[15]。這也初步證實(shí)，VEGF在乳腺癌轉(zhuǎn)移中具有重要作用。提示血清VEGF水平較高的乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較高，術(shù)后存在一定腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等風(fēng)險(xiǎn)，可造成患者預(yù)后不良。術(shù)后2組IGF-1、VEGF水平較術(shù)前降低，但無(wú)轉(zhuǎn)移組仍低于轉(zhuǎn)移組。分析其原因可能與手術(shù)雖然能降低IGF-1、VEGF表達(dá)，但伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者術(shù)后存在較大的腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，使IGF-1和VEGF仍然高表達(dá)有關(guān)。

除上述結(jié)論外，本研究還發(fā)現(xiàn)，血清E2、IGF-1、VEGF水平、乳腺癌組織LOX相對(duì)表達(dá)量與乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈顯著正相關(guān)。該結(jié)果機(jī)制可能為：血清E2、IGF-1能通過(guò)協(xié)同刺激乳腺癌細(xì)胞增殖，提高其惡性程度及轉(zhuǎn)移潛力[16]；血清VEGF增加能同時(shí)刺激乳腺癌細(xì)胞增生、間質(zhì)淋巴管擴(kuò)張，使乳腺癌患者出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[17]；乳腺癌組織LOX的高表達(dá)可影響細(xì)胞外基質(zhì)功能，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞遷移，而刺激病情進(jìn)展，增加淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)[18]。因此，臨床在乳腺癌患者治療前，可通過(guò)檢測(cè)其血清E2、IGF-1、VEGF水平，觀察其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，并聯(lián)合手術(shù)組織病理檢測(cè)乳腺癌組織LOX表達(dá)水平，綜合評(píng)估患者病情，預(yù)測(cè)患者預(yù)后。

綜上所述，乳腺癌患者血清E2、IGF-1、VEGF水平、乳腺癌組織LOX表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)，臨床可根據(jù)血清E2、IGF-1、VEGF水平及乳腺癌組織LOX表達(dá)水平評(píng)估患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病情進(jìn)展情況，預(yù)測(cè)患者術(shù)后恢復(fù)狀況。