自家高免血清防治羊痘病毒性疾病

程志鵬，盧曉麗，田孟芳，趙彥玲，孫 磊，任子利

（西藏農(nóng)牧學(xué)院 動物科學(xué)學(xué)院，西藏 林芝 860000）

綿羊是我國重要的畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)來源，對于西藏自治區(qū)來說綿羊是牧民們的重要生活來源。羊的相關(guān)疾病也威脅著西藏同胞們的生命及財產(chǎn)安全，尋找有效的治療手段可以減少牧民的經(jīng)濟(jì)損失。

早在公元前一世紀(jì)羊痘就被公之于眾，它是一種古老的動物疫病，直到1902年Borrel成功鑒定出綿羊痘的病原是由病毒而引發(fā)，31年后將綿羊痘病毒在體外培養(yǎng)成功[1]。羊痘在羊群中是一種傳染性強的疾病，通?；佳蚨徊〉难蛑粡钠つw表面開始出現(xiàn)臨床癥狀，首先皮膚產(chǎn)生化膿性的膿包，當(dāng)膿包破裂病毒會在羊群中大量傳播，其最顯著特征為綿羊皮膚表面或粘膜處出現(xiàn)痘疹，同時患病羊只會發(fā)熱，由于綿羊痘病是由綿陽痘病毒所引發(fā)的一類接觸性、急性、熱性的傳染病，所以通常羊只發(fā)熱會非常迅速[2]不僅影響著羊群的生命安全，由于降低羊群免疫力的特點羊痘病還會降低羊的生產(chǎn)力[3]。羊痘病也是一種人畜共患病，人如果接觸到羊只身上破損的膿包或其污染物會被傳染。目前我國采用固定時間對羊群進(jìn)行羊痘疫苗注射，通常為春秋兩季節(jié)無論成年羊還是幼年羊統(tǒng)一處理，但是每年依舊會有大量的羊群患羊痘病，其原因為：注射疫苗時出現(xiàn)漏針現(xiàn)象，注射疫苗治療無法得到保證，牧民存在僥幸心理未對羊群進(jìn)行疫苗注射等原因。羊痘病一旦在羊群中發(fā)現(xiàn)其發(fā)病速度很快，一般通過對其進(jìn)行藥物治療治愈率不高，同時會增加經(jīng)濟(jì)成本。

目前，自家高免血清應(yīng)用廣泛，通常應(yīng)用于對犬瘟、犬類細(xì)小病毒的治療，細(xì)小在犬類中具有很高的致死率，常致其嘔吐、腹瀉最終導(dǎo)致病犬失水、器官功能衰竭造成死亡[4]。自家血能夠高效的中和犬類體內(nèi)的病毒，增強治愈能力并縮短療程[5]。畜禽類的應(yīng)用也頗為廣泛，涂宜強[6]等人利用高免血清對豬的流行性腹瀉進(jìn)行治療，蘆俊鑫等人針對豬瘟利用豬瘟高免血清進(jìn)行了防治[7]；譚毅[8]通過藥物配合自家血的治療對患病毒性腫頭出血癥的鴨子進(jìn)行診治。其在綿羊上的應(yīng)用也早有先例，本次針對羊痘病毒的應(yīng)用對患病羊只進(jìn)行臨床治療，取得了很好的效果同時也降低了成本，為綿羊羊痘病的治療提供參考依據(jù)。

1 自血療法的操作方法

自血療法一般是指直接抽取靜脈血在不添加抗凝劑的情況下立即注射于穴位，常被用于治療人類的皮膚性疾病，Hashida S等人也曾用其治療人類免疫系統(tǒng)疾病[9]。在對患羊痘病的病羊進(jìn)行自血療法前，由于自愈個體有限，患病個體較多為了減少個體間的排異反應(yīng)，所以要對血清進(jìn)行滅活處理，選取好指定的家畜后對指定采血部位進(jìn)行剪毛處理，對采血針頭注射器等進(jìn)行嚴(yán)格消毒，采集好靜脈血后提取血清對其加入雙抗保證無菌即可使用，以上過程均在無菌條件下操作，以免發(fā)生污染。由于牛血易凝固，可在注射器中加入抗凝劑減緩血液凝固。

2 綿羊發(fā)病情況

杜泊羊群，月齡3個月，共確診患病8頭平均體重為35 kg，雌性。毛管粗糙身體瘦弱，眼睛半閉，臉部、皮膚表皮、尾部有大面積丘疹，且有明顯發(fā)熱現(xiàn)象，停止采食及飲水，無活力。

3 治療

3.1 采集血清用羊的選擇

通過自然感染的方式被羊痘病毒感染，觀察其癥狀明顯經(jīng)調(diào)查后確診為羊痘病的綿羊，在未治療的條件下出現(xiàn)自愈，采食、飲水、精神狀態(tài)恢復(fù)正常后觀察發(fā)現(xiàn)綿羊臉部及身體表面的水泡已經(jīng)出現(xiàn)結(jié)痂現(xiàn)象，此時其體內(nèi)的血清抗體有很高的效價。在對血清用羊進(jìn)行選擇時要優(yōu)先考慮體溫、大小便正常的羊只，同時未患其他疾病。

3.2 相關(guān)采集器材

塑膠手套、剪刀、口罩、防化服、鞋套、消毒液（75%酒精、5%碘酒）、消毒棉球、10 ml采血針、塑料瓶、低溫冰箱、玻璃注射器、離心管、恒溫箱。

3.3 自家高免血清的制作

對采血羊只進(jìn)行頸部消毒后抽血，將采集好的血液裝入低溫冰箱中進(jìn)行保存；將裝有血液的針管靜止倒放于準(zhǔn)備好的塑料瓶中并放入恒溫箱中，保持溫度32℃靜置6～8 h后讓血液自然凝集后將上層清液推入離心管中，對上層清液進(jìn)行離心后即得到血清，用消毒過的玻璃注射器將離心好的血清抽出，對血清進(jìn)行滅活后將其分瓶裝入無菌的玻璃瓶內(nèi)100 ml后向玻璃瓶內(nèi)注射10萬單位的鏈霉素及青霉素，將玻璃瓶密封存好。

3.4 高免血清的檢測

3.4.1 無菌測試 將做好的高免血清取1 ml分別滴于普通培養(yǎng)基中，放在恒溫培養(yǎng)箱中溫度控制在37℃，培養(yǎng)30 h后觀察有無細(xì)菌生長，若無細(xì)菌則說明血清無菌。

3.4.2 血清安全檢測 隨機(jī)抽取同群健康羊只進(jìn)行10 ml高免血清注射，觀察其生理狀況綿羊健康無異常則血清安全。

3.5 對患病羊群進(jìn)行注射

根據(jù)患病個體的患病情況進(jìn)行注射，一般來說患病羊只病情越重所注射血清量越多反之則越少，為了避免刺激過度造成個體病情惡化[10]，其次根據(jù)羊的體重注射，大羊注射10 ml血清，小羊注射3～5 ml血清，采取注射兩天每天注射一次的辦法進(jìn)行治療[11]。

3.6 觀察血清作用

凡注射血清后的羊只在1～3 d出現(xiàn)明顯好轉(zhuǎn)，開始自然采食、飲水，皮膚及尾下丘疹變色結(jié)痂，此表現(xiàn)為血清起到很好的治療作用，觀察7～8 d后羊毛毛管開始變亮可認(rèn)為痊愈。

4 體會與總結(jié)

4.1 自家血的免疫學(xué)依據(jù)

當(dāng)高免血清注入到皮下或深入粘膜后單核-巨勢細(xì)胞系統(tǒng)會受到被破壞的紅細(xì)胞的刺激，從而增強自身的活性，活性增強其吞噬作用也得到了增強，使得對外免疫的能力得到了提升，將高免血清點射到化膿創(chuàng)口處周圍能夠在創(chuàng)傷附近快速產(chǎn)生屏障免疫外來病毒，不但可以在創(chuàng)口處產(chǎn)生抗毒屏障也能促進(jìn)傷口肉芽的生長促進(jìn)傷口愈合[12]。

4.2 治愈效果

臨床治療中有8頭綿羊確診為羊痘，治療中有一頭出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，筆者認(rèn)為錯過了最佳治療時間從而延誤病情。

4.3 發(fā)現(xiàn)患病羊只應(yīng)采取的措施

發(fā)現(xiàn)患病羊后應(yīng)立即將病羊與羊群隔離，且隔離區(qū)應(yīng)與羊群保持距離，確保羊群無法與病羊及其污染物接觸，將病羊分離出后應(yīng)立即對羊舍進(jìn)行噴霧消毒并對未感染羊群進(jìn)行羊痘苗注射，同時對羊舍進(jìn)行生石灰鋪灑和液體消毒噴霧[13]。

4.4 疫情高發(fā)原因

在羊群高發(fā)季節(jié)應(yīng)保證羊圈的通風(fēng)及其干濕度，對于溫度的較低的季節(jié)，既要保證通風(fēng)同時也應(yīng)保障羊舍的溫度在一定范圍避免溫濕度變化過快使羊群免疫力降低,患病羊群的相互密切接觸和呼吸道的傳播是導(dǎo)致疾病迅速傳播的主要原因，氣溫變化過快、育肥不到位、羊群應(yīng)激會對該疾病有促使作用[14]，增加患病幾率。

4.5 注意事項

采集自家高免血清時每一道程序需經(jīng)過嚴(yán)格消毒，確保采集樣品無菌，對血清加入雙抗前確保血液無菌滅活，發(fā)現(xiàn)患病羊只及時隔離。發(fā)現(xiàn)疫情要盡快利用高免血清進(jìn)行治療，時間要快不能拖延，最佳的治療時間在發(fā)病的初期，由于自家高免學(xué)清具有較高的兼容性，所以它可與其它治療性的藥物配合使用[15]。