循環(huán)腫瘤細(xì)胞數(shù)量及分型檢測(cè)在腎癌療效評(píng)價(jià)中的作用

王振龍，張 鵬，薛玉泉，張亞萍，楊小杰，薛 力，李和程，李洪亮，劉文聘，種 鐵

(西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院泌尿外科，陜西西安 710004)

腎癌(renal cell carcinomar，RCC)是泌尿系統(tǒng)常見(jiàn)腫瘤，發(fā)病率逐年上升，每年增長(zhǎng)約2%～4%，即使手術(shù)治療，術(shù)后仍有約20%～40%的患者出現(xiàn)疾病進(jìn)展，5年生存率僅有11%[1-2]。尋找合適的評(píng)價(jià)腎癌治療效果的方法，實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)腎癌治療后的轉(zhuǎn)歸，對(duì)腎癌治療后的疾病進(jìn)展做到早發(fā)現(xiàn)早治療意義重大。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(circulating tumor cells，CTCs)是實(shí)體瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶釋放進(jìn)入外周循環(huán)血中的腫瘤細(xì)胞，被認(rèn)為是腫瘤轉(zhuǎn)移的“種子”。研究表明，CTCs與多種腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)顯著相關(guān)[3-4]。我們前期研究也發(fā)現(xiàn)了CTCs數(shù)量及分型檢測(cè)具有評(píng)估腎癌進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)的作用[5]。CTCs數(shù)量及分型檢測(cè)能否作為評(píng)價(jià)腎癌療效的早期、敏感的方法，值得深入研究。

1 資料與方法

1.1 臨床資料入組患者為2015年6月至2016年9月西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院收治的47例腎癌患者，均經(jīng)病理學(xué)確診且既往未經(jīng)任何治療。年齡47～82歲，平均 64.5 歲；男性33例，女性14例；TNM 分期采用國(guó)際抗癌聯(lián)盟2003年制定的標(biāo)準(zhǔn)：T1期 34 例，T2期 10 例，T3期 3 例，無(wú)T4期病例；手術(shù)方式：根治性腎切除術(shù)10例，腎部分切除術(shù)37例；術(shù)后病理診斷：腎透明細(xì)胞癌45例，乳頭狀細(xì)胞癌2例。本研究通過(guò)了西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核，標(biāo)本的采集和檢測(cè)均經(jīng)患者知情同意。

1.2 監(jiān)測(cè)與隨訪所有患者行術(shù)前檢查并進(jìn)行CTCs檢測(cè)，術(shù)中記錄腫瘤分級(jí)分期等信息，術(shù)后每3個(gè)月復(fù)查一次，檢查項(xiàng)目包括，胸部、上腹部及雙腎計(jì)算機(jī)斷層掃描(computed tomography，CT)平掃或增強(qiáng)(懷疑有轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)患者加做增強(qiáng)CT)檢測(cè)評(píng)估腫瘤有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；外周血CTCs檢測(cè)，包括CTCs數(shù)量及分型檢測(cè)，分別得到CTCs總數(shù)及上皮型、混合型、間質(zhì)型CTCs數(shù)量，并計(jì)算間質(zhì)型CTCs比例(間質(zhì)型CTCs數(shù)量/CTCs總數(shù))。腎癌轉(zhuǎn)移患者在給予治療前及治療后1月增加外周血CTCs分型檢測(cè)，后續(xù)常規(guī)復(fù)查每3個(gè)月1次，均完成至少1年隨訪。

1.3 研究分組按以下方案進(jìn)行分組：①影像學(xué)發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者，按進(jìn)行治療(包括切除轉(zhuǎn)移灶或靶向治療)和未予治療分組，比較CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例在2組患者中的差異，評(píng)價(jià)CTCs分型檢測(cè)對(duì)轉(zhuǎn)移腎癌療效評(píng)價(jià)的作用。②CTCs呈進(jìn)展趨勢(shì)的患者(不論影像學(xué)是否發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶)，按進(jìn)行分子靶向治療和未進(jìn)行靶向治療分組，比較CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例在2組患者中的差異，評(píng)價(jià)分子靶向治療對(duì)CTCs數(shù)量及分型的作用。

1.4 分子靶向治療方案分子靶向藥物治療用藥及輔助治療用藥，均選擇索拉非尼0.8 g/d口服。

1.5 外周血CTCs數(shù)量及CTCs分型檢測(cè)方法(納米膜過(guò)濾、RNA原位雜交法)

1.5.1樣本采集 使用8號(hào)采血針和乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝采血管采集7.5 mL外周血。將樣本保存管插入孔內(nèi)，使孔中針頭刺穿樣本保存管橡膠塞，EDTA抗凝采血管內(nèi)的血液將自動(dòng)輸入樣本保存管內(nèi)。待樣本保存管內(nèi)的液面不再上升后，拔出樣本保存管，上下顛倒混勻10次，室溫放置30 min。

1.5.2CTCs的分離富集 離心去除上清，固定劑固定8 min。通過(guò)真空歧管將過(guò)濾器與真空泵連接，將樣本保存管中的液體轉(zhuǎn)移至納米膜過(guò)濾器中，甲醛溶液室溫固定60 min。

1.5.3上皮型、混合型、間質(zhì)型CTCs的分型鑒定 固定后的樣本進(jìn)行探針雜交CTCs分型鑒定。透化劑孵育5 min，磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline，PBS)洗滌3次。消化酶孵育60 min，PBS洗滌3次。加入探針工作液，(40±1)℃孵育3 h，洗滌3次。加入預(yù)擴(kuò)增工作液，(40±1)℃孵育30 min，洗滌3次。加入擴(kuò)增工作液，(40±1)℃孵育30 min，洗滌3次。加入顯色工作液，(40±1)℃孵育30 min，洗滌3次，在樣本上加抗淬滅劑(含DAPI)。

CTCs分型檢測(cè)技術(shù)采用多重RNA探針，分別針對(duì)上皮型CTCs特異性基因EpCAM、CK8、CK18、CK19，間質(zhì)型CTCs特異性基因Vimentin、Twist進(jìn)行檢測(cè)(探針序列見(jiàn)表1)。使用擴(kuò)增探針與標(biāo)記有熒光基團(tuán)的上述分型標(biāo)記探針進(jìn)行雜交，產(chǎn)生熒光信號(hào)，利用自動(dòng)識(shí)別系統(tǒng)閱讀熒光信號(hào)，通過(guò)不同顏色熒光信號(hào)，自動(dòng)判斷CTCs分型檢測(cè)結(jié)果。免疫熒光檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)判讀：上皮型CTCs顯示為紅色熒光信號(hào)點(diǎn)，間質(zhì)型CTCs顯示為綠色熒光信號(hào)點(diǎn)，同時(shí)表達(dá)上皮型和間質(zhì)型特異性基因的CTCs為混合型(同時(shí)顯示紅色熒光及綠色熒光信號(hào)點(diǎn))。

表1 核酸探針序列

基因序列(5′→3′)EpCAMTGGTGCTCGTTGATGAGTCAAGCCAGCTTTGAGCAAATGAAAAGCCCATCATTGTTCTGGCTCTCATCGCAGTCAGGATCTCCTTGTCTGTTCTTCTGACCTCAGAGCAGGTTATTTCAGCK8CGTACCTTGTCTATGAAGGAACTTGGTCTCCAGCATCTTGCCTAAGGTTGTTGATGTAGCCTGAGGAAGTTGATCTCGTCCAGATGTGTCCGAGATCTGGTGACCTCAGCAATGATGCTGCK18AGAAAGGACAGGACTCAGGCGAGTGGTGAAGCTCATGCTGTCAGGTCCTCGATGATCTTGCAATCTGCAGAACGATGCGGAAGTCATCAGCAGCAAGACGCTGCAGTCGTGTGATATTGGCK19CTGTAGGAAGTCATGGCGAGAAGTCATCTGCAGCCAGACGCTGTTCCGTCTCAAACTTGGTTCTTCTTCAGGTAGGCCAGCTCAGCGTACTGATTTCCTCGTGAACCAGGCTTCAGCATCVimentinGAGCGAGAGTGGCAGAGGACCTTTGTCGTTGGTTAGCTGGCATATTGCTGACGTACGTCAGAGCGCCCCTAAGTTTTTAAAAGATTGCAGGGTGTTTTCGGGCCAATAGTGTCTTGGTAGTwistACAATGACATCTAGGTCTCCCTGGTAGAGGAAGTCGATGTCAACTGTTCAGACTTCTATCCCTCTTGAGAATGCATGCATTTTCAGTGGGCTGATTGGCACTTACCATGGGTCCTCAATAACD45TCGCAATTCTTATGCGACTCTGTCATGGAGACAGTCATGT

1.5.4檢測(cè)結(jié)果的判讀標(biāo)準(zhǔn) 本研究將CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例同時(shí)增加認(rèn)為CTCs進(jìn)展；CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例同時(shí)減少認(rèn)為CTCs下降；CTCs數(shù)量及間質(zhì)型比例變化趨勢(shì)不相符定義為CTCs趨勢(shì)待定。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0進(jìn)行分析，連續(xù)性變量使用均值、標(biāo)準(zhǔn)差以及波動(dòng)范圍的表示方法，類(lèi)別變量使用頻數(shù)進(jìn)行表示，連續(xù)性變量根據(jù)是否符合正態(tài)分布采用t檢驗(yàn)或秩和檢驗(yàn)，類(lèi)別變量采用Pearsonχ2檢驗(yàn)或Fisher’s確切概率檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 CTCs分型檢測(cè)對(duì)腎癌治療的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)作用

1例腎癌(T1bN0M0)行根治性腎切除患者，術(shù)后3月檢測(cè)CTCs呈現(xiàn)進(jìn)展趨勢(shì)，給予分子靶向藥物索拉菲尼輔助治療0.8 g/d，持續(xù)用藥3個(gè)月后停藥，復(fù)查CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。但在術(shù)后15個(gè)月(即停用輔助治療后9個(gè)月)，檢測(cè)CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例再次呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，影像學(xué)檢查未見(jiàn)異常，術(shù)后18個(gè)月CT發(fā)現(xiàn)肺轉(zhuǎn)移，與影像學(xué)檢測(cè)比較，CTCs能提早3個(gè)月發(fā)現(xiàn)腫瘤的進(jìn)展。給予索拉菲尼靶向治療，術(shù)后21月(即靶向治療3月后)復(fù)查CTCs較治療前呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，術(shù)后24月(即靶向治療6月后)胸部CT顯示轉(zhuǎn)移灶由治療前最大徑13 mm縮小至10 mm，縮小23.07%，CTCs呈現(xiàn)的下降趨勢(shì)比影像學(xué)發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶縮小提早3個(gè)月(圖1)。

1例左腎癌(T2N0M0)患者行左腎根治性切除術(shù)，術(shù)后3個(gè)月發(fā)現(xiàn)CTCs數(shù)量及間質(zhì)型細(xì)胞比例增加，影像學(xué)檢查未發(fā)現(xiàn)異常；術(shù)后6個(gè)月CT及PET-CT發(fā)現(xiàn)右側(cè)腎上腺轉(zhuǎn)移，予右腎上腺轉(zhuǎn)移灶切除，患者未同意應(yīng)用分子靶向治療，術(shù)后CTCs呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。術(shù)后24個(gè)月復(fù)查時(shí)發(fā)現(xiàn)CTCs再次出現(xiàn)進(jìn)展趨勢(shì)，同時(shí)CT發(fā)現(xiàn)左側(cè)腎上腺轉(zhuǎn)移灶，予左側(cè)腎上腺切除，聯(lián)合分子靶向治療，治療后CTCs呈現(xiàn)下降趨勢(shì)(圖2)。以上2例接受CTCs監(jiān)測(cè)的個(gè)案病例，提示CTCs分型檢測(cè)具有實(shí)時(shí)、早期評(píng)價(jià)疾病進(jìn)展及治療轉(zhuǎn)歸的作用。

圖1 腎癌術(shù)后肺轉(zhuǎn)移患者CTCs變化及CT表現(xiàn)

A：CTCs隨訪監(jiān)測(cè)結(jié)果柱狀圖；B：術(shù)前腎CT軸位圖(示左腎中部55×47 mm腎門(mén)腫瘤)；C：分子靶向治療前(示肺轉(zhuǎn)移灶表現(xiàn)，轉(zhuǎn)移灶最大徑13 mm)；D：分子靶向治療半年后(肺轉(zhuǎn)移灶較治療前最大徑縮小至10 mm)。AT：分子靶向輔助治療；T：分子靶向治療。

圖2 左腎癌術(shù)后腎上腺轉(zhuǎn)移患者CTCs變化及CT表現(xiàn)

A：CTCs隨訪監(jiān)測(cè)結(jié)果柱狀圖；B：術(shù)前PET-CT示原發(fā)左腎癌；C：左腎根治性切除術(shù)后6月PET-CT發(fā)現(xiàn)右腎上腺占位，行右腎上腺腫瘤切除，術(shù)后病理證實(shí)右腎上腺轉(zhuǎn)移癌；D：術(shù)后24月CT發(fā)現(xiàn)左腎上腺腫瘤，行左腎上腺切除，術(shù)后病理證實(shí)左腎上腺轉(zhuǎn)移癌；E：左腎上腺轉(zhuǎn)移瘤切除術(shù)后復(fù)查CT，未見(jiàn)局部異常。RAC：發(fā)現(xiàn)右腎上腺轉(zhuǎn)移，行轉(zhuǎn)移灶切除；LAC：發(fā)現(xiàn)左腎上腺轉(zhuǎn)移，行轉(zhuǎn)移灶切除。

2.2 CTCs分型檢測(cè)對(duì)轉(zhuǎn)移腎癌療效評(píng)價(jià)的作用47例患者均完成12～27個(gè)月的隨訪，平均隨訪時(shí)間(13.0±8.5)個(gè)月。其中5例在隨訪期發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(1例腎上腺轉(zhuǎn)移，4例肺轉(zhuǎn)移)。轉(zhuǎn)移患者中，3例給予治療(1例腎上腺轉(zhuǎn)移給予轉(zhuǎn)移灶切除，2例肺轉(zhuǎn)移給予分子靶向治療)，治療后CTCs數(shù)量及間質(zhì)型比例較治療前呈下降趨勢(shì)；2例因患者原因未接受治療，CTCs總數(shù)及間質(zhì)型CTC比例均呈進(jìn)展趨勢(shì)。

2.3 分子靶向治療對(duì)CTCs數(shù)量及分型的作用16例CTCs呈進(jìn)展趨勢(shì)的患者中，11例未予干預(yù)，8例患者CTCs繼續(xù)進(jìn)展。5例患者給予索拉菲尼分子靶向治療(2例為晚期治療，3例為術(shù)后輔助)，治療后檢測(cè)CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例較治療前均呈下降趨勢(shì)(27.00±8.74vs.11.40±2.07；0.81±0.02vs.0.33±0.05)。靶向治療組CTCs呈現(xiàn)下降趨勢(shì)的患者比例高于未治療組(表2)。

表2 靶向治療與CTCs分型檢測(cè)結(jié)果[例(%)]

3 討 論

對(duì)腎癌的進(jìn)展早發(fā)現(xiàn)早治療，并對(duì)治療效果進(jìn)行實(shí)時(shí)、有效的評(píng)價(jià)意義重大[6]。目前腎癌監(jiān)測(cè)手段主要靠影像學(xué)檢查，但影像學(xué)檢查對(duì)腎癌的進(jìn)展及療效判斷具有滯后性，腫瘤體積發(fā)生一定變化后才會(huì)被影像學(xué)發(fā)現(xiàn)，不利于治療效果的及時(shí)評(píng)價(jià)。尋找一種能夠在治療過(guò)程中對(duì)腫瘤進(jìn)行重復(fù)監(jiān)測(cè)，實(shí)時(shí)了解腫瘤治療效果及進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)的檢查手段，對(duì)腎癌的治療至關(guān)重要。

研究發(fā)現(xiàn)，CTCs與乳腺癌、結(jié)直腸癌、非小細(xì)胞肺癌等多種腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)顯著相關(guān)[3]。CTCs檢查僅需抽取少量外周血，具有取樣簡(jiǎn)單、可重復(fù)性強(qiáng)、無(wú)創(chuàng)等諸多優(yōu)點(diǎn)，對(duì)早期發(fā)現(xiàn)腫瘤微轉(zhuǎn)移、評(píng)估預(yù)后和療效以及腫瘤的個(gè)體化治療具有重要意義[7]。在無(wú)法通過(guò)現(xiàn)有診斷模式如CT和PET-CT發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中，約20%的患者可檢測(cè)到CTCs，CTCs檢測(cè)可以比CT、PET更早、更有效地診斷腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[8]。腎癌方面，我們前期研究發(fā)現(xiàn)CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例的增加趨勢(shì)與腎癌的進(jìn)展轉(zhuǎn)移具有顯著相關(guān)性[5]。

一些研究發(fā)現(xiàn)，CTCs數(shù)量檢測(cè)可評(píng)價(jià)腫瘤治療效果。結(jié)直腸癌根治術(shù)后CTCs數(shù)量繼續(xù)增加，則提示腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性增加[9]。對(duì)接受化療的進(jìn)展期結(jié)直腸癌患者研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)CTCs檢測(cè)，可以有效地預(yù)測(cè)患者的OS[10]。在前列腺癌研究中發(fā)現(xiàn)，與PSA檢測(cè)相比，CTCs能夠更早地預(yù)測(cè)患者從治療中的獲益程度，在治療的第2～5周PSA尚未有顯著變化時(shí)，CTCs數(shù)量就出現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異的變化，提示CTCs數(shù)量檢測(cè)是早期，敏感的療效評(píng)價(jià)指標(biāo)。其次，通過(guò)ROC曲線對(duì)比CTCs數(shù)量和PSA的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性，發(fā)現(xiàn)CTCs數(shù)量對(duì)治療效果的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性要比PSA更有優(yōu)勢(shì)[11]。

但在一些研究中發(fā)現(xiàn)，單純的CTCs數(shù)量變化與治療后疾病轉(zhuǎn)歸并不相符，CTCs分型檢測(cè)中間質(zhì)型CTCs的比例變化也同樣重要。發(fā)表在Science上的一篇針對(duì)乳腺癌的研究發(fā)現(xiàn)，在接受治療的腫瘤緩解病例中，仍有部分患者CTCs數(shù)量呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，另有一些患者即使治療后CTCs數(shù)量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，但疾病仍出現(xiàn)臨床進(jìn)展[12]。出現(xiàn)這種結(jié)果的原因是CTCs在形成過(guò)程中伴隨著上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)過(guò)程，使得外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞包含上皮型、間質(zhì)型和上皮/間質(zhì)混合型的三種類(lèi)型，與上皮型CTCs相比，間質(zhì)型CTCs具有更強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移能力，在腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程同樣起主要作用[13-15]。因此，僅僅依靠CTCs的數(shù)量不能準(zhǔn)確評(píng)估腫瘤進(jìn)展風(fēng)險(xiǎn)，還需要結(jié)合CTCs分型，即間質(zhì)型CTCs的數(shù)量和比例來(lái)綜合評(píng)估。上述乳腺癌研究中治療后腫瘤進(jìn)展病例中，雖然CTCs數(shù)量降低，但間質(zhì)型細(xì)胞比例出現(xiàn)了增加；疾病緩解的病例中，雖然有CTCs數(shù)量的增加，但間質(zhì)型細(xì)胞的比例卻呈下降趨勢(shì)，提示間質(zhì)型CTCs比例的增高與乳腺癌預(yù)后呈負(fù)相關(guān)性[12]。因此，本研究在CTCs結(jié)果認(rèn)定中，認(rèn)為CTCs的進(jìn)展或下降不僅表現(xiàn)為CTCs數(shù)量的增加或減少還應(yīng)同時(shí)包括間質(zhì)型CTCs比例的增高或降低。CTCs數(shù)量與間質(zhì)型細(xì)胞比例出現(xiàn)相反趨勢(shì)時(shí)，則認(rèn)為趨勢(shì)待定，需繼續(xù)嚴(yán)密監(jiān)測(cè)CTCs變化。本研究入組的5例轉(zhuǎn)移性腎癌患者，2例未予治療，3例給予轉(zhuǎn)移灶切除或分子靶向治療，其CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例的變化趨勢(shì)與腫瘤預(yù)后的關(guān)系，證實(shí)了CTCs檢測(cè)是評(píng)價(jià)晚期腎癌治療的有效方法。

CTCs數(shù)量及分型檢測(cè)是否可以作為實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)治療效果的手段，是評(píng)價(jià)CTCs檢測(cè)臨床價(jià)值的另一重要因素。研究認(rèn)為，CTCs檢測(cè)對(duì)乳腺癌的治療具有實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)作用[12]。我們研究中的2例治療轉(zhuǎn)歸頗為復(fù)雜的轉(zhuǎn)移性腎癌個(gè)案，1例發(fā)生2次遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，1例進(jìn)行2次靶向治療。其CTCs檢測(cè)的變化趨勢(shì)與臨床治療轉(zhuǎn)歸一致，且CTCs檢測(cè)均比影像學(xué)提早發(fā)現(xiàn)疾病的變化趨勢(shì)，證實(shí)了CTCs檢測(cè)對(duì)腎癌治療的評(píng)價(jià)更具有早期、靈敏的優(yōu)勢(shì)。

分子靶向治療對(duì)腎癌CTCs作用的研究文獻(xiàn)不多。MUSELLA等[16]對(duì)結(jié)直腸癌患者應(yīng)用西妥昔單抗、帕尼單抗靶向治療并進(jìn)行CTCs檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，治療后CTCs陰性的患者比陽(yáng)性者具有更長(zhǎng)的無(wú)進(jìn)展生存期。本研究發(fā)現(xiàn)，16例CTCs進(jìn)展趨勢(shì)的患者中，5例給予分子靶向治療，其中2例屬于轉(zhuǎn)移性腎癌治療用藥，3例屬于未轉(zhuǎn)移的輔助靶向治療，治療后CTCs均呈顯著下降的趨勢(shì)。11例未予干預(yù)治療，其中8例患者CTCs呈現(xiàn)進(jìn)展趨勢(shì)，靶向治療組CTCs呈現(xiàn)下降的患者比例高于未治療組。說(shuō)明分子靶向治療具有降低腎癌患者CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例的作用。

綜上，我們認(rèn)為CTCs具有評(píng)價(jià)腎癌治療效果的作用，CTCs數(shù)量及間質(zhì)型細(xì)胞比例的下降與治療有效相關(guān)。分子靶向治療具有降低腎癌CTCs數(shù)量及間質(zhì)型CTCs比例的作用。CTCs分型檢測(cè)具有早期、靈敏的優(yōu)勢(shì)，可以作為實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)治療效果及疾病進(jìn)展的手段。但本課題分子靶向治療的例數(shù)較少，結(jié)果難免存在偏差，有待選取更大樣本量進(jìn)一步驗(yàn)證。

致謝：感謝輝瑞醫(yī)學(xué)部宋旸博士給予的文獻(xiàn)支持!