基于宏條碼技術(shù)對(duì)校園足球運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)真菌組成的多樣性分析

梁樺 梁竹 張芝元 鄭歡 韓燕峰 梁宗琦

1 貴州大學(xué)體育學(xué)院（貴陽 550025）

2 成都體育學(xué)院（成都 610041）

3 貴州大學(xué)真菌資源研究所（貴陽 550025）

近些年來，由于城市化加速和體育健身設(shè)施的廣泛使用，以及肥胖和人口老年化，廣譜抗生素、免疫抑制劑、化療、放療的應(yīng)用等原因，由紅色毛癬菌Trichophytonrubrum，指/趾間毛癬菌T.interdigitale和絮狀表皮癬菌Epidermophyton floccosum引起的普通人群皮膚真菌病上升，各種引起深部感染的機(jī)會(huì)性真菌病原所致的發(fā)病率也增高[1-3]。此外，在青少年學(xué)生中皮膚感染的發(fā)生及流行，以及一些接觸性的體育運(yùn)動(dòng)項(xiàng)目及設(shè)施真菌病原的存在及擴(kuò)散也受到了廣泛關(guān)注[4-6]。D?gen調(diào)查了土耳其年齡在16～18歲男女學(xué)生參加的15個(gè)體育項(xiàng)目的皮膚真菌感染情況，結(jié)果表明不少男孩都檢查出了皮膚病原真菌，紅色毛癬菌Trichophyton rubrum、斷發(fā)毛癬菌T.tonsurans和指間毛癬菌T.interdigitale[1]。美國在國家層面上曾對(duì)100所高中，參與9種體育運(yùn)動(dòng)（包括男、女足球）學(xué)生的皮膚真菌感染進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，為提高對(duì)學(xué)校體育衛(wèi)生工作的認(rèn)識(shí)和采取預(yù)防措施提供科學(xué)根據(jù)[7]。

近幾年來，我國青少年校園足球運(yùn)動(dòng)有了長足的發(fā)展。為了保障校園足球運(yùn)動(dòng)持久、安全和健康發(fā)展，有少數(shù)研究者已關(guān)注到了運(yùn)動(dòng)員微生物感染的安全問題，但其研究多是針對(duì)鞋墊及鞋面鞋材的篩選，以提高對(duì)病原菌的抑制作用[8-9]。關(guān)于我國校園足球運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)富集真菌物種的多樣性及致病性風(fēng)險(xiǎn)則未見報(bào)道。

宏條碼技術(shù)（metabarcoding）是使用通用引物對(duì)環(huán)境樣品或生物混合樣品中生物總DNA中一段具有鑒定信息的基因片段進(jìn)行規(guī)?；瘮U(kuò)增、高通量測序、獲得可操作分類單元（operational Taxonomic Unit，OTU），再通過與公認(rèn)分類DNA條形碼數(shù)據(jù)庫比對(duì)，從而快速實(shí)現(xiàn)物種鑒定的系統(tǒng)分析技術(shù)。此技術(shù)已在物種監(jiān)測、生物多樣性分析等生態(tài)學(xué)領(lǐng)域中得到很好的應(yīng)用[10-11]。應(yīng)用這種方法分析校園足球隊(duì)運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)真菌群落組成情況，有利于揭示足球鞋鞋腔內(nèi)真菌群落組成的多樣性，以及可能存在的人類潛在真菌病原，為改善校園足球運(yùn)動(dòng)的衛(wèi)生教育和管理提供科學(xué)依據(jù)。

1 研究對(duì)象與方法

1.1 樣本的采集

為觀察了解不同地區(qū)和不同年齡段青少年校園足球隊(duì)運(yùn)動(dòng)員足球鞋鞋腔內(nèi)存在的真菌物種多樣性及衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)性上的差異，我們分別選取貴州省黔北地區(qū)某縣的2所中學(xué)，黔中地區(qū)的1所中學(xué)和貴陽地區(qū)1所大學(xué)的校園足球隊(duì)隊(duì)員，對(duì)其鞋腔進(jìn)行采樣。球隊(duì)代碼分別是：

Qc:對(duì)照組：黔北某縣A、B兩中學(xué)未參加校園足球隊(duì)的一般學(xué)生，每校采樣15人。

Q1：黔北某縣A中學(xué)校園足球隊(duì)（以下簡稱Q1隊(duì)）。隊(duì)員年齡為16～18歲，高中生，21人，足球訓(xùn)練時(shí)間2～3年，每周2～3次，每次一般在1.5個(gè)小時(shí)左右。采樣地區(qū)為亞熱帶濕潤季風(fēng)氣候，年平均氣溫為13.1～13.5℃，年平均相對(duì)濕度為85%。

Q2：黔北某縣B中學(xué)校園足球隊(duì)。年齡及訓(xùn)練時(shí)間與Q1隊(duì)基本相同，15人。

Q3：黔中地區(qū)某中學(xué)的14～16歲初中生和17～19歲高中生組成的混合樣（30人）。這些學(xué)生訓(xùn)練時(shí)間都在5年以上，每周5次左右，每次訓(xùn)練時(shí)間不少于1.5個(gè)小時(shí)，現(xiàn)為校隊(duì)主力隊(duì)員。

Q4:貴陽地區(qū)某大學(xué)足球?qū)＿x班學(xué)生（24人），平均年齡20歲，每周專選課3次，每次2小時(shí)，此外平時(shí)還參加課外踢球2次左右。采樣地區(qū)年平均氣溫為15.3°C，年平均相對(duì)濕度為78%。

采樣方法：用無菌水將醫(yī)用脫脂棉棒濕潤，擦洗被選球隊(duì)隊(duì)員及對(duì)照組學(xué)生球鞋鞋腔前部數(shù)次。將獲得的取樣棉棒分別裝入無菌的塑料袋中，每支校園足球隊(duì)及對(duì)照組分別裝袋。取樣袋帶回實(shí)驗(yàn)室后，無菌操作剝離出采樣的脫脂棉，剪碎混合成混合樣，4°C冰箱保存，送檢。

1.2 樣品總DNA提取

使用常用于土壤中總DNA提取的試劑盒（FastDNA?SPIN Kit for Soil），按說明書操作程序進(jìn)行真菌菌絲體裂解、裂解液均質(zhì)化及蛋白質(zhì)增溶、總DNA的純化。不同樣品純化后的DNA濃度經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，其檢測參數(shù)為：濃度1%，電壓5 v/cm，時(shí)間30 min。

1.3 PCR擴(kuò)增及測序

PCR試驗(yàn)采用TaKaRa rTaq DNA 多聚酶，20 μl反應(yīng)體系：10×Buffer 2 μl，2.5 mM dNTPs 2 μl，正向 引 物ITS1F，CTTGGTCATTTAGAGGAAGTAA（5 μM）0.8 μl，反向引物2043R，GCTGCGTTC TTCATCGATGC（5 μM） 0.8 μl，rTaq 多聚酶 0.2 μl，BSA 0.2 μl，模板DNA 10 ng，而后補(bǔ)ddH2O至20 μl。PCR儀：ABI GeneAmp?9700型。PCR反應(yīng)參數(shù)：a.1×（3 mins，95°C）；b.35×（30 s，95°C；30 s 55°C；45 s 72°C）；c.10 mins 72°C，10°C保存?zhèn)溆谩?/p>

PCR產(chǎn)物經(jīng)上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司（www.majorbio.com），Illumina Hiseq平臺(tái)進(jìn)行高通量測序，而后進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和生物多樣性分析[12]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

1.4.1 原始數(shù)據(jù)處理

經(jīng)Miseq測序得到的雙端序列數(shù)據(jù)，根據(jù)PE reads之間的overlap關(guān)系，將成對(duì)的reads拼接成一條序列，同時(shí)對(duì)reads的質(zhì)量和拼接效果進(jìn)行質(zhì)控過濾，再根據(jù)序列首尾兩端的barcode和引物序列區(qū)分樣品得到的有效序列，并校正序列方向。全部原始序列數(shù)據(jù)經(jīng)過濾處理優(yōu)化，然后去除嵌合體序列后，進(jìn)行OTU聚類分析，其代表序列作分類學(xué)分析。

1.4.2OTU聚類及注釋

用Qiime平臺(tái)（http://qiime.org/scripts/assign_taxonomy.html）將序列按相似度0.97的序列聚類為OTU，選取每個(gè)OTU最長的序列作為代表序列。將ITS-rDNA基因的OTU代表序列與Unite（Release 7.0 http://unite.ut.ee/index.php）真菌數(shù)據(jù)庫進(jìn)行比對(duì)，獲得每個(gè)OTU的分類學(xué)信息。基于taxsummarya文件夾中的數(shù)據(jù)表，利用R語言工具，或在EXCEL中繪制不同水平上的物種組成百分比堆積圖及Venn圖。

1.4.3 α 多樣性分析

用 mothur version v.1.30.1（http://www.mothur.org/wiki/SchlossSOP#Alphadiversity）指數(shù)分析程序包對(duì)各樣本的Shannor-Wiener和Simpson多樣性指數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

1.4.4 聚類分析

根據(jù)物種列表，使用R軟件R-3.0.3 for Windows程序包，將屬-水平上的分類信息進(jìn)行聚類分析并繪制Heatmap圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同校園足球隊(duì)員與非隊(duì)員間運(yùn)動(dòng)鞋內(nèi)真菌數(shù)量的差異

瓊脂糖凝膠電泳檢測結(jié)果顯示：Q1和Q2兩支球隊(duì)總DNA濃度分別為17.8 ng/μg和10.4ng/μg，而對(duì)照組Qc僅分別為7.1 ng/μg和2.9 ng/μg，在電泳圖中不能清楚顯示（圖1），表明對(duì)照組Qc鞋腔內(nèi)存在的真菌DNA量很低，以致不能做后續(xù)分析。Q1至Q4四支球隊(duì)則共獲得了有效序列133302條，它們分別的序列數(shù)及相對(duì)豐度表明4支校園足球隊(duì)球鞋內(nèi)存在真菌物種的多樣性（圖2）。

圖1 校園足球隊(duì)與對(duì)照組鞋腔真菌總DNA電泳圖

圖2 不同足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌總序列數(shù)及其百分?jǐn)?shù)

2.2 不同校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌群落組成的差異分析

從4個(gè)校園足球隊(duì)隊(duì)員球鞋鞋腔內(nèi)共獲得子囊菌門（Ascomycota）、擔(dān)子菌門（Basidiomycota）和類原生動(dòng)物門（Rozellomycota）的12綱，16目，28科，40屬。在目的水平上可歸類為10群（相對(duì)豐度較低的目歸入other之中）（圖3）。Q1、Q2、Q3和Q4四支校園足球隊(duì)中這些類群的組成及相對(duì)豐度差異明顯。在Q4大學(xué)生球隊(duì)中，絲孢酵母目Trichosporonales是優(yōu)勢類群，相對(duì)豐度在95%以上。此目中的絲孢酵母屬Trichosporon廣泛分布于自然界，雖有的成員能通過累積油脂而凈化環(huán)境，但有的成員侵襲人類[13-14]。而Q3足球隊(duì)的第一優(yōu)勢類群則是鎖擲酵母目Sporidiobolales。已知此目內(nèi)的一些成員，如赭色擲孢酵母Sporobolomyces salmonicolor能引起皮膚感染、眼內(nèi)炎、哮喘、過敏性肺泡炎和鼻炎等多種疾?。╤ttps://en.wikipedia.org/wiki/）。次優(yōu)勢類群銀耳綱的囊擔(dān)菌目Cystobasidiales，也包含有人類的機(jī)會(huì)病原，一些隱球酵母Cryptococcusspp.也包含在此目中。隨后的優(yōu)勢類群依次是銀耳目和酵母菌目。在Q3球隊(duì)中絲孢酵母目所占比例很低。在球隊(duì)Q1和Q2中，酵母菌目占主要優(yōu)勢，相對(duì)豐度分別達(dá)到約83%和28.5%，隨后的優(yōu)勢類群目在兩個(gè)隊(duì)中明顯有別，前者是座囊菌綱Dothideomycetes中一個(gè)未定目和散囊菌目Eurotiales，其相對(duì)豐度分別為23%和20%，而后者的優(yōu)勢目則分別是座囊菌綱中一個(gè)未定目和絲孢酵母目，但相對(duì)豐度均未達(dá)到5%。可見，四所學(xué)校足球隊(duì)員鞋腔內(nèi)真菌物種在目水平上組成的多樣性有明顯差異。Q4大學(xué)生球隊(duì)鞋腔內(nèi)的優(yōu)勢類群單一。

圖3 不同球隊(duì)隊(duì)員鞋腔內(nèi)真菌在目水平上的群落組成及其相對(duì)豐度

各球隊(duì)在屬的水平上，真菌的組成和相對(duì)豐度上均表現(xiàn)出明顯差異（圖4）。黔北地區(qū)的兩個(gè)中學(xué)校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌組成，相對(duì)豐度＞1%的都有6個(gè)屬，但兩隊(duì)的優(yōu)勢類群則明顯不同。Q1隊(duì)的優(yōu)勢屬依次是邁耶爾霉Meyerozyma、一個(gè)座囊菌綱的未定屬、曲霉屬Aspergillus、交鏈孢屬Alternaria、隱球酵母屬Cryptococcus和絲孢酵母屬Trichsporon。Q2隊(duì)的真菌組成與Q1隊(duì)一致，但優(yōu)勢屬邁耶爾霉Meyerozyma的相對(duì)豐度卻高達(dá)81.82%，其它的屬相對(duì)豐度較接近，均未達(dá)到10%。黔中地區(qū)混合隊(duì)Q3在屬水平上的真菌組成，占優(yōu)勢的為紅酵母屬Rhodotorula、谷氏酵母屬Guehomyces、隱球酵母，其它相對(duì)豐度較低的還有銀耳目Tremellales中的一個(gè)屬和邁耶爾酵母屬。這些分屬于各球隊(duì)中的真菌大多數(shù)能引起人類的疾病[15-17]。大學(xué)生球隊(duì)Q4的真菌組成較單一，其最顯著的優(yōu)勢屬是絲孢酵母屬Trichsporon，相對(duì)豐度高達(dá)97.1%。這個(gè)屬的一些成員近年被報(bào)道存在于人類的微生物組（microbiome）中，能從糞便、健康皮膚和過敏性皮炎患者中分離到，它們所引起的皮膚病的發(fā)病率顯著上升[13]。Q4球隊(duì)的第二優(yōu)勢屬也是與人類皮膚感染有關(guān)的邁耶爾屬[14，16]。大學(xué)生足球隊(duì)成員罹患足部癬菌病的風(fēng)險(xiǎn)明顯。

圖4 不同球隊(duì)隊(duì)員鞋腔內(nèi)真菌在屬水平上的群落組成及其相對(duì)豐度

2.3 各校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌群落的α 多樣性分析

α多樣性分析能展示群落或樣本中物種的多樣性，其涵義一是物種的數(shù)目和豐富度，二是種的均勻度，即全部物種個(gè)體數(shù)的分配狀況。Shannon和Simpson是兩個(gè)描述多樣性的常用指數(shù)。Shannon指數(shù)越高說明生物多樣性越豐富，而Simpson指數(shù)越高則側(cè)重表明群落中物種個(gè)體數(shù)的均勻度越差。圖5顯示，混合組建的Q3球隊(duì)生物多樣性最豐富，Q1球隊(duì)次之，大學(xué)生球隊(duì)Q4的物種多樣性最低。球隊(duì)Q4的Simpson指數(shù)最高，說明其群落的組成單一，均勻度差。球隊(duì)Q2次之，球隊(duì)Q1和Q3的Simpson指數(shù)相近。

圖5 不同校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌群落的α多樣性差異

2.4 各校園足球隊(duì)球鞋腔內(nèi)真菌群落組成的Venn圖分析

Venn圖可用于展現(xiàn)各球隊(duì)共有和獨(dú)有的物種數(shù)目，直觀顯示物種組成相似性及重疊情況。四支校園足球隊(duì)鞋腔內(nèi)真菌組成的Venn圖結(jié)構(gòu)顯示，在屬的水平上它們自身特有的類群有相當(dāng)差異（圖6）。他們有6個(gè)共有屬（圖7）：分別是邁耶爾屬M(fèi)eyerozyma（相對(duì)豐度40.07%），絲孢酵母屬Trichosporon（29.48%），紅酵母屬Rhodotorula（11.75%），座囊菌綱Dothideomycetes中一未定屬（10.93%），隱球酵母屬Cryptococcus（6.53%），小大衛(wèi)霉科Davidiellaceae中一未定屬（1.42%）。這些共有屬中的多數(shù)成員也都是人類的病原真菌[13，18]。

圖6 不同球隊(duì)球鞋內(nèi)真菌群落的Venn圖

圖7 不同球隊(duì)球鞋內(nèi)共有真菌屬在屬水平上的相對(duì)豐度

各球隊(duì)的特有種各不相同。Q1和Q2足球隊(duì)的特有屬較少，多是來自土壤和植物，僅布勒擔(dān)孢酵母屬

Bulleromyces可能與人類感染有關(guān)。Q3和Q4的特有種多數(shù)也是土壤與植物內(nèi)生真菌，其中的紅酵母屬Rhodosporidium和馬拉色菌目Malasseziales中的一些成員對(duì)人類有潛在的感染風(fēng)險(xiǎn)[19]。

2.5 各校園足球隊(duì)球鞋鞋腔內(nèi)真菌群落組成的相似性

Heatmap圖可對(duì)球隊(duì)鞋腔內(nèi)物種組成進(jìn)行相似性比較。從圖8可看出，球隊(duì)Q1和Q2首先聚類，顯示了它們明顯的相似性，而后它們?cè)倥c球隊(duì)Q3相聚，最后是球隊(duì)Q4。Heatmap圖表明，在真菌屬的水平上，大學(xué)生年齡段球隊(duì)（Q4）與其它3個(gè)中學(xué)生年齡段球隊(duì)（Q1，Q2和Q3）間真菌群落組成的相似性較低，具有明顯的差異性。

圖8 不同校園足球隊(duì)球鞋腔內(nèi)屬水平上的Heatm ap圖

3 討論

足球運(yùn)動(dòng)是一項(xiàng)競技性和運(yùn)動(dòng)量較大的體育活動(dòng)。在活動(dòng)過程中，運(yùn)動(dòng)者的腳掌在足球鞋腔內(nèi)能分泌大量汗液，這為真菌的生長不僅提供了營養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)也創(chuàng)造了適宜生長的濕度條件。我們的調(diào)查研究已發(fā)現(xiàn)，在未參加校園足球運(yùn)動(dòng)的對(duì)照組學(xué)生中，他們的鞋腔內(nèi)真菌的DNA極少，而被測試的幾支校園足球隊(duì)的隊(duì)員鞋腔內(nèi)則能提取相當(dāng)量的真菌總DNA及序列數(shù)。進(jìn)一步的深入分析顯示，這些來自不同地區(qū)和年齡段的青少年校園足球隊(duì)員的鞋腔內(nèi)，其真菌群落組成多樣，且相對(duì)豐度也各不相同。

特別值得關(guān)注的是，Venn圖分析顯示，全部4個(gè)被檢測球隊(duì)的鞋腔內(nèi)的共有物種中，皆存在一些人類潛在的病原真菌。人類致病真菌通?？煞譃闇\部真菌和深部真菌。前者多侵染皮膚、毛發(fā)等表淺部位，全世界有20%～25%的人群深受其苦[2]；后者侵犯皮下組織、內(nèi)臟器官等，可經(jīng)血液、淋巴傳播引起播散性真菌感染[17，20]。淺部致病真菌最常見的有：（1）毛癬菌屬Trichophyton。如與人類的頭癬、甲癬和皮膚癬有關(guān)的紅色毛癬菌T.rubrum，它是全球最常見皮膚真菌病的病原。斷發(fā)毛癬菌T.tonsurans則在競技運(yùn)動(dòng)員中引起頭癬和體癬[1，19]。（2）小孢子菌屬M(fèi)icrosporum。如犬小孢子菌M.canis和石膏樣小孢子菌M.gypseum，它們常與人類的皮膚和毛發(fā)感染有關(guān)。（3）皮癬菌屬Epidermophyton。如能引起股癬、足癬、體癬和甲癬的絮狀皮癬菌E.floccosum[1-2]。我們的分析揭示了4支校園足球隊(duì)球鞋鞋腔內(nèi)共存的6屬真菌與上述常見的淺部致病性真菌不完全相同。它們?cè)谛粌?nèi)的豐度依次是，邁耶氏酵母屬M(fèi)eyerozyma＞絲孢酵母屬（毛孢子菌）Trichosporon＞紅酵母菌屬Rhodotorula＞座囊菌綱Dothideomycetes中一未定屬＞隱球酵母屬Cryptococcus＞和大衛(wèi)霉科Davidiellaceae中一未定屬。其中，邁耶氏酵母屬M(fèi)eyerozyma近些年在臨床上被分離出的幾率明顯增加。它造成的淺部感染可出現(xiàn)膿包、肉芽腫和甲真菌??；深部感染可侵襲有基礎(chǔ)性疾病的易感者內(nèi)臟[16，21，22]。長期以來，絲孢酵母屬Trichosporon常被誤認(rèn)為是污染菌。事實(shí)上，人類淺表感染病原的10%～40%可能是由此菌所引起，其實(shí)它們是人類微生物組的成員之一[13，22]。研究發(fā)現(xiàn)，座囊菌綱Dothideomycetes中的一些屬，如Cladophialophora，Ochroconis和香港霉屬Hongkongmyces的成員，紅酵母、隱球酵母也都是能感染人類和動(dòng)物的機(jī)會(huì)病原。它們能引起淺表感染、過敏性肺炎和侵入性疾病等[13，18，23]。這些在球隊(duì)運(yùn)動(dòng)員鞋腔內(nèi)隱藏的潛在病原真菌，對(duì)運(yùn)動(dòng)者所造成的運(yùn)動(dòng)安全風(fēng)險(xiǎn)和公共衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)值得關(guān)注。

皮膚真菌病原菌可通過兩種途徑感染和傳播：其一，通過人與人或與動(dòng)物、土壤直接接觸；其二，間接地通過媒介，如被污染的設(shè)施、設(shè)備（如泳池、摔跤墊、體操床墊，足球鞋等）接觸被感染[2，5，24]。研究已發(fā)現(xiàn)，不同年齡段的個(gè)體對(duì)病原感染的敏感性不完全相同，在31～60歲的成人腳癬中皮膚真菌的檢出率最高，小孩很少發(fā)?。荒惺客ǔ１扰堪l(fā)病高；礦工、士兵以及摔跤和柔道、馬拉松、及足球運(yùn)動(dòng)員發(fā)病檢出率高于普通人群。在地區(qū)差別上，市區(qū)比郊區(qū)高，基于全球的尺度上，在亞洲和美國須癬毛癬菌T.mentagrophytes是引起腳癬和灰指甲的最常見病原，但在非洲卻很少發(fā)現(xiàn)[2，5，25]。我們的研究觀察到，黔中中心城市的Q3球隊(duì)，鞋腔內(nèi)真菌物種的多樣性明顯高于黔北某縣城的2個(gè)球隊(duì)。Heatmap圖的進(jìn)一步比較分析表明，黔北地區(qū)的Q1和Q2兩支球隊(duì)的相似性大于黔中地區(qū)的Q3足球隊(duì)。這在一定程度上也顯示了地域的差異。Heatmap圖也展示了大學(xué)生年齡段的Q4足球隊(duì)與黔北地區(qū)以及黔中地區(qū)的中學(xué)生年齡段足球隊(duì)的相似性小，其差異性更明顯。Nenoff等研究報(bào)道[19]，水解酶和角蛋白酶是紅色毛癬菌的主要毒力因子。黔中地區(qū)Q4大學(xué)生球隊(duì)成員鞋腔內(nèi)絲孢酵母Trichosporon相對(duì)豐度高達(dá)97.1%，其原因可能與這些隊(duì)員年齡比中學(xué)生大，腳部的角質(zhì)化程度相對(duì)高，進(jìn)而有選擇性地富集了嗜角蛋白類真菌，從而提高了人體微生物組中絲孢酵母成員的相對(duì)豐度[13，26]。

本研究基于高通量測序及生物信息學(xué)云平臺(tái)分析，揭示了校園足球隊(duì)隊(duì)員球鞋腔內(nèi)真菌群落組成的多樣性較豐富，且其中不少是可感染人體的潛在真菌病原。這些研究結(jié)果將有助于監(jiān)測青少年校園足球隊(duì)隊(duì)員及相關(guān)人群中可能發(fā)生的真菌感染及擴(kuò)散，為支持和推動(dòng)我國校園足球運(yùn)動(dòng)持續(xù)、健康發(fā)展，為有關(guān)主管部門和學(xué)校在進(jìn)行衛(wèi)生安全教育、管理及制定控制真菌性疾病感染、傳播的措施方面提供了科學(xué)依據(jù)。