2017年我院腸桿菌科細(xì)菌臨床分布及耐藥性分析

尹利娟 楊振華 楊樂園

摘要：目的? 分析寶山區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院2017年所分離腸桿菌科細(xì)菌在臨床標(biāo)本中的分布和對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性。方法? 菌株來源于2017年1月1日～12月31日臨床送檢各類標(biāo)本中分離出的腸桿菌科細(xì)菌1054株。剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株。用西門子的MicroScan WalkAway96全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏測試系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥物敏感試驗(yàn)，K-B紙片擴(kuò)散法作為藥敏補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)，依照CLSI制定的最新的判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷藥敏試驗(yàn)結(jié)果。結(jié)果? 2017年分離出的腸桿菌科細(xì)菌1054株，主要來源于痰液標(biāo)本和中段尿標(biāo)本，分別占39.85%和31.03%;分離率最高的是肺炎克雷伯桿菌和大腸埃希菌，分別占39.94%和35.67%;其次是奇異變形桿菌和陰溝腸桿菌，分別占6.83%和5.79%;肺炎克雷伯菌亞胺培南和美羅培南的耐藥率較高，分別為38.24%和 39.43%，敏感率均為59.86%;奇異變形桿菌亞胺培南的耐藥率高于美羅培南。肺炎克雷伯菌ESBLs檢出率為45.84%，大腸埃希菌45.74%，奇異變形桿菌為45.83%。結(jié)論 我院2017年分離的腸桿菌科細(xì)菌中以肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌為主，細(xì)菌的耐藥問題日趨嚴(yán)重，醫(yī)院應(yīng)引起高度重視，加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性的監(jiān)測，指導(dǎo)臨床合理用藥。

關(guān)鍵詞：腸桿菌科細(xì)菌;抗菌藥物;耐藥率

中圖分類號(hào)：R446.5? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2019.01.042

文章編號(hào)：1006-1959（2019）01-0136-03

Analysis of Clinical Distribution and Drug Resistance of Enterobacteriaceae in Our Hospital in 2017

YIN Li-juan，YANG Zhen-hua，YANG Le-yuan

（Department of Clinical Laboratory，Shanghai Baoshan District Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine，Shanghai 201999，China）

Abstract：Objective? To analyze the distribution of Enterobacteriaceae isolated from Baoshan District Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine in clinical specimens in 2017 and the resistance to common antibiotics.Methods? The strains were derived from 1054 strains of Enterobacteriaceae isolated from clinical specimens from January 1 to December 31， 2017. Exclude duplicate strains from the same site in the same patient.The bacteria identification and drug sensitivity test were carried out by Siemens' MicroScan WalkAway 96 automatic microbial identification/drug sensitivity test system. The K-B disk diffusion method was used as a drug sensitivity supplementation experiment， and the drug sensitivity test results were judged according to the latest judgment standard established by CLSI.Results? 1054 strains of Enterobacteriaceae isolated from 2017， mainly from sputum specimens and mid-stage urine specimens， accounting for 39.85% and 31.03%， respectively; the highest isolation rates were Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli， accounting for 39.94 % and 35.67%; followed by Proteus mirabilis and Enterobacter cloacae accounting for 6.83% and 5.79%; Klebsiella pneumoniae imipenem and meropenem have higher resistance rates， 38.24% and 39.43%， respectively. The sensitivity rate was 59.86%; the resistance rate of imipenem was higher than that of meropenem. The detection rate of ESBLs of Klebsiella pneumoniae was 45.84%， Escherichia coli 45.74%， and Proteus mirabilis 45.83%.Conclusion? The Enterobacteriaceae bacteria isolated in our hospital in 2017 are mainly Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli. The drug resistance problem is becoming more and more serious. The hospital should pay great attention to strengthen the monitoring of bacterial resistance and guide clinical practice.Rational use of drugs.

Key words：Enterobacteriaceae bacteria;Antibacterial drugs;Resistance rate

腸桿菌科細(xì)菌廣泛存在于自然界中，是重要的條件致病菌。近年來，由于廣譜抗生素的不合理使用，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的耐藥性日趨嚴(yán)重，給臨床用藥的選擇帶來了很大的困難。本文通過對(duì)2017年我院臨床分離的腸桿菌科細(xì)菌的分布特點(diǎn)和耐藥性的分析，為臨床合理使用抗菌藥物的提供參考。

1 材料與方法

1.1菌株來源? 所有菌株均來源于上海市寶山區(qū)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院2017年1月1日～12月31日臨床送檢各類標(biāo)本中分離出的腸桿菌科細(xì)菌1054株。剔除同一患者相同部位的重復(fù)菌株。

1.2細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定? 細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版進(jìn)行操作。細(xì)菌培養(yǎng)的羊血瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基均購自上海伊華生物制品公司。菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)：采用西門子的MicroScan WalkAway96全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏測試儀、配套的NC50細(xì)菌鑒定/藥敏測試復(fù)合板及添加劑。

1.3藥敏試驗(yàn)? 采用西門子的MicroScan WalkAway96全自動(dòng)微生物鑒定/藥敏測試儀及配套的NC50細(xì)菌鑒定/藥敏（MIC）復(fù)合板。K-B紙片擴(kuò)散法作為藥敏補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)，所用MH培養(yǎng)基購自上海伊華生物制品公司，藥敏紙片來自英國OXOID。按CLSI最新的標(biāo)準(zhǔn)判讀藥敏結(jié)果。

1.4質(zhì)控菌株為大腸桿菌ATCC 25922、銅綠假單胞菌ATCC 27853、大腸桿菌ATCC 35218，由上海市臨床檢驗(yàn)中心提供。

2 結(jié)果

2.1 1054株腸桿菌科細(xì)菌在不同標(biāo)本中的分布? 分離出的1054株腸桿菌科細(xì)菌主要來源于痰液標(biāo)本和中段尿標(biāo)本，分別占39.85%和31.03%，見表1。

2.2 1054株腸桿菌科細(xì)菌的構(gòu)成? 檢出的腸桿菌科細(xì)菌中分離率最高的是肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌，分別占39.94%和35.67%;其次是奇異變形桿菌、陰溝腸桿菌等;還有一些菌種分離株不滿5株，故未做分類統(tǒng)計(jì)，見表2。

2.3 主要腸桿菌科細(xì)菌的敏感率和耐藥率? 所檢出的腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類藥物有不同程度的耐藥，其中肺炎克雷伯菌對(duì)亞胺培南和美羅培南的耐藥率較高，分別為38.24%和39.43%，敏感率均只有59.86%;奇異變形桿菌亞胺培南的耐藥率高于美羅培南。β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑藥物中，氨芐西林/舒巴坦敏感性較低，大腸埃希菌和奇異變形桿菌的敏感率均不到40%。常見的4種腸桿菌科細(xì)菌對(duì)替加環(huán)素的耐藥率最低，見表3。

2.4肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌和奇異變形桿菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的情況? ESBLs陽性的腸桿菌科細(xì)菌中，肺炎克雷伯菌陽性率為45.84%，大腸埃希菌45.74%，奇異變形桿菌為45.83%，見表4。

3 討論

2017年我院臨床送檢各類標(biāo)本中分離出的腸桿菌科細(xì)菌1054株，主要分離至呼吸道和泌尿道標(biāo)本，分離率最高的是肺炎克雷伯菌，占39.94%，其次為大腸埃希菌，占35.67%，與徐建民[1]和黃華泥[2]等報(bào)道不一致，這可能跟地區(qū)差異有關(guān)。奇異變形桿菌和陰溝腸桿菌略低，分別為 6.83%和 5.79%，其他腸桿菌科細(xì)菌檢出率都不足3%。肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌共占了75.61%，占腸桿菌科細(xì)菌的大部分，因此，應(yīng)將此2種菌視為醫(yī)院感染控制重要的目的監(jiān)控菌。

所檢出的腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類藥物有不同程度的耐藥，肺炎克雷伯菌和大腸埃希菌的亞胺培南和美羅培南的藥敏結(jié)果與我院2016年的結(jié)果[3]基本持平，而奇異變形桿菌的亞胺培南和美羅培南的耐藥率高于2016年的結(jié)果，并且奇異變形桿菌亞胺培南的耐藥率高于美羅培南。肺炎克雷伯菌亞胺培南和美羅培南的耐藥率最高，分別為38.24%和39.43%，敏感率均只有59.86%，與黃華泥[2]等報(bào)道的對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物全部敏感有顯著差異。藥敏結(jié)果雖存在有地區(qū)差異，但此結(jié)果也高于郭燕[4]等報(bào)道的2016年上海市細(xì)菌耐藥性監(jiān)測的平均數(shù)據(jù)。有文獻(xiàn)報(bào)道，腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類的耐藥性主要由于細(xì)菌產(chǎn)生KPC類碳青霉烯酶[5]，這類酶可導(dǎo)致細(xì)菌幾乎對(duì)所有的β-內(nèi)酰胺類包括第三代、第四代頭孢菌素和酶抑制劑復(fù)方制劑耐藥[4]。ESBLs陽性的腸桿菌科細(xì)菌中，肺炎克雷伯菌陽性率為45.84%、大腸埃希菌45.74%、奇異變形桿菌為45.83%，除了大腸埃希菌的檢出率低于2016年上海市細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[4]的數(shù)據(jù)，肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌的檢出率均高于該報(bào)道的數(shù)據(jù)。

有研究顯示，對(duì)碳青霉烯類耐藥的肺炎克雷伯菌約有59.6%～100%的菌株在產(chǎn)KPC酶的同時(shí)產(chǎn)ESBLs[6]，因此，造成了ESBLs的檢出率不能被真實(shí)反映。由于產(chǎn)ESBLs的菌株存在由質(zhì)粒介導(dǎo)的CTX耐藥基因，并同時(shí)攜帶AmpC酶，氨基糖苷類鈍化酶和喹諾酮類耐藥基因[7]，所以產(chǎn)ESBLs菌株耐藥性顯著高于非產(chǎn)ESBLs菌株?？紤]國內(nèi)臨床腸桿菌科細(xì)菌主要產(chǎn)生CTX-M型ESBLs酶，有學(xué)者提出是否可將腸桿菌科細(xì)菌對(duì)頭孢噻肟的耐藥率視作產(chǎn)ESBLs的檢出率的建議[8]。β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑藥物中，氨芐西林/舒巴坦敏感性較低，大腸埃希菌和奇異變形桿菌的敏感率均不到40%。藥敏結(jié)果顯示替加環(huán)素的耐藥率最低、敏感性最高。

臨床研究表明產(chǎn)碳青霉烯類細(xì)菌的耐藥性復(fù)雜，并與其他耐藥機(jī)制相互影響，如外膜通透性增加、主動(dòng)外排系統(tǒng)活躍、藥物作用位點(diǎn)改變等[9]，因此臨床一旦發(fā)生此類細(xì)菌感染時(shí)，往往因?yàn)槿狈τ行У闹委熕幬锒斐芍委熇щy。

綜上所述，堅(jiān)持定期進(jìn)行細(xì)菌耐藥性監(jiān)測，有助于了解細(xì)菌耐藥性的變遷和耐藥菌株的及時(shí)檢出，并為臨床醫(yī)生合理使用抗生素提供理論依據(jù)。同時(shí)，醫(yī)院感控應(yīng)引起重視，查找碳青霉烯類藥物高耐藥的原因并積極采取控制措施，以防止碳青霉烯類耐藥菌的擴(kuò)散和蔓延。

參考文獻(xiàn)：

[1]徐建民，周麗銀.兒童患者中常見腸桿菌科細(xì)菌藥敏分析[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，36（14）：2068-2072.

[2]黃華泥，黃智明，徐五星，等.老年患者腸桿菌科細(xì)菌感染的種類與耐藥性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2015，25（17）：3866-3868.

[3]鈕靜，楊樂園，楊振華，等.2016年上海市某院分離細(xì)菌的分布及耐藥性監(jiān)測[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2017，14（23）：3453-3460.

[4]郭燕，朱德妹，胡付品，等.2016年上海市細(xì)菌耐藥性監(jiān)測[J].中國感染與化療雜志，2017，17（6）：609-622.

[5]Hu FP，Chen SD，Xu X，et al.Emergence of carbapenem-resistant clinical Enterobacteriaceae isolates from a teaching hospital in Shanghai，China[J].J MeD Microbiol，2012，61（Pt1）：132-136.

[6]Chen S，Hu F，Xu X，et al.High prevalence of KPC-2-type carbapenemase coupled with CTX-M-type extended-spectrum beta -lactamases in carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae in a teaching hospital in China[J].Antimicrob Agents Chemother，2011，55（5）：2493-2494.

[7]Curello J，MacDougall C.Beyond susceptible and resistant，partⅡ：treatment of infections due to gram-negative organisms producing extended-spectrumβ-lactamases[J].J Pediatr Pharmacol Ther，2014，19（3）：156-164.

[8]Wang P，Hu F，Xiong Z，et al.Susceptibility of extended-spectrum-β-lactamase-producing Enterobacteriaceae according to the new CLSI breakpoints[J].J Clin Microbiol，2011，49（9）：3127-3131.

[9]賈曉燕，張成顯.腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)碳青霉烯酶研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)信息，2014，27（6）：645.