復(fù)方克林霉素凝膠劑的研制與質(zhì)量控制

黃曉蕾

摘 要：本實驗研究復(fù)方克林霉素凝膠劑的制備方法進(jìn)行研究。含量測定方法：固定相為：奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），乙腈-[0.68%磷酸氫二鉀溶液（含1%三乙胺）]（80∶20），檢測波長：210nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。克林霉素在10～160μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。克林霉素平均回收率分別為99.3%，RSD為0.83%。結(jié)論：本制劑穩(wěn)定、可靠。溫度過低或者溫度過高都會對復(fù)方克林霉素凝膠劑質(zhì)量產(chǎn)生影響，所以復(fù)方克林霉素凝膠劑儲存條件為置陰涼處。復(fù)方克林霉素凝膠劑在陰涼處可以存放24個月。

關(guān)鍵詞：復(fù)方克林霉素凝膠劑；制備；質(zhì)量

克林霉素是一種林可胺類抗生素，為林可霉素的衍生物，自1970年在我國上市。克林霉素別名為林大霉素、氯潔霉素、鹽酸克林霉素、鹽酸氯潔霉素等?？肆置顾赝ǔＳ糜谥委焻捬跫?xì)菌的感染，但亦可治療原生動物疾病[1-4]?？肆置顾厥丘畀彽某Ｓ猛庥锰幏?。凝膠劑系指藥物與能形成凝膠的輔料制成溶液、混懸或乳狀液型的稠厚液體或半固體制劑。本實驗研究復(fù)方克林霉素凝膠劑的制備方法進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

1.1儀器：百典BLY系列立式恒溫水槽（上海百典儀器設(shè)備有限公司）；雙光束紫外可見分光光度計-UV1900（杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司）；KYX-800YS 色譜配套超聲波清洗機（沈陽科晶自動化設(shè)備有限公司）；HZY-404/503實驗室電子天平（浙江景程生物科技有限公司）；A60 均質(zhì)機中式源自歐河實驗室乳化機（上海歐河機械設(shè)備有限公司）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東莞康潤儀器設(shè)備有限公司）；ELGA Purelab UHQ小型超純水儀（北京東迅天地醫(yī)療儀器有限公司）；帕恩特應(yīng)用分析級超純水器（北京湘順源科技有限公司）；電熱恒溫水浴鍋-DU-30（杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司）；DTD-6小容量臺式超聲波清洗機（鼎泰（湖北）生化科技設(shè)備制造公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對照品：克林霉素 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑：甲醇（東莞市恒科化工有限公司）、乙腈（濟(jì)南鴻鑫化工有限公司）、鹽酸（濟(jì)南鴻鑫化工有限公司）、丙二醇（濟(jì)南鴻鑫化工有限公司）、乙醇（濟(jì)南鴻鑫化工有限公司）。

1.5 原輔料：甘油（西安晉湘藥用輔料有限公司）、卡波姆941（西安晉湘藥用輔料有限公司）、乙二胺四乙酸（西安晉湘藥用輔料有限公司）。

2 制備方法

2.1 處方

克林霉素、甘油、卡波姆941、甲硝唑、丙二醇、三乙醇胺等。

2.2 復(fù)方克林霉素凝膠劑的制備

卡波姆941加純化水，浸泡24小時，加丙二醇、甘油，用三乙醇胺調(diào)PH值7.0-8.0，水浴加熱溶解，加入克林霉素、甲硝唑、乙二胺四乙酸，攪拌溶解，加蒸餾水補至全量，攪拌均勻，分裝，即得。

3 質(zhì)量控制

3.1 性狀

本品為白色或淡黃色透明凝膠。

3.2含量測定

3.2.1 依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[5-6]。流動相：乙腈-[0.68%磷酸氫二鉀溶液（含1%三乙胺）]（80∶20），檢測波長：210nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按克林霉素計算應(yīng)不得低于3000。

3.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取克林霉素對照品適量，置容量瓶中，加甲醇溶解，加甲醇制成每1mL含50μg的溶液，避光保存，即得。

3.2.3 供試品溶液的制備

取復(fù)方克林霉素凝膠劑精密稱定，置具小燒杯中，加流動相適量，超聲處理5分鐘，放冷至室溫，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5m1，置25m1量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過。取續(xù)濾液，即得。

3.2.4 專屬性試驗

依照處方取甘油、卡波姆941、甲硝唑、丙二醇、三乙醇胺等，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性液，依色譜條件測定，結(jié)果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

3.2.5 精密度試驗

依照3.2.2項下制備對照品溶液，精密吸取克林霉素對照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測定峰面積積分值，對照品峰面積積分值的RSD為0.62%。結(jié)果表明，本實驗精密度良好。

3.2.6 重現(xiàn)性試驗

分別稱取樣品6份，分別依照3.2.3項下供試品制備方法制備供試品，按含量測定項下方法測定含量，并計算樣品的RSD值為0.61%，結(jié)果表明，此含量測定方法的重現(xiàn)性良好。

3.2.7 回收率試驗

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的克林霉素對照品，測定含量，計算回收率。平均回收率為99.3%，RSD為0.83%。

3.2.8 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為10、20、40、80、120、140、160μg·mL-1的對照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算回歸方程。試驗表明，氨芐青霉素對照品在10～160μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.3 微生物限度檢查

按照《中國藥典》2015年版附錄所載方法測定，結(jié)果符合規(guī)定。

3.4 穩(wěn)定性考察

將本品置于25℃的恒溫箱內(nèi)，分別于第1、2、3、12、24個月末取樣并測定，考察外觀、微生物限度、含量的測定結(jié)果做比較。在25攝氏度下放置36個月后， 復(fù)方克林霉素凝膠劑未發(fā)生明顯變化。經(jīng)測定發(fā)現(xiàn)， 外觀、微生物限度、含量均穩(wěn)定，表明復(fù)方克林霉素凝膠劑在25攝氏度下可以存放24個月。溫度過低或者溫度過高都會對復(fù)方克林霉素凝膠劑質(zhì)量產(chǎn)生影響，所以復(fù)方克林霉素凝膠劑儲存條件為置陰涼處。

4 討論

本制劑穩(wěn)定、可靠，符合中國藥典相關(guān)規(guī)定。此測定方法可用于復(fù)方克林霉素凝膠劑中克林霉素的含量測定。復(fù)方克林霉素凝膠劑在陰涼處可以存放24個月。

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