制霉素搽劑質(zhì)量控制與穩(wěn)定性研究

叢萍

摘 要：本實(shí)驗(yàn)研究制霉素搽劑的制備方法進(jìn)行研究。含量測(cè)定方法：固定相為：奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），醋酸鈉緩沖溶液（PH4.0）-乙腈（60∶40），檢測(cè)波長(zhǎng)：306nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。；制霉素在10～320μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。制霉素平均回收率分別為99.1%，RSD為0.86%。結(jié)論：本制劑穩(wěn)定、可靠。制霉素搽劑可以存放24個(gè)月。

關(guān)鍵詞：制霉素搽劑；制備；質(zhì)量

制霉素為黃色或棕黃色粉末，對(duì)光、空氣、酸和堿均不穩(wěn)定。制霉素可與真菌細(xì)胞膜上的甾醇相結(jié)合，致細(xì)胞膜通透性的改變，以致重要細(xì)胞內(nèi)容物漏失而發(fā)揮抗真菌作用。制霉素也用于長(zhǎng)期服用廣譜抗生素所致的真菌性二重感染。制霉素可用于消化道真菌感染、老年霉菌性陰道炎、念珠菌陰道炎、乳腺炎等[1-4]。搽劑一種在皮膚上搽用的液體外用制劑，可分為溶液型、乳劑型及混懸液型，一般以醇或油等為分散劑。搽劑最早出現(xiàn)于我國(guó)現(xiàn)存最早的出土于馬王堆漢墓的古醫(yī)方《五十二病方》。最早搽劑為天然藥物制劑，即利用自然界中常見(jiàn)的某種藥物不加炮制而稍作加工后直接使用，為人類(lèi)早期對(duì)天然藥物的一種原生態(tài)使用方法。本實(shí)驗(yàn)研究制霉素搽劑的制備方法進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：百典BLY系列立式恒溫水槽（上海百典儀器設(shè)備有限公司）；電熱恒溫水浴鍋-DU-30（杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司）；ELGA Purelab UHQ小型超純水儀（北京東迅天地醫(yī)療儀器有限公司）；帕恩特應(yīng)用分析級(jí)超純水器（北京湘順源科技有限公司）；雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)-UV1900（杭州匯爾儀器設(shè)備有限公司）；HZY-404/503實(shí)驗(yàn)室電子天平（浙江景程生物科技有限公司）；T9雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；晨陽(yáng)臺(tái)式大容量離心機(jī)（常州市金壇晨陽(yáng)電子儀器）；電熱恒溫培養(yǎng)箱（廣州越特科學(xué)儀器有限公司）；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東莞康潤(rùn)儀器設(shè)備有限公司）；Stuart加熱磁力攪拌器（艾泰赫生化科技（蘇州）有限公司）； KYX-800YS 色譜配套超聲波清洗機(jī)（沈陽(yáng)科晶自動(dòng)化設(shè)備有限公司）；KHW-D-1LC精密拉伸水浴鍋（上?？坪銓?shí)業(yè)發(fā)展有限公司）；旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)專(zhuān)用恒溫槽CH1006（上海右一儀器有限公司）；DTD-6小容量臺(tái)式超聲波清洗機(jī)（鼎泰（湖北）生化科技設(shè)備制造公司）。

1.2色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm）。

1.3對(duì)照品：制霉素 購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：甲醇（東營(yíng)市鑫旺化工有限責(zé)任公司）、乙腈（東營(yíng)市鑫旺化工有限責(zé)任公司）、鹽酸（蘇州源泰潤(rùn)化工有限公司）、醋酸鈉（江陰祥輝化工有限公司）、醋酸（東營(yíng)市鑫旺化工有限責(zé)任公司）、乙醇（東營(yíng)市鑫旺化工有限責(zé)任公司）。

1.5 原輔料：甘油（西安晉湘藥用輔料有限公司）。

2 制備方法

2.1處方

制霉素、甘油等。

2.2制霉素搽劑的制備

制霉素、甘油等混合，攪拌均勻，分裝，即得。

3質(zhì)量控制

3.1性狀

本品為黃色粘稠性混懸液。符合《中國(guó)藥典》2015年版對(duì)搽劑的要求。

3.2 含量測(cè)定

3.2.1 依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[5-6]。流動(dòng)相：醋酸鈉緩沖溶液（PH4.0）-乙腈（60∶40），檢測(cè)波長(zhǎng)：306nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按制霉素計(jì)算應(yīng)不得低于3000。

3.2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取制霉素對(duì)照品適量，置容量瓶中，加甲醇溶解，加甲醇制成每1mL含100μg的溶液，避光保存，即得。

3.2.3 供試品溶液的制備

取制霉素搽劑精密稱定，置具小燒杯中，加流動(dòng)相適量，超聲處理（240W，40kHz）5分鐘，放冷至室溫，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5m1，置25m1量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。取續(xù)濾液，即得。

3.2.4 專(zhuān)屬性試驗(yàn)

依照處方取甘油，按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按供試品溶液的制備方法制成陰性液，依色譜條件測(cè)定，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒(méi)有干擾，表明本方法專(zhuān)屬性良好。

3.2.5 精密度試驗(yàn)

依照3.2.2項(xiàng)下制備對(duì)照品溶液，精密吸取制霉素對(duì)照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積積分值，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.82%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

3.2.6 重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取樣品6份，分別依照3.2.3項(xiàng)下供試品制備方法制備供試品，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值為0.81%，結(jié)果表明，此含量測(cè)定方法的重現(xiàn)性良好。

3.2.7 回收率試驗(yàn)

取已知含量的同一批供試品各6份，分別精密添加一定量的制霉素對(duì)照品，測(cè)定含量，計(jì)算回收率。平均回收率為99.1%，RSD為0.86%。

3.2.8 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為10、20、40、80、160、320μg·mL-1的對(duì)照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。試驗(yàn)表明，氨芐青霉素對(duì)照品在10～320μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

3.3 微生物限度檢查

按照《中國(guó)藥典》2015年版附錄所載方法測(cè)定，結(jié)果符合規(guī)定。

3.4 穩(wěn)定性考察

將本品置于30℃的恒溫箱內(nèi)，分別于第1、2、3、12、24個(gè)月末取樣并測(cè)定，考察外觀、微生物限度、含量的測(cè)定結(jié)果做比較。放置36個(gè)月后， 制霉素搽劑片未發(fā)生明顯變化。經(jīng)測(cè)定發(fā)現(xiàn)， 外觀、微生物限度、含量均穩(wěn)定，表明制霉素搽劑可以存放24個(gè)月。

4 討論

本制劑穩(wěn)定、可靠，符合中國(guó)藥典相關(guān)規(guī)定。此測(cè)定方法可用于制霉素搽劑中制霉素的含量測(cè)定。制霉素搽劑可以存放24個(gè)月。

參考文獻(xiàn)

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