L-茶氨酸對小鼠腸道形態(tài)結構及游離氨基酸的影響

彭影琦，肖文軍,3，張盛，袁冬寅，林玲，周陽，龔志華

1. 湖南農(nóng)業(yè)大學茶學教育部重點實驗室，湖南 長沙 410128；2. 湖南農(nóng)業(yè)大學國家植物功能成分利用工程技術研究中心，湖南 長沙 410128；3. 湖南省植物功能成分利用協(xié)同創(chuàng)新中心，湖南 長沙 410128

腸道是機體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的重要場所，也是機體最大的免疫器官。腸道發(fā)揮功能依賴其自身形態(tài)結構的完整性。研究表明，部分氨基酸對改善腸道的形態(tài)結構具有較好的作用，如鳥氨酸是 DNA、蛋白質(zhì)及腸上皮細胞增殖、分化和修補不可缺少的前體物，精氨酸對小腸的完整性、分泌、免疫反應和上皮細胞的遷移及調(diào)節(jié)腸內(nèi)血液流量具有重要作用，甘氨酸、谷氨酸可增強腸道黏膜對毒素和氧化損傷的防御能力[1]，谷氨酰胺對提高腸絨毛高度、保持腸道完整性、維持腸道功能以及防止腸道萎縮具有良好的作用[2]。L-茶氨酸是一種存在于茶樹及少量山茶科植物中的非蛋白質(zhì)氨基酸，為谷氨酰胺類似物，具有維護產(chǎn)毒大腸桿菌感染的小鼠腸道組織形態(tài)與結構的完整性、提高腸道非特異性免疫功能[3]、誘導結腸癌HT-29細胞凋亡[4]、抑制小腸炎癥[5]等多種生理功能。近年研究表明，大鼠灌喂 L-茶氨酸后，血清中的谷氨酸、天冬氨酸、蛋氨酸、賴氨酸，及肝臟中甘氨酸、苯丙氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺含量發(fā)生不同程度的變化[6]。L-茶氨酸可升高大鼠肝臟生糖氨基酸及兼性生糖氨基酸的含量[7]，也可通過減少機體谷氨酸鹽的增加和恢復谷胱甘肽水平來減少阿霉素誘導的氧化損傷[8]，以及可能通過影響腦內(nèi)谷氨酸、蛋氨酸含量來增強患有焦慮和抑郁癥大鼠的海馬活動并發(fā)揮抗焦慮作用[9]。這些研究啟示，L-茶氨酸的健康功能可能與機體尤其是腸道中的氨基酸代謝密切相關，但當前研究主要集中于血清、肝臟中的氨基酸含量分析，而鮮見L-茶氨酸對腸道氨基酸代謝的影響研究。為此，本研究以4周齡雄性昆明雄性小鼠為試驗對象，以谷氨酰胺為對照，連續(xù)灌喂 28 d L-茶氨酸，探究 L-茶氨酸對小鼠腸道形態(tài)結構及游離氨基酸的影響，為 L-茶氨酸深層次利用提供科學依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

L-茶氨酸，純度≥98%，購于德國sigma試劑公司；L-谷氨酰胺，純度≥98%、磺基水楊酸購于國藥集團化學試劑有限公司；堿性磷酸酶（AKP）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、尿素氮（BUN）、血糖（Glucose）、血清白蛋白（Alb）、總蛋白（TP）、總膽固醇（T-CHO）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等試劑盒購于南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器設備

多功能酶標儀、移液槍（美國 Thermo 公司）；96孔酶標板（深圳金燦華實業(yè)有限公司）；L-8900氨基酸分析儀（日本日立公司）；PowerGen125高速勻漿機（中國賽默飛世爾科技公司）；Allegra X-22R臺式離心機（美國貝克曼公司）；M2104電子天平（中國梅特勒-托利多上海有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 動物試驗設計

SPF級 KM小鼠，雄性，4周齡，18～22 g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，實驗動物質(zhì)量合格證編號：43004700039704。動物飼料：繁殖飼料，顆粒型，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供。每5只小鼠飼養(yǎng)于1籠中，籠中鋪墊楊木墊料。將 50只小鼠于溫度（25±2）℃、濕度 40%～60%以及 12 h 明、12 h 暗的條件下適應性飼養(yǎng) 3 d后，按每組10只隨機分為正常組（CK）、茶氨酸低劑量組（100 mg·kg-1·d-1，LLT）、茶氨酸中劑量組（300 mg·kg-1·d-1，MLT）、茶氨酸高劑量組（400 mg·kg-1·d-1，HLT）、谷氨酰胺組（300 mg·kg-1·d-1，LG）。

將各組相應劑量的L-茶氨酸、谷氨酰胺溶解于10 mL蒸餾水中，每只小鼠灌喂0.3 mL，正常組灌喂等體積蒸餾水（0.3 mL），其余各組灌喂相應劑量的L-茶氨酸、谷氨酰胺溶液；每日定時灌喂，連續(xù)灌喂 28 d，第 29天禁食不禁水12 h后進行麻醉取樣。摘眼球取血，血液室溫靜置 30 min，3 000 r·min-1離心 10 min，取上層血清，-80℃冰箱凍存。小腸取出后，生理鹽水沖洗，對十二指腸、空腸、回腸，分別用錫箔紙包裹，液氮速凍，-80℃冰箱凍存，解剖取心、肝、脾、肺、腎，稱重。

1.3.2 小鼠采食量和體質(zhì)量測定

各組小鼠每日定量添加 (200±2) g日糧，定時稱量當日剩余日糧，每只小鼠隔日稱量體質(zhì)量，并在灌喂的第7、14、21、28 d及禁食12 h后稱取體質(zhì)量。

1.3.3 器官指數(shù)測定

將小鼠心、肝、脾、肺、腎取出后，用4℃生理鹽水洗凈血漬，濾紙吸干表面水分后稱其濕重。計算心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)、肺指數(shù)、腎臟指數(shù)。計算方法為：

器官指數(shù)（%）= 器官濕質(zhì)量（g）/小鼠禁食后體質(zhì)量（g）×100%

1.3.4 腸道形態(tài)結構的觀察

取十二指腸、空腸、回腸末端1 cm于10%中性甲醛中固定；采用石蠟包埋技術對腸道樣品進行處理，通過脫水、包埋、切片（4～5 μL厚度）和HE（蘇木精-伊紅）染色等4個步驟后，制作切片；采用圖像分析軟件采集圖像，并量取絨毛高度和隱窩深度，計算絨毛高度/隱窩深度（Villus height / Crypt depth，V/C）的比值。

1.3.5 小鼠血液生化指標檢測

按照試劑盒操作說明對血清AKP、ALT、AST、BUN、Glucose、Alb、TP、T-CHO、TG、HDL-C、LDL-C進行測定。

1.3.6 血清及腸道游離氨基酸檢測

血清樣品處理：將 250 μL血清待測樣品加入等體積8%磺基水楊酸于4℃過夜，10 000 r·min-1離心 15 min，0.22 μm 濾膜過濾。

不同腸道樣品處理：取十二指腸、空腸、回腸樣品 100 mg，加入 1 mL 0.01 mol·L-1鹽酸，勻漿，定容至10 mL，取2 mL進行檢測。

游離氨基酸含量檢測：采用氨基酸分析儀進行檢測必需氨基酸（EAA）和非必需氨基酸（NEAA），其中EAA包括：蘇氨酸（Thr）、賴氨酸（Lys）、異亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、纈氨酸（Val）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、色氨酸（Trp）、組氨酸（His）；NEAA包括：天冬氨酸（Asp）、絲氨酸（Ser）、谷氨酸（Glu）、肌氨酸（Sar）、甘氨酸（Gly）、丙氨酸（Ala）、瓜氨酸（Cit）、酪氨酸（Tyr）、Orn（鳥氨酸）、Arg（精氨酸）、脯氨酸（Pro）、半胱氨酸（Cys）、磷酸絲氨酸（P-Ser）、?；撬幔═au）、r-氨基丁酸（GABA）。

1.3.7 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行方差分析，各組間采用最小顯著差數(shù)法（LSD）檢驗，統(tǒng)計結果以均數(shù)±標準差（±s）表示，P＜0.05 表示有顯著性差異，具有統(tǒng)計學意義。

2 結果與分析

2.1 L-茶氨酸對小鼠采食量和體質(zhì)量增長的影響

表1表明，與CK組相比，LLT組、MLT組、HLT組第 7、14、21、28天體質(zhì)量、平均增重、采食量均無顯著差異，與譚俊峰等[10]報道一致；與 LG組相比，在灌喂 14 d后，L-茶氨酸各劑量組的體質(zhì)量顯著降低（P＜0.05）；L-茶氨酸各劑量組的平均增重、第21、28天體質(zhì)量雖有隨劑量增大而增加的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 L-茶氨酸對小鼠器官指數(shù)的影響

表2顯示，各組間的心、肝、脾、肺、腎的器官指數(shù)均無顯著差異（P＞0.05）。與譚俊峰等[10]、童海鷗等[7]研究結果相符。

2.3 L-茶氨酸對小鼠腸道形態(tài)結構的影響

表3、圖1表明，與CK組相比，LLT組十二指腸絨毛高度顯著增加（P＜0.05），同時MLT、HLT組十二指腸、空腸的絨毛高度及V/C顯著增加（P＜0.05）；與LG組相比，LLT組十二指腸、空腸的絨毛高度、V/C及回腸的絨毛高度顯著降低（P＜0.05），MLT組、HLT組則無顯著差異（P＞0.05）；隨著 L-茶氨酸劑量的增大，各部位的絨毛長度逐漸增加，且與LLT組相比，MLT組、HLT組十二指腸和空腸的絨毛長度及V/C顯著增加（P＜0.05）。說明 L-茶氨酸可通過增加腸道絨毛高度、提高 V/C來改善小鼠腸道形態(tài)結構，增強小腸消化吸收功能，促進機體對營養(yǎng)吸收。

表1 L-茶氨酸對小鼠采食量和體質(zhì)量增長的影響Table 1 Effects of L-theanine on feed intake and body weight of mice

表2 L-茶氨酸對小鼠器官指數(shù)的影響Table 2 Effects of L-theanine on mice organ index

表3 L-茶氨酸對小鼠腸道形態(tài)結構的影響Table 3 Effect of L-theanine on morphology of intestinal tract in mice

圖1 小鼠不同部位腸道組織切片圖Fig. 1 Tissue sections at different intestinal sites of mice

2.4 L-茶氨酸對小鼠血清生化指標的影響

表4表明，與CK組相比，MLT組、HLT組的BUN顯著降低，HLT組的AKP、TP顯著升高（P＜0.05）；與LG組相比，LLT組的AKP、TG及 MLT組的 AKP、TG顯著降低（P＜0.05），而 HLT 組無顯著差異（P＞0.05）；與HLT組相比，LLT組的AKP、TG、TP顯著降低，MLT組 AKP、BUN、TP顯著降低（P＜0.05）。AKP與機體對蛋白質(zhì)、糖類、脂肪的吸收、運輸、合成密切相關，能促進脂肪的消化吸收以及鈣和磷的沉積；氨基酸、蛋白質(zhì)平衡良好時血清BUN下降；TP反應了機體對蛋白質(zhì)的吸收、轉(zhuǎn)運、代謝水平[11]。MLT組、HLT組對AKP、TP、BUN產(chǎn)生的顯著影響，且HLT組與 LG組較為接近，說明灌喂L-茶氨酸可促進機體蛋白質(zhì)代謝，提高了機體對氮的利用率。

2.5 L-茶氨酸對小鼠血清游離氨基酸的影響

表5顯示，與CK組相比，LLT組的必需氨基酸 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Phe、His及非必需氨基酸Asp、Glu、Arg、P-Ser、Tau含量顯著降低，而非必需氨基酸 Ala、Sar含量顯著升高（P＜0.05）；MLT組的Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Phe、His及 Asp、Glu、Arg、P-Ser、Tau含量顯著降低，而非必需氨基酸Sar含量顯著升高（P＜0.05）；HLT組的Thr、Ile、Leu、Val及 Asp、Glu、Arg、P-Ser、Tau含量顯著降低，而 Sar、Cys含量顯著升高（P＜0.05）。與LG組相比，LLT組的Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Phe 及 Asp、Ser、Glu、Arg、Orn、P-Ser、Tau含量顯著降低，而 Ala、Sar含量顯著升高（P＜0.05）；MLT組的Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Phe及非必需氨基酸 Asp、Ser、Glu、Arg、P-Ser、Tau含量顯著降低，而 Sar含量顯著升高（P＜0.05）；HLT組的Thr、Lys、Ile、Leu、Val及 Asp、Ser、Glu、Arg、P-Ser、Tau含量顯著降低，而Sar、Cys含量顯著升高（P＜0.05）。茶氨酸劑量組之間，相比較其他組，LLT組Leu、Orn顯著降低，Asp、Ala顯著升高；MLT組Arg顯著降低，Sar顯著升高；HLT組 Val、Cys顯著升高（P＜0.05）。此外，茶氨酸劑量組血清中游離氨基酸含量十分接近，Ile、 Leu、Val、Orn、Phe、His含量隨劑量的增大而升高，其中Leu、Val、Orn含量的升高具有顯著性（P＜0.05）。日糧中幾乎所有的谷氨酸都能被小腸黏膜分解而不能進入體循環(huán)[1]，支鏈氨基酸（Ile、Leu、Val）和α-酮戊二酸內(nèi)源合成的谷氨酸對維持體內(nèi)谷氨酸的動態(tài)平衡有重要作用[12]，Orn是谷氨酸分解的產(chǎn)物之一，這些氨基酸變化顯示出的劑量依賴性，可能與茶氨酸在機體內(nèi)代謝成谷氨酸[13]并影響了機體谷氨酸及其代謝相關氨基酸分解與合成有關。L-茶氨酸降低了小鼠血清中大部分游離氨基酸的含量，與童海鷗等[7]研究結果相似。

表4 L-茶氨酸對小鼠血清生化指標的影響Table 4 Effect of L-theanine on serum biochemical parameters in mice

表5 L-茶氨酸對小鼠血清游離氨基酸的影響Table 5 Effect of L-theanine on free amino acids in the serum of mice

2.6 L-茶氨酸對小鼠不同腸道組織的游離氨基酸影響

2.6.1 L-茶氨酸對小鼠十二指腸游離氨基酸的影響

表6表明，與CK組相比，LLT組的必需氨基酸 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及非必需氨基酸 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Tyr、Orn、Cys含量顯著升高，而非必需氨基酸P-Ser含量顯著降低（P＜0.05）；MLT 組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Gly、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro、Cys、P-Ser、Tau、GABA含量顯著升高（P＜0.05）；HLT 組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro、Cys、P-Ser、Tau、GABA含量顯著升高（P＜0.05）。與 LG 組相比，LLT 組 Lys、Leu 、Met、Phe 、Trp 及 Sar、Ala、Tyr、Orn、Arg、Cys、P-Ser、GABA含量顯著降低，Gly、Cit含量顯著升高（P＜0.05）；MLT組的 Lys、Leu、Trp及 Orn、Arg、Sar、GABA含量顯著降低，而 Asp、Ser、Glu、Gly、Ala、Cit含量顯著升高（P＜0.05）；HLT組的 Lys及Sar、Orn含量顯著降低，Thr、Ile、His及 Asp、Ser、Gly、Ala、Cit含量顯著升高（P＜0.05）。茶氨酸劑量組之間，相比較其他組，LLT組Lys、Trp 及 Asp、Ser、Ala、Arg、Pro、Cys、P-Ser、Tau、GABA含量顯著降低（P＜0.05）；MLT組 Glu、Gly、Tau顯著升高，Sar顯著降低（P＜0.05）；HLT組 Ile、Leu、GABA 顯著升高（P＜0.05）；此外，所有的必需氨基酸含量都隨茶氨酸劑量的增加而增加，其中 HLT組與 LLT組存在顯著差異（P＜0.05），與十二指腸絨毛高度及 V/C變化一致，可能是不同劑量茶氨酸對腸道營養(yǎng)吸收有不同程度的促進作用。說明 L-茶氨酸增加小鼠十二指腸的游離氨基酸含量且與劑量有關，其中 HLT組的效果最顯著并優(yōu)于LG組。

表6 L-茶氨酸對小鼠十二指腸游離氨基酸的影響Table 6 Effect of L-theanine on free amino acids in the duodenum of mice

2.6.2 L-茶氨酸對小鼠空腸游離氨基酸的影響

表7表明，與CK組相比，LLT組的Thr、Lys、Ile及 Ala、Orn、Pro、Sar含量顯著升高，P-ser、GABA含量顯著降低（P＜0.05）；MLT組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp 、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro、Cys、Tau、GABA 含量顯著升高，Cit含量顯著降低（P＜0.05）；HL-T組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro、Cys、Tau 含量顯著升高，Cit、GABA 含量顯著降低（P＜0.05）。與 LG 組相比，LLT 組的 His及 Ser、Tyr、Arg、GABA 含量顯著降低，Ala、Cit、Pro 、Tau含量顯著升高（P＜0.05）；MLT組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp 及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro、P-Ser、Tau、GABA 含量顯著升高（P＜0.05）；HLT 組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp 、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Cit、Tyr、Orn、Arg、Pro、P-Ser、Tau含量顯著升高，GABA含量顯著降低（P＜0.05）。茶氨酸劑量組之間，相比較其他組，LLT組Cit含量顯著升高，其余氨基酸含量顯著降低（P＜0.05）；MLT組的 Tau、GABA含量顯著升高，Cit含量顯著降低（P＜0.05）；HLT 組的 Thr、Lys、Val、Phe、His 及 Ser、Tyr、Orn、Arg、P-Ser 含量顯著升高（P＜0.05）；隨著茶氨酸劑量的增加，空腸中大部分游離氨基酸的含量升高，與空腸部位絨毛高度、V/C變化趨勢一致。說明 L-茶氨酸對小鼠空腸游離氨基酸含量的影響與劑量有關，且MLT組、HLT組優(yōu)于LG組。

表7 L-茶氨酸對小鼠空腸游離氨基酸的影響Table 7 Effect of L-theanine on free amino acids in the jejunum of mice

2.6.3 L-茶氨酸對小鼠回腸游離氨基酸的影響

表8表明，與CK組相比，LLT組的必需氨基酸 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及非必需氨基酸 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Cit、Tyr、Orn、Arg、Pro、Cys、P-Ser、GABA 含量顯著降低（P＜0.05）；MLT組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro 、Cys含量顯著降低，Cit、P-Ser顯著升高（P＜0.05）；HLT組的Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Gly、Ala、Cit、Tyr、Orn、Arg、Pro、Cys、Tau 含量顯著降低，P-Ser含量顯著增加（P＜0.05）。與 LG組相比，LLT組的 Arg、Sar、GABA含量顯著升高，Glu、Gly、Cit含量顯著降低（P＜0.05）；MLT 組的 Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Ala、Cit、Tyr、Orn、Arg、Pro、P-Ser、GABA 含量顯著增加（P＜0.05）；HLT組的Thr、Lys、Ile、Leu、Val、Met、Phe、Trp、His及 Asp、Ser、Glu、Sar、Ala、Tyr、Orn、Arg、Pro、P-Ser、GABA含量顯著增加，Cit、Tau含量顯著降低（P＜0.05）。茶氨酸劑量組之間，相比較其他組，LLT組除GABA含量無顯著差異外（P＞0.05），其余氨基酸含量顯著降低（P＜0.05）；MLT組 Sar、Cit、Tyr含量顯著升高（P＜0.05）；HLT組的His含量顯著增加（P＜0.05）；此外，大部分必需氨基酸的含量隨著茶氨酸劑量的升高而增加。說明MLT組、HLT組對小鼠回腸吸收游離氨基酸的影響優(yōu)于LLT組、LG組，但茶氨酸劑量組在回腸部位吸收能力低于CK組，與LG組對回腸部位吸收能力的影響趨勢一致。

表8 L-茶氨酸對小鼠回腸游離氨基酸的影響Table 8 Effect of L-theanine free amino acids in the ileal of mice

3 討論

Arg、Gly、Glu、Orn是對腸道維持健康、發(fā)揮功能至關重要的氨基酸。在本研究中，LLT組十二指腸中的 Gly、Glu、Orn含量，MLT組、HLT組十二指腸、空腸中Arg、Gly、Glu、Orn含量顯著升高，可能與 L-茶氨酸有利于腸絨毛上皮細胞攝取氨基酸用于合成蛋白質(zhì)和促進細胞的增殖有關[14]。同時，Trp、Gly、Met、His、Ser是一碳氨基酸，可作為嘌呤、嘧啶合成的原料，在核酸、核苷酸代謝中起重要作用。MLT組、HLT組顯著升高了十二指腸、空腸中的 Trp、Gly、Met、His、Ser含量，說明L-茶氨酸可能通過影響DNA、RNA的合成而促進十二指腸、空腸絨毛細胞生長，使絨毛高度顯著增加[15]。

血清游離氨基酸濃度可以反映機體氨基酸代謝狀況和氨基酸之間的平衡狀態(tài)，在營養(yǎng)不足時，血清游離氨基酸含量減少；在滿足機體對氨基酸需求的情況下，氨基酸模式越適合組織器官對氨基酸需求的比例，氨基酸利用率越高，血清氨基酸含量降低越多[16]。據(jù)報道，灌喂 400 mg·kg-1的 L-茶氨酸降低 SD大鼠血清大部分游離氨基酸的含量，升高肝臟中大部分生糖氨基酸、生酮氨基酸的含量[7]。氨基酸在腸道的分解代謝十分活躍，同時對維持腸道完整性和腸道功能至關重要。研究表明，氨基酸在腸道的首過代謝與腸道黏膜質(zhì)量正相關[17]，生長激素、抗生素、糖尿病等影響腸道黏膜質(zhì)量的因素都對腸道氨基酸代謝產(chǎn)生影響[14]，據(jù)報道，表皮生長因子可以改善腸道結構增加黏膜氨基酸沉積，減少血清游離氨基酸含量[18]。L-茶氨酸可以維護腸道形態(tài)及功能[3]，增加腸道絨毛高度及V/C比值，推測 L-茶氨酸可能通過增強腸道氨基酸的分解代謝、吸收代謝使血清游離氨基酸減少。本研究中，血清大部分游離氨基酸含量降低，各處理組之間采食量無顯著差異，MLT組BUN降低，HLT組BUN降低，而AKP和TP含量升高，說明茶氨酸改善了機體吸收的氨基酸比例，提高了氨基酸在機體中的利用效率，促進了機體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成。

研究發(fā)現(xiàn)，各茶氨酸劑量組與LG組相比，小腸各部位大多數(shù)游離氨基酸含量存在顯著差異，對小腸3個部位游離氨基酸含量影響趨勢一致。與 CK組相比，各茶氨酸劑量組及LG組在十二指腸、空腸部位游離氨基酸含量增加，在回腸部位則顯著減少。在采食量沒有顯著變化的情況下，回腸部位游離氨基酸的減少，可能是茶氨酸、谷氨酰胺增加了十二指腸、空腸部位絨毛高度及 V/C比值，促進了小腸前端對氨基酸的吸收，導致氨基酸在后端的含量減少。

腸道對氨基酸的吸收依托于腸道黏膜上的氨基酸轉(zhuǎn)運載體，細胞外的氨基酸濃度與腸道氨基酸轉(zhuǎn)運載體表達之間存在緊密聯(lián)系[19]。本研究中隨著茶氨酸濃度的升高，小腸 3個部位大部分游離氨基酸含量升高，其中 HLT組大部分游離氨基酸比LLT組顯著升高，可能與不同濃度 L-茶氨酸對氨基酸載體的影響有關。谷氨酰胺是腸道的主要燃料，人體攝入的谷氨酰胺約 55%會在腸道被消耗[14]，未被氧化的谷氨酰胺在腸道被腸道組織利用，大部分未能進入門靜脈循環(huán)[17]。茶氨酸在機體腸道中吸收，并在腎臟中水解成谷氨酸和乙胺[13]，但動脈血液中的谷氨酸極少被小腸吸收利用[14]。谷氨酰胺、茶氨酸結構類似，L-茶氨酸可能通過谷氨酰胺轉(zhuǎn)運系統(tǒng)（A、ASC、N、L）進入腸道[20]，MLT組、HLT組與LG組對腸道絨毛高度及V/C影響相似，谷氨酰胺、茶氨酸在體內(nèi)分解代謝的部位差異及營養(yǎng)功能不同對腸道氨基酸代謝產(chǎn)生了不同的影響[21]，從而使得茶氨酸劑量組與LG組的血液游離氨基酸、腸道氨基酸含量不同。

綜上所述，L-茶氨酸增強了小鼠對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力，提高了十二指腸、空腸部位的絨毛高度、V/C比值以及與腸道形態(tài)、物質(zhì)合成相關的氨基酸含量，降低了血清氨基酸含量，提高了機體對氨基酸的利用效率，且以HLT組效果較好。但由于氨基酸在體內(nèi)的代謝十分復雜，L-茶氨酸對腸道氨基酸代謝的影響機制有待進一步探究。