心血管藥理研究進(jìn)展

張林麗 ，賈安,張瑱 *

（1.上海華匯拓醫(yī)藥科技有限公司，上海 201203；2. 浙江華海藥業(yè)股份有限公司，浙江 臨海 317000；3.黃河科技學(xué)院，河南鄭州 450063）

心血管藥理學(xué)主要研究心血管藥物的藥理作用及其機(jī)制、不良反應(yīng)和臨床應(yīng)用，并結(jié)合分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、影像學(xué)、計(jì)算機(jī)等學(xué)科與技術(shù)，探討心血管疾病的病因、病理機(jī)制，指導(dǎo)臨床合理用藥以及發(fā)現(xiàn)新的心血管藥物，為心血管疾病的防治提供理論基礎(chǔ)。

1 心血管疾病相關(guān)的藥理學(xué)研究

1.1 冠心病

1.1.1 冠心病發(fā)病相關(guān)因素冠心病是由遺傳因素和環(huán)境因素等相互作用引起的一種典型的多基因、多因素疾病。多個(gè)危險(xiǎn)因素與冠心病相關(guān)，包括抽煙、年齡、性別、2型糖尿病、高脂飲食等，其中家族病史是誘發(fā)冠心病的眾多因素中最為嚴(yán)重的影響因素之一[1]。

在誘發(fā)冠心病系列風(fēng)險(xiǎn)因素中，營養(yǎng)問題已引起關(guān)注。雖然生活習(xí)慣、飲食以及個(gè)體健康各不相同，但已有的臨床樣本統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，高尿酸血癥會(huì)顯著增加冠心病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，尤其會(huì)導(dǎo)致女性死亡[2]。也有研究表明，高尿酸血癥與多種肥胖相關(guān)的心血管疾病有關(guān)，血尿酸水平與高血壓的發(fā)生密切相關(guān)[3]。同時(shí)，非高密度脂蛋白膽固醇（non-HDL-C）水平增加會(huì)導(dǎo)致冠心病患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)增加，冠心病患者的基礎(chǔ)non-HDL-C水平可以作為是否死亡的指示因子[4]。

社會(huì)經(jīng)濟(jì)學(xué)狀態(tài)如收入、教育、職業(yè)、壓力等因素也與冠心病的發(fā)病率息息相關(guān)。一項(xiàng)大型的統(tǒng)計(jì)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，發(fā)展中國家的人群社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位越高，冠心病患病率越高，發(fā)達(dá)國家則正好相反；同時(shí)，過去幾十年的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，發(fā)展中國家冠心病的發(fā)病率在逐年升高，而發(fā)達(dá)國家逐年降低，故發(fā)展中國家的醫(yī)療資源需要更加合理的分配，以控制冠心病發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)因素[5]。

1.1.2 冠心病的治療硒作為一種重要的具有抗氧化和免疫調(diào)節(jié)功能的金屬，在心血管疾病的研究中也發(fā)揮越來越重要的作用。硒缺乏會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)冠心病的風(fēng)險(xiǎn)。臨床研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充硒能降低血清中C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）含量，增加谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）水平，這兩者均是影響冠心病的重要因素；臨床樣本統(tǒng)計(jì)結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充硒可以降低氧化應(yīng)激和炎癥，增強(qiáng)對冠狀動(dòng)脈的保護(hù)作用[6]。

老藥聯(lián)用、終身服用阿司匹林和氯吡格雷以減少心血管疾病導(dǎo)致的死亡、心肌梗死（myocardial infarction，MI）及卒中等發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)已被認(rèn)可[7]。國內(nèi)臨床研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合使用阿司匹林和復(fù)方丹參滴丸對冠心病患者是一種有效且安全的治療方法，同時(shí)能降低總膽固醇（total cholesterol，TC）、總?cè)８视停╰otal triglycerides，TG）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）水平，提高高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）水平，且比單用阿司匹林更有效[8]。

1.2 心肌梗死

MI導(dǎo)致心肌細(xì)胞大量死亡，心臟微環(huán)境改變，形成纖維化瘢痕，梗死區(qū)域血液供應(yīng)缺乏等。研究表明，小RNA（miRNA）、長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）、核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）、 丙 酮 酸 激 酶 M2（pyruvate kinase isozyme type M2，PKM2）、干細(xì)胞、炎癥相關(guān)因子等均參與MI進(jìn)程，可能是其藥物治療的靶點(diǎn)。

1.2.1 miRNAMI模型大鼠miR-208a含量顯著增加，心肌組織中環(huán)腺苷酸蛋白激酶A（cyclic AMP protein kinase A，cAMP-PKA）蛋白水平顯著增高，所以心肌組織中miR-208a過表達(dá)和血漿中的miRNA高表達(dá)可能與cAMP-PKA信號(hào)通路有關(guān)[9]。另有研究發(fā)現(xiàn)，MI后的2周和4周，miR-24表達(dá)顯著降低，轉(zhuǎn)化生長因子 -β（transforming growth factor-β，TGF-β）miRNA表達(dá)升高并隨著心肌梗死時(shí)間延長其表達(dá)量進(jìn)一步增加；miR-24水平與左室舒張末期內(nèi)徑、左室收縮末期內(nèi)徑、左室射血分?jǐn)?shù)呈正相關(guān)，而與Furin蛋白或TGF-β1水平呈負(fù)相關(guān)[10]。故MI后纖維化進(jìn)程中miR-24的表達(dá)異常具有重要作用，可能為MI后的纖維化藥物治療提供靶點(diǎn)。

1.2.2 lncRNAlncRNA在心血管疾病中具有重要作用。已有研究鑒定出39個(gè)與MI通路相關(guān)的關(guān)鍵lncRNA，并預(yù)測了lncRNA-H19的新功能，其影響細(xì)胞凋亡信號(hào)通路的調(diào)節(jié)激酶，可促進(jìn)MI后心臟重構(gòu)的病理進(jìn)程[11]。

1.2.3 炎癥相關(guān)因子NF-κB是一種廣泛存在的轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控炎癥反應(yīng)各階段的細(xì)胞因子，包括腫瘤壞死因子 α（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白介素（interleukin，IL）-β2、IL-6、IL-8、IL-12、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（inducible nitricoxide synthase，iNOS）、環(huán)氧化酶 2（cyclooxygenase-2，COX-2）等。他克莫司提高M(jìn)I模型小鼠的存活率，改善心臟功能，縮少心肌梗死面積、炎癥反應(yīng)和壞死，其主要是通過抑制并下調(diào)NF-κB和雷帕霉素受體蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）通路，增加心肌細(xì)胞的自噬進(jìn)程，減少炎癥反應(yīng)，改善缺血早期進(jìn)程而起心臟保護(hù)作用[12]。延胡索白麻葉能抑制炎癥、心肌纖維化、血小板聚集而產(chǎn)生心肌保護(hù)作用，能下調(diào)心肌組織中p65蛋白磷酸化（pp65）、IκBα磷酸化（p-IκBα）、JAK2磷酸化（p-JAK2）、信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3磷酸化水平（signal transducers and activators of transcription，p-STAT3）和基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloprotein 2，MMP-2）、MMP-9的表達(dá)以及MI區(qū)域炎癥細(xì)胞的浸潤，抑制凝血酶（thrombase，THR）、花生四烯酸（arachidonic acid，AA）等誘導(dǎo)的血小板聚集[13]。

1.2.4 丙酮酸激酶M2ω-炔基花生四烯酸可以縮小MI小鼠模型的梗死面積，減緩心臟損傷以及心肌酶CK-MB的表達(dá)；其通過抑制糖化酶PKM2的核轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，阻止PKM2和低氧誘導(dǎo)因子-1α (hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)相連，解除 HIF-1α 結(jié)合到iNOS啟動(dòng)子的低氧反應(yīng)元件（hypoxia response element，HRE）上，進(jìn)而起到抗炎作用[14]。

1.2.5 干細(xì)胞干細(xì)胞療法（stem therapy）通過補(bǔ)充細(xì)胞的方式來治療心臟梗死類疾病。臨床前和臨床研究表明，干細(xì)胞療法可使心臟功能得到有效改善。近年來，已開發(fā)出多種新細(xì)胞類型來生成心肌細(xì)胞，并開發(fā)出新的治療策略來增加局部細(xì)胞含量，包括細(xì)胞預(yù)處理、基因療法、胞外質(zhì)粒加載以及免疫調(diào)節(jié)等[15-16]。

1.2.6 七氟烷研究發(fā)現(xiàn)，七氟烷預(yù)處理能促進(jìn)急性心肌梗死（AMI）骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cell，BMSC）移植的治療作用，通過抑制凋亡，增強(qiáng)旁分泌功能，激活心臟干細(xì)胞（cardiac stem cells，CSC）。同時(shí)，七氟烷預(yù)處理能抑制缺氧的BMSC凋亡并促進(jìn)其遷移和細(xì)胞因子分泌，調(diào)節(jié)miR-210及2型非受體蛋白酪氨酸磷酸酶（protein tyrosine phosphatase, non-receptor type 2，PTPN2）和半胱天冬酶8相關(guān)蛋白2（caspase 8 associated protein 2，casp8ap2）的表達(dá)[17]。

1.2.7 炎癥標(biāo)志物研究表明，炎癥生物標(biāo)志物與AMI患病風(fēng)險(xiǎn)增加直接相關(guān)。臨床研究顯示，患有系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)（SIRS）的AMI入院患者，其死亡風(fēng)險(xiǎn)增加，短期和長期不良反應(yīng)/事件發(fā)生率（包括90 d死亡率、90 d主要不良心血管事件發(fā)生率等）均增加[18]。

此外，為解決MI過程中炎癥反應(yīng)過度和早期診斷延遲問題，研究者建立了超分子納米系統(tǒng)（PP/PS@MIONs）。通過外部磁場控制靶向和磷脂酰絲氨酸（PS）靶向給藥，增強(qiáng)梗死區(qū)域藥物聚集，加速解決早期炎癥反應(yīng)。此外，通過聚羧基（polycarboxybetaine，PCB）質(zhì)子化能促進(jìn)系統(tǒng)中納米粒子從內(nèi)體/溶酶體中釋放，更精準(zhǔn)地進(jìn)行核磁共振成像（magnetic resonance imaging，MRI）操作。這種納米系統(tǒng)在MI模型大鼠中顯示出良好的炎癥分辨效果和成像能力，達(dá)到精準(zhǔn)的可視化操作，顯著提高M(jìn)I早期的治療效果[19]。

1.2.8 轉(zhuǎn)化生長因子-β1細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) TGF-β1 可介導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大和間質(zhì)纖維化的發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)，辛伐他汀可顯著改善血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，使左心室質(zhì)量指數(shù)、心肌組織膠原容積分?jǐn)?shù)、TGF-β1和TGF激活酶（TAK）的活性顯著降低；經(jīng)辛伐他汀治療后，Smad7水平明顯增加[20]。這些結(jié)果表明，他汀類藥物通過TGF-β1信號(hào)通路改善MI大鼠心室重構(gòu)，保護(hù)心血管系統(tǒng)。

1.3 缺血再灌注損傷

缺血再灌注（ischemia reperfusion，IR）損傷是指損傷組織恢復(fù)血液供應(yīng)后，過量的自由基攻擊這部分重新獲得血液供應(yīng)組織內(nèi)的細(xì)胞，使缺血所致功能代謝障礙和結(jié)構(gòu)破壞進(jìn)一步加重的現(xiàn)象?，F(xiàn)有的模型研究表明，IR損傷機(jī)制與治療涉及NF-κB、磷脂酰肌醇三激酶/絲（蘇）氨酸激酶 （phosphatidylinositide 3-kinases/AKT，PI3K/AKT）通路、腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）等信號(hào)通路及Nod樣受體蛋 白 3（Nod-like receptor pyrin domain containing 3，NLRP3）、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子B（vascular endothelial cell growth factor B，VEGF-B）等的調(diào)節(jié)，自噬和內(nèi)皮細(xì)胞等均參與該進(jìn)程。

1.3.1 Toll樣受體4/NF-κB通路高壓氧能緩解大鼠IR損傷，抑制Toll樣受體4（Toll-like receptors4，TLR4）/NF-κB通路，抑制炎癥因子釋放，減少心肌細(xì)胞壞死，增加心肌酶含量，同時(shí)減少由mTOR通路激活導(dǎo)致的自噬過度，從而起到保護(hù)心肌缺血再灌注（myocardial ischemic reperfusion，MIR）損傷和改善MI的作用[21]。

1.3.2 PI3K/AKT和HIF-1α通 路來 自 于 藤 茶（Ampelopsis grossedentata）枝葉的二氫楊梅素，能增加抗氧化作用，抑制凋亡進(jìn)程，其主要通過PI3K/AKT和HIF-1α信號(hào)通路，上調(diào)B淋巴細(xì)胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、B淋巴細(xì)胞瘤-xl（B-cell lymphoma-extra large，Bcl-xl），半胱天冬酶原3（procaspase-3）、procaspase-8、procaspase-9的蛋白表達(dá)，下調(diào)HIF-1α、Bcl2相互作用蛋白2（Bcl-2/adenovirus E1B 19 kDa protein-interacting protein 2，Bnip2）、Bax、細(xì)胞色素C (cytochrome C，Cyt-c)、半胱天冬裂解酶-3（cleaved caspase-3）、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9的蛋白表達(dá)，在IR損傷中起到保護(hù)作用[22]。研究表明，丹參和川芎嗪可以減輕心肌細(xì)胞的IR損傷，通過激活A(yù)KT/eNOS信號(hào)通路抑制細(xì)胞凋亡，下調(diào)促凋亡因子（包括Caspase-3）的表達(dá)水平[23]。

1.3.3 腺苷酸活化蛋白激酶蘆薈中的蘆薈苷能改善MIR大鼠血液動(dòng)力學(xué)參數(shù)，縮小梗死面積進(jìn)而產(chǎn)生保護(hù)作用。研究發(fā)現(xiàn)，蘆薈苷主要通過激活A(yù)MPK通路，緩解心肌氧化應(yīng)激，減少丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，增加超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量，減少炎癥反應(yīng)進(jìn)而起到心肌保護(hù)作用[24]。

1.3.4 Nod樣受體蛋白3黃蜀葵花中提取的黃酮成分對大鼠IR具有保護(hù)作用，其通過抑制炎癥小體NLRP3的活性，減少M(fèi)DA含量，增加SOD含量，減少血清中的肌酐酶、IL-6、 IL-1β、TNF-α含量，縮小心肌梗死面積而起到保護(hù)作用[25]。

腦腸肽顯著改善心臟功能也與NLRP3相關(guān)。缺血再灌注24 h后，腦腸肽顯著縮小心肌梗死面積和減少細(xì)胞凋亡，降低心肌細(xì)胞損傷標(biāo)記酶水平，減輕氧化應(yīng)激損傷和炎癥反應(yīng)，降低TLR4、NLRP3和caspase-1的表達(dá)[26]。

1.3.5 色素上皮衍生因子色素上皮衍生因子（pigment epithelium-derived factor，PEDF）是一種多功能分泌型糖蛋白，研究發(fā)現(xiàn)PEDF通過PEDF受體/鈣非依賴性磷脂酶A2（PEDFR/iPLA2）降低新生兒心肌細(xì)胞中NLRP3炎癥小體的活化；同時(shí)，PEDF通過PEDFR/iPLA2減少動(dòng)力相關(guān)蛋白1（dynamics-related protein 1，Drp1）誘導(dǎo)的線粒體分裂和線粒體裂變誘導(dǎo)的線粒體DNA（mitochondrial DNA，mtDNA）及線粒體活性氧（mtROS）釋放到細(xì)胞溶質(zhì)中[27]。PEDF抑制線粒體裂變誘導(dǎo)NLRP3炎癥小體激活，故PEDF可通過抑制PEDFR/iPLA2以防止缺氧誘導(dǎo)的NLRP3炎癥小體激活。

也有研究表明，過量表達(dá)PEDF可導(dǎo)致ROS生成減少，線粒體膜電位損耗降低以及包括Caspase-依賴型（Caspase-9和Caspase-3）和獨(dú)立型（凋亡誘導(dǎo)因子和核酸內(nèi)切酶G）的PEDF抑制細(xì)胞凋亡通路的激活；同時(shí)，過表達(dá)PEDF也促進(jìn)自噬，提示PEDF通過抗氧化、抗凋亡因子及促進(jìn)自噬在缺氧/復(fù)氧（hypoxia/reoxygenation，H/R）損傷中起關(guān)鍵作用[28]。

1.3.6 血管內(nèi)皮生長因子-B大鼠IR損傷模型中，白藜蘆醇能上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子-B（vascular endothelial growth factor-B，VEGF-B）mRNA 和蛋白水平，上調(diào)錳超氧化物歧化酶（manganese superoxide dismutase，MnSOD）表達(dá)，阻止ROS生成，進(jìn)而顯著減少細(xì)胞死亡和H9C2細(xì)胞凋亡，對MIR具有潛在的治療作用[29]。

1.3.7 自噬通路蛋白有研究表明，慢性缺血時(shí)心肌激活自噬進(jìn)程，抑制細(xì)胞凋亡進(jìn)程，進(jìn)而限制慢性缺血造成的傷害，防止進(jìn)一步缺血，起到保護(hù)作用。另有研究發(fā)現(xiàn)，長期缺血時(shí)，自噬受到抑制，同時(shí)伴隨心肌梗死面積的擴(kuò)大，這也從側(cè)面表明自噬具有保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)，缺血誘導(dǎo)的自噬通過AMPK依賴性信號(hào)通路產(chǎn)生保護(hù)作用，而再灌注會(huì)上調(diào)自噬蛋白Beclin-1和Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3（Bcl2/adenovirus E1B 19 000 protein-interacting protein 3，BNIP3），但無AMPK激活，所以未能產(chǎn)生保護(hù)作用[30]。

傳統(tǒng)中藥丹參素能顯著提高細(xì)胞存活率，阻止IR中心臟疾病惡化。細(xì)胞的存活和mTOR激活（S6K和S6的磷酸化增加）相關(guān)，并伴隨著自噬量下調(diào)，自噬和凋亡相關(guān)蛋白[包括接頭蛋白（sequestosome 1，SQSTM1/p62，簡稱p62）、Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax、caspase-3]下調(diào)，故丹參素預(yù)處理可能是通過mTOR激活抑制過度自噬和凋亡以減輕心臟IR損傷[31]。

研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞骨架的負(fù)調(diào)節(jié)器細(xì)胞骨架蛋白C端PDZ和LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1（PDZ and LIM domain protein 1，PDLIM1）抗體（又稱CLP36），在自噬相關(guān)蛋白（autophagy-related protein，Atg7）缺失的心肌細(xì)胞中出現(xiàn)累積；心肌細(xì)胞特異性基因敲除Atg7可加重IR損傷，并出現(xiàn)心肌肥厚、收縮功能障礙、肌原纖維排列紊亂和嚴(yán)重的心肌纖維化，這可能是心肌細(xì)胞中CLP36積聚所致；自噬通過清除CLP36可以保護(hù)IR損傷中的心肌細(xì)胞[32]。

1.3.8 內(nèi)皮細(xì)胞IR中血管內(nèi)皮功能異常使其成為潛在的治療靶點(diǎn)。內(nèi)皮細(xì)胞的激活以及與內(nèi)皮氧化還原反應(yīng)有關(guān)的干預(yù)措施均能減輕再灌注后的心肌損傷。內(nèi)皮原始細(xì)胞作為細(xì)胞療法的靶點(diǎn)，能用于改善血管修復(fù)，恢復(fù)微血管再灌注。此外，IR和心臟停搏期間，與一氧化氮（NO）、內(nèi)皮衍生的超極化 因 子（endothelium-derived hyperpolarizing factor，EDHF）有關(guān)的內(nèi)皮功能障礙相關(guān)的分子機(jī)制研究及相關(guān)的新靶點(diǎn)（如連接蛋白、離子通道等），也為心肌缺血提供了潛在的治療策略，改善心肌缺血預(yù)后[33]。

1.4 動(dòng)脈脈粥樣硬化

近年來，國內(nèi)學(xué)者對動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）疾病的研究較集中在與自噬相關(guān)的通路以及影響AS進(jìn)程的因素（如Ca2+）調(diào)節(jié)等方面。

1.4.1 PI3K/AKT/mTOR通路很多研究表明，自噬參與抑制炎癥和壞死進(jìn)程。自噬進(jìn)程可選擇性抑制PI3K/AKT/mTOR通路，減少斑塊中巨噬細(xì)胞聚集，保護(hù)細(xì)胞提高斑塊穩(wěn)定性，減少炎癥因子分泌，增加巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出，為AS提供潛在治療途徑。木犀草素也通過激活自噬進(jìn)程，顯著抑制ox-LDL誘導(dǎo)的脂質(zhì)形成和巨噬細(xì)胞的壞死進(jìn)程，該作用是通過增加自噬體標(biāo)志物（自噬膜型/胞漿型，即LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比率）和Beclin-1的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)[34]。

1.4.2 核因子κB人參皂苷對心血管疾病具有多種調(diào)節(jié)和治療作用，通過抑制NF-κB信號(hào)通路以抑制內(nèi)毒素（lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的纖溶酶原激活物抑制劑1（plasminogen activator inhibitor 1，PAI-1）表達(dá)，促進(jìn)纖維蛋白溶解，阻止人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中的血栓形成。人參皂苷提取物Rb1可通過調(diào)節(jié)血液中的脂類，產(chǎn)生抗血小板活性，降低血壓及抗氧化應(yīng)激以起到抗AS的作用。人參皂苷Rp1能抑制膠原誘導(dǎo)的血小板活性和血栓形成，這可能與血管舒張誘導(dǎo)的磷酸化激活及p38MAPK通路有關(guān)。人參皂苷 Rb1（100～400 mol·L-1）能阻止豚鼠心臟分離出的心肌細(xì)胞的鈣內(nèi)流和鉀外流。人參皂苷Re通過抑制鈉內(nèi)流，致使瞬時(shí)鉀外流起抗心律失常的作用。人參皂苷通過下調(diào)腎素-血管緊張肽系統(tǒng)以減少左心室重塑。在多柔比星誘導(dǎo)的大鼠心衰模型中，連續(xù)給予人參皂苷b1能減少心肌損傷，主要是通過調(diào)節(jié)連接蛋白43、p21-激酶1/蛋白磷酸酶2A復(fù)合物（p21-activated kinase l/protein phosphatase 2A）以及蛋白激酶RNA樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶（protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase，PERK）信號(hào)通路有關(guān)[35]。

1.4.3 腺苷酸活化蛋白激酶人參皂苷Rb1通過增加膜型自噬體（LC3-Ⅱ）水平與降解自噬和凋亡中的“腳手架”蛋白（SQSTM1/p62）以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞自噬，提高動(dòng)脈粥樣斑塊AMPK磷酸化進(jìn)程，減少巨噬泡沫細(xì)胞和動(dòng)脈粥樣斑塊中脂質(zhì)積聚，同時(shí)通過修飾斑塊組成來增加動(dòng)脈粥樣斑塊的穩(wěn)定性[36]。

1.4.4 Ca2+調(diào)節(jié)劑有研究表明，白藜蘆醇和白藜蘆醇苷作為Ca2+調(diào)節(jié)劑可影響所有Ca2+相關(guān)蛋白，包括位于細(xì)胞膜表面的L型鈣流（L-type Ca2+channels，LCCs）、 存 儲(chǔ) 相 關(guān) 的 Ca2+（store-operated Ca2+，SOCs）和鈉/鈣增強(qiáng)劑 [sodium/calcium（Na+/Ca2+）exchanger，NCX]，以及位于肌漿網(wǎng)中的鈣釋放通道 ryanodine受 體（ryanodine receptors，RyRs）、Ca2+-ATP酶（Ca2+ATPase，SERCA）及肌鈣蛋白C（troponin-C, TnC）的調(diào)節(jié)和表達(dá)；還可調(diào)節(jié)ATP敏感性鉀通道（ATP-sensitive potassium channel，KATP）和大電導(dǎo)鈣激活鉀通道（large-conductance calcium-activated potassium channels，BKCa），調(diào)節(jié)膜電勢；此外，多酚類化合物能在正常和病理情況下，通過刺激NO的生成來特異性地調(diào)節(jié)Ca2+以維持Ca2+的穩(wěn)態(tài)[37]。

1.4.5 吲哚胺2，3-雙加氧酶大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的色氨酸（Trp）代謝是通過犬尿氨酸（Kyn）途徑進(jìn)行的，生成活性代謝產(chǎn)物如犬尿氨酸等，代謝產(chǎn)物如尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD）以及Trp/Kyn通路中一系列產(chǎn)物濃度增加會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)嚴(yán)重的心血管疾病，包括心臟病、AS后內(nèi)皮功能失常等。使用吲哚胺 2，3-雙加氧酶（indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO）酶抑制劑可能是心血管疾病的治療策略[38]。慢性系統(tǒng)性輕度炎癥反應(yīng)（chronic systemic lowgrade inflammation，CSLGI）通常伴隨著Trp代謝的增加以及IDO1的過表達(dá)。因此，與炎癥相關(guān)的Trp降解增加時(shí)，血漿中的Kyn/Trp的比率（Kyn to Trp ration，KTR）也會(huì)相應(yīng)增加。AS進(jìn)程早期伴隨著長期炎癥的進(jìn)展，對于IDO1具有重要影響。一組大樣本的統(tǒng)計(jì)學(xué)研究數(shù)據(jù)表明，IDO1的活性（通過KTR測定）與AS早期進(jìn)程以及頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度（intima-medium thickness，IMT）呈正相關(guān)。IDO1和IDO1通路對于免疫炎癥反應(yīng)具有重要的調(diào)節(jié)作用，因而對AS進(jìn)程具有重要影響，可作為AS進(jìn)程中的動(dòng)態(tài)指示因子[39]。

1.4.6 血小板衍生生長因子血小板衍生生長因子（platelet derived growth factor，PDGF）包括血小板和血清分裂素，其具有調(diào)節(jié)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和纖維原細(xì)胞的功能。在AS的動(dòng)脈壁和炎癥細(xì)胞中均能檢測到PDGF的表達(dá)增高；同時(shí)，血小板衍生生長因子受體（PDGF receptor，PDGFR）也出現(xiàn)高表達(dá)。PDGF的亞型PDGF-A在AS早期非常重要。在人動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中，PDGF會(huì)刺激血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cell，VSMC）的增殖。此外，PDGF家族的新成員PDGF-C和PDGF-D及其受體也是心血管系統(tǒng)中的重要調(diào)節(jié)因素，其在各種細(xì)胞中大量表達(dá)，并發(fā)揮著不同的作用。體內(nèi)外研究表明，使用PDGF-C和PDGF-D進(jìn)行治療能改善心臟功能，增加血管生成，PDGF-C、PDGF-D的拮抗劑及其相應(yīng)的受體可能作為抑制纖維化和AS的治療方法[40]。

1.4.7 氧化應(yīng)激研究表明，AS患者與線粒體氧化應(yīng)激有關(guān)。氧化應(yīng)激和炎癥相互關(guān)聯(lián)，它們在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成過程中相互作用形成惡性的前饋循環(huán)。氧化應(yīng)激激活轉(zhuǎn)錄因子，影響炎癥因子、調(diào)節(jié)子和趨化因子。出現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的細(xì)胞（包括SMCs、淋巴細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞）會(huì)出現(xiàn)壞死[41]。多酚類物質(zhì)可以抑制氧化應(yīng)激酶生成，減少超氧化物的產(chǎn)生，減少內(nèi)皮細(xì)胞損傷，抑制oxLDL形成，抑制VSMC增殖和遷移，減少血小板聚集，增加線粒體氧化應(yīng)激，從而減少ROS產(chǎn)生，減緩AS進(jìn)程。同時(shí)部分臨床研究發(fā)現(xiàn)，多酚還能抑制急性心肌缺血中的PI3K/AKT信號(hào)通路，進(jìn)而抑制NF-κB活性，同時(shí)還能增加NO合酶活性而降低血壓，減少末端器官損傷[42]。此外，白藜蘆醇調(diào)節(jié)氧化還原基因，抑制NADPH氧化酶介導(dǎo)的ROS產(chǎn)生，下調(diào)其表達(dá)，降低氧化酶活性，增加各種抗氧化酶的表達(dá)，加快ROS的解毒作用。白藜蘆醇的基因調(diào)節(jié)作用主要是由組蛋白/蛋白脫乙酰酶去乙?；?介導(dǎo)，或由核因子-E2相關(guān)因子-2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）介導(dǎo)[43]。

2 心血管藥理的相關(guān)機(jī)制研究

近年來我國心血管藥理在基礎(chǔ)研究方面也取得了許多進(jìn)展，如在生物標(biāo)志物的鑒定、靶點(diǎn)研究和通路研究等方面。

2.1 生物標(biāo)志物

心血管疾病的檢測目前用于鑒定的生物標(biāo)志物越來越多，包括心肌損傷標(biāo)志物如心肌肌鈣蛋白、高敏感的肌鈣蛋白（high-sensitive cardiac troponin，hs-cTn）、心型脂肪酸結(jié)合蛋白（heart type-fatty acid binding protein，H-FABP）；炎癥標(biāo)志物如超敏C反應(yīng)蛋白（hypersensitive-CRP，hs-CRP）、生長分化因子-15、纖維蛋白原、尿酸；斑塊破裂標(biāo)志物如妊娠相關(guān)血漿蛋白A、過氧化物酶、基質(zhì)金屬蛋白酶；血小板活化標(biāo)志物如脂蛋白相關(guān)性磷脂酶A2、分泌型磷脂酶A2、可溶性CD40配體；神經(jīng)激素活化標(biāo)志物如肽素、腎上腺髓質(zhì)中段肽；其他生物標(biāo)志物如利尿肽、生長刺激表達(dá)基因2蛋白（growth stimulation expressed gene 2，ST2）、內(nèi)皮素-1、半乳凝素-3、神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白、miRNA等[44]。

2.2 miRNA

miRNA是長約22 nt（nucleotide）的短RNA序列，其作為基因表達(dá)的負(fù)調(diào)控子，可以抑制mRNA轉(zhuǎn)錄或增加mRNA降解。近期研究證實(shí)，miRNA參與了包括心血管疾病在內(nèi)的許多疾病的病理生理進(jìn)程。miRNA能調(diào)節(jié)多種基因表達(dá)，伴隨著各種疾病的發(fā)展進(jìn)程，可用作多種疾病的治療靶點(diǎn)。其中，miR-155在造血分化、免疫、血管重塑中具有重要作用，在AS和冠狀動(dòng)脈疾病中已進(jìn)行了充分研究，并且已成為AMI后心臟死亡的診斷標(biāo)志[45]。

miR-499屬于Myoirs家族，在MI、IR損傷、心肌肥大、心肌電生理傳導(dǎo)和心臟異常等各類疾病的病理過程中發(fā)揮重要作用。miR-499也可作為潛在的生物標(biāo)志物。miR-499的表達(dá)調(diào)節(jié)可減少心肌肥大、心肌纖維化，減輕心肌細(xì)胞壞死，增加心肌細(xì)胞再生和分化，為AMI患者提供新的治療策略[46]。

miR-21是纖維原細(xì)胞增殖和纖維化過程中的重要調(diào)節(jié)子，通過TGF-β/Smad7信號(hào)通路在MI后的心臟纖維化激活進(jìn)程中發(fā)揮作用，可能作為MI損傷后心臟纖維化的潛在治療靶點(diǎn)[47]。

2.3 核因子-E2相關(guān)因子-2

一項(xiàng)研究表明，Nrf2激活后的病理生理結(jié)果與心肌重構(gòu)過程中心肌細(xì)胞自噬功能完整性直接相關(guān)。自噬不受影響時(shí)，Nrf2參與心臟適應(yīng)性反應(yīng)；自噬功能障礙時(shí)可能關(guān)閉Fyn控制的Nrf2核內(nèi)轉(zhuǎn)出，激活Nrf2驅(qū)動(dòng)的Agt轉(zhuǎn)錄，從而加劇心臟適應(yīng)不良導(dǎo)致的功能障礙。Nrf2可能作為心臟功能障礙的治療靶點(diǎn)[48]。

2.4 RAS同源蛋白A/效應(yīng)因子通路

一項(xiàng)研究表明，西他列汀和艾塞那肽通過高級(jí)聚糖化終產(chǎn)物受體（receptor of advanced glycation end products，RAGE）/RAS同源蛋白 A（ras homolog gene family，member A，RhoA）/RhoA效應(yīng)因子（main effector rho-associated kinase，ROCK）和AMPK介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路可以改善糖尿病動(dòng)物的動(dòng)脈血管內(nèi)皮功能。研究發(fā)現(xiàn)，西他列汀和艾塞那肽抑制高級(jí)聚糖化終產(chǎn)物（advanced glycation end products，AGE）/RAGE誘導(dǎo)的RhoA/ROCK/NF-κB/IκBα信號(hào)通路的蛋白表達(dá)水平，激活A(yù)MPK，最終使p-eNOS、iNOS、ET-1等目標(biāo)蛋白發(fā)生改變，從而產(chǎn)生效應(yīng)[49]。另一項(xiàng)研究結(jié)果顯示，選擇性尾加壓素Ⅱ（urotensinⅡ，UⅡ）受體拮抗劑可能通過抑制UTR和RhoA/ROCK通路發(fā)揮心肌保護(hù)作用。該項(xiàng)研究的數(shù)據(jù)顯示，sb-710411能顯著縮小MIR誘導(dǎo)的大鼠心肌梗死面積，降低心肌組織損傷，抑制血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)，升高心電圖（electrocardiograph，ECG）中ST段及血清中LDH、CK-MB水平，抑制MIR導(dǎo)致的RhoA活性和UⅡ受體（urotensinⅡreceptor, UTR）、ROCK1和ROCK2蛋白表達(dá)[50]。

2.5 氣體信號(hào)分子

含硫的信號(hào)分子包括H2S和SO2，其通過含硫氨基酸代謝在心血管系統(tǒng)中生成，并調(diào)節(jié)離子通道，在心血管生理和病理過程中產(chǎn)生重要作用[51]。一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）導(dǎo)致模型動(dòng)物的血壓升高，主動(dòng)脈壁增厚，增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）表達(dá)增加。SO2降低全身性高血壓以及血管壁厚度，抑制AngⅡ誘導(dǎo)的PCNA和PERK表達(dá)增加。所以，SO2可通過ERK信號(hào)通路抑制AngⅡ誘導(dǎo)的高血壓小鼠的VSMC增殖[52]。這些研究進(jìn)一步支持了含硫氣體信號(hào)分子可作為抗高血壓藥物的靶點(diǎn)。

2.6 成纖維細(xì)胞生長因子21

成纖維細(xì)胞生長因子21（ fibroblast growth factor，F(xiàn)GF21）是心血管系統(tǒng)的保護(hù)因子，與骨中的礦物沉積有關(guān)，并增加骨形態(tài)發(fā)生蛋白（bone morphogenetic protein，BMP）的成骨活性。體外研究表明，F(xiàn)GF21是通過影響成纖維細(xì)胞生長因子1/3受體（FGF receptor 1/3，F(xiàn)GFR1/3）、抗衰老基因（β-Klotho）的活化以及核心結(jié)合因子（runt-related transcription factor 2，Runx-2）信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制平滑肌細(xì)胞鈣化[53]。有研究發(fā)現(xiàn)，非諾貝特可以防止1型糖尿病引起的心臟病理和功能異常，與上調(diào)FGF21和沉默調(diào)節(jié)蛋白1（Sirtuin 1，SIRT1）介導(dǎo)的自噬有關(guān)[54]。另有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GF21能保護(hù)糖尿病性心肌病，通過激活A(yù)MPK信號(hào)通路，增強(qiáng)對氧磷酯酶1（paraoxonase 1，PON1）表達(dá)，進(jìn)而抑制高血糖（high glucose，HG）誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，減輕局部炎癥、纖維化和心肌細(xì)胞凋亡[55]。這些研究為FGF21的靶點(diǎn)研究提供了新的思路。

2.7 CRISPR/Cas9

CRISPR/Cas9是深受關(guān)注的基因編輯利器。由成簇有規(guī)律間隔短回文重復(fù)序列區(qū)域（clustered regularly interspaced short palindromic repeats，CRISPR）與Cas9蛋白組成。一項(xiàng)轉(zhuǎn)基因小鼠模型研究表明，PRKAG2心臟綜合征（由編碼AMPKγ2亞基的PRKAG2基因遺傳性缺陷導(dǎo)致的心臟疾?。┡ch530r突變相關(guān)，通過CRISPR/Cas9技術(shù)修飾編碼h530r的基因，動(dòng)物心臟的形態(tài)和功能均得以改善，提示CRISPR/Cas9基因編輯可成為PRKAG2心臟疾病以及選擇性致病突變導(dǎo)致的其他顯性遺傳性心臟病的治療方法[56]。

2.8 脂質(zhì)

一項(xiàng)研究提示，內(nèi)臟白色脂肪組織（white adipose tissue，WAT）的擴(kuò)大由過氧化物酶體增殖物激活受體γ和雷帕霉素/核糖體S6激酶信號(hào)途徑所決定。脂肪細(xì)胞功能障礙、免疫和炎癥反應(yīng)以及相關(guān)代謝障礙相互作用，導(dǎo)致系統(tǒng)性低炎反應(yīng)、胰島素抵抗以及心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加[57]。該項(xiàng)研究提示W(wǎng)AT擴(kuò)張和相關(guān)纖維化會(huì)促進(jìn)胰島素抵抗和心血管疾病，WAT有望成為心肌纖維化和炎癥相關(guān)的心血管疾病潛在治療靶點(diǎn)。

3 心血管疾病藥物治療研究

目前已上市的心血管疾病治療藥物品種較為豐富，大多數(shù)心血管疾病能得到較完善的治療。近年來對于心血管疾病治療藥物研究一般均結(jié)合其作用機(jī)制的研究。

大量研究表明，許多中藥對于心血管疾?。ㄈ绺哐獕?、血脂異常、糖尿?。╋L(fēng)險(xiǎn)因素的調(diào)控具有重要作用，并在動(dòng)脈硬化性心血管疾?。╝rterio sclerotic cardio vascular disease，ASCVD）和慢性心臟病中具有保護(hù)作用。中藥中分離出的各種化合物，如多元酚類、類萜烯、皂素類、生物堿類等，均具有對心血管系統(tǒng)的保護(hù)作用。其中，多元酚常用于高血壓和冠心病的治療，其對心血管的保護(hù)作用主要是因其具有抗氧化、抗炎、降血脂、抗細(xì)胞毒等作用。來自于丹參的丹參酮?jiǎng)t為類萜烯，臨床前和臨床研究均表明，丹參酮具有抑制AS形成、病理性心肌肥大的效果，以及抑制脂質(zhì)過氧化、血管炎癥反應(yīng)和血小板聚集等作用，在心肌缺血中具有改善血管生成、減少壞死，進(jìn)而產(chǎn)生心臟保護(hù)作用[58]。

藥物抗炎療法對于炎癥性關(guān)節(jié)炎的心血管患者具有保護(hù)作用，尤其是抗-TNF治療法（anti-TNF treatment）能改善心血管風(fēng)險(xiǎn)因子、內(nèi)皮功能、動(dòng)脈僵硬度，進(jìn)而降低心血管疾病的發(fā)病率和死亡率[59]。

4 結(jié)語

盡管上市的心血管藥物眾多，但在臨床治療中仍然存在許多問題。心血管疾病仍然是發(fā)病率高、死亡率高、并發(fā)癥多的重大疾病，很多疾病只能緩解，不少疾病還缺乏特效藥物，國家重大新藥創(chuàng)制多年來重點(diǎn)支持心血管疾病研究領(lǐng)域。近年來隨著我國心血管藥理學(xué)隊(duì)伍不斷壯大，科研水平不斷提升，中國學(xué)者在心血管藥理基礎(chǔ)研究和新藥開發(fā)方面均取得了較好的成果。在新藥創(chuàng)制方面，盡管目前還是以中藥及中藥來源的化藥為主，但已逐步形成中藥、化藥和生物藥共同發(fā)展的局面；在轉(zhuǎn)化及新藥研發(fā)方面，越來越多新的疾病生物標(biāo)志物和具有較高臨床價(jià)值的候選化合物被發(fā)現(xiàn)；在基礎(chǔ)科研領(lǐng)域，許多重要靶點(diǎn)的研究更加深入，新的作用機(jī)制的不斷發(fā)現(xiàn)，如miRNA、lncRNA的靶點(diǎn)研究，TLR4/NF-κB、PI3K/AKT等信號(hào)通路研究等。然而心血管藥理研究機(jī)遇和挑戰(zhàn)并存。心血管藥物存在對有效性和安全性要求較高，藥理實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物模型不易建立，大多數(shù)臨床試驗(yàn)開展較為困難等自身因素，也面臨著新藥研發(fā)越來越要求與國際接軌的外部因素，使得很多研究不得不停留在發(fā)現(xiàn)階段。將這些研究成果轉(zhuǎn)化進(jìn)入臨床甚至上市，仍有較多的技術(shù)難題需要解決。但相信隨著未來學(xué)科間密切合作，臨床轉(zhuǎn)化研究的深入，?？萍膊f(xié)同研究網(wǎng)絡(luò)的發(fā)展，中國學(xué)者將會(huì)取得突破，開創(chuàng)中國心血管藥理研究的新篇章。