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    飼養(yǎng)密度對中華蟾蜍幼蟾生長發(fā)育的影響△

    2017-09-21 08:00:54趙群李軍德康彥高波李燈林楊艷
    中國現(xiàn)代中藥 2017年1期
    關(guān)鍵詞:蟾蜍體長時(shí)間段

    趙群,李軍德,康彥,高波,李燈林,楊艷

    (1.道地藥材國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地,中國中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心,北京,100700;2.皖西學(xué)院,安徽 六安 237012;3.安徽華潤金蟾藥業(yè)股份有限公司,安徽 淮北 235000)

    ·中藥農(nóng)業(yè)·

    飼養(yǎng)密度對中華蟾蜍幼蟾生長發(fā)育的影響△

    趙群1,2,李軍德1*,康彥3,高波3,李燈林3,楊艷3

    (1.道地藥材國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地,中國中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心,北京,100700;2.皖西學(xué)院,安徽 六安237012;3.安徽華潤金蟾藥業(yè)股份有限公司,安徽 淮北235000)

    目的:研究飼養(yǎng)密度對中華蟾蜍BufogargarizansCantor幼蟾生長發(fā)育的影響。方法:將中華蟾蜍幼蟾分別飼養(yǎng)在20、40、60、80只/m2的不同密度條件下。每隔7d測量和記錄1次幼蟾的體重和體長。結(jié)果:(1)幼蟾在第一次冬眠前的成活率為7.9%~30.0%;(2)飼養(yǎng)密度對幼蟾的體重和體長無顯著影響。中華蟾蜍幼蟾的最適養(yǎng)殖密度為20只/m2。結(jié)論:中華蟾蜍幼蟾的最適養(yǎng)殖密度為20只/m2。

    中華蟾蜍;幼蟾;養(yǎng)殖密度;生長發(fā)育

    中華蟾蜍Bufogargarizans是中藥蟾皮和蟾酥的重要基源動物[1-3],隸屬于蟾蜍科Bufonidae蟾蜍屬Bufo。其耳后腺分泌物——蟾酥作為常用藥材外,其皮中含有多種化學(xué)成分,利用其水溶性成分生產(chǎn)的華蟾素注射液具有顯著的抗腫瘤效果[4-5]。由于中華蟾蜍野生資源下降[6],必須開展和推廣其規(guī)范化人工養(yǎng)殖,才能滿足日益增長的對該種蟾蜍的需求。

    提高蝌蚪和幼蟾的成活率與質(zhì)量是中華蟾蜍規(guī)范化養(yǎng)殖的關(guān)鍵之一。研究表明,在特定人工飼養(yǎng)條件下,中華蟾蜍蝌蚪臨近變態(tài)時(shí)(變態(tài)前)和剛變態(tài)的成活率分別為68.7~96.3%和5.7~36.0%,最適養(yǎng)殖密度為1000只/m2[7]。然而關(guān)于飼養(yǎng)密度對中華蟾蜍幼蟾成活率和質(zhì)量影響的研究,至今未見報(bào)道。本文主要探討在人工飼養(yǎng)條件下,中華蟾蜍幼蟾的合理飼養(yǎng)密度,以提高幼蟾成活率,解決中華蟾蜍規(guī)范化人工養(yǎng)殖技術(shù)體系中的關(guān)鍵問題。

    1 材料與方法

    1.1實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)施

    1.1.1實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)所用幼蟾為采集于山東和河北2個(gè)產(chǎn)地的中華蟾蜍種蟾經(jīng)人工飼養(yǎng)并產(chǎn)卵自然孵化后,蝌蝌經(jīng)人工飼養(yǎng)后變態(tài)得到的個(gè)體。2個(gè)產(chǎn)地的幼蟾隨機(jī)混合,在相同環(huán)境飼養(yǎng)馴化約14天后,開始實(shí)驗(yàn)。通過稱重,挑選體重沒有顯著差異的個(gè)體,按下文中實(shí)驗(yàn)要求放入每個(gè)實(shí)驗(yàn)用玻璃飼養(yǎng)缸中。

    1.1.2實(shí)驗(yàn)設(shè)施 每個(gè)玻璃飼養(yǎng)缸的長×寬×高為150cm×100cm×60cm,缸內(nèi)水深30cm。用沙子和磚塊在缸內(nèi)鋪建三分之二面積的陸地,陸地和水接觸的邊緣設(shè)置一定的緩坡,便于幼蟾登陸和下水。玻璃飼養(yǎng)缸放置于有良好光照條件、通風(fēng)和自然室溫的實(shí)驗(yàn)室中。

    1.2實(shí)驗(yàn)方法

    將幼蟾分為4個(gè)大組,每個(gè)大組中幼蟾的飼養(yǎng)密度分別為20只/m2、40只/m2、60只/m2和80只/m2。其中每個(gè)大組有3個(gè)平行組,每個(gè)平行組分別飼養(yǎng)于1個(gè)玻璃飼養(yǎng)缸中。在實(shí)驗(yàn)過程中,通過定時(shí)檢測主要水質(zhì)指標(biāo),以保證其符合《漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB11607-1989)》的規(guī)定。每天上午8∶30和下午6∶30各喂食1次;每次投食量為每平行組幼蟾實(shí)際總體重的10%左右。

    每隔7天測量和記錄1次數(shù)據(jù),每大組的其中2個(gè)平行組分別測量5至10個(gè)樣本,測量數(shù)據(jù)主要為幼蟾的體重和體長。體長是自吻部最前端端至臀部最后端的長度[2]。每大組的第3個(gè)平行組作為對照組,平時(shí)正常進(jìn)行喂食和其他實(shí)驗(yàn)管理,但不進(jìn)行定期7天1次的數(shù)據(jù)測量,只在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)從4個(gè)對照組中分別隨機(jī)挑出5個(gè)共20個(gè)樣本測量1次體重和體長,用于和實(shí)驗(yàn)組進(jìn)行比較,以確認(rèn)實(shí)驗(yàn)時(shí)對幼蟾的測量是否影響了幼蟾的體重和體長指標(biāo),在幼蟾第一次冬眠前停止攝食時(shí)結(jié)束本實(shí)驗(yàn)。

    1.3數(shù)據(jù)處理

    先對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)分布和方差的同質(zhì)性檢驗(yàn)。如果數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布和方差的同質(zhì)性,可以直接進(jìn)行方差分析;如果數(shù)據(jù)不呈正態(tài)性分布或不具有同質(zhì)性,必須先將數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換以達(dá)到正態(tài)性和同質(zhì)性的要求后方能對其進(jìn)行方差分析。

    以飼養(yǎng)密度和生長發(fā)育時(shí)間為作用因素,用統(tǒng)計(jì)軟件STATISTICA6.0分別對體重、體長和成活率進(jìn)行相關(guān)性分析、單因素方差分析或二因素方差分析,找出幼蟾在第一次冬眠前成活率高、體重較大和體長較長的飼養(yǎng)密度,這個(gè)密度可以認(rèn)為是人工養(yǎng)殖幼蟾的適宜密度。

    2 結(jié)果

    由表1可知,中華蟾蜍幼蟾在生長發(fā)育過程中,其體重和體長分別受到生長發(fā)育時(shí)間與密度的顯著影響(P值均小于0.05);而且,飼養(yǎng)密度和幼蟾發(fā)育時(shí)間對體重和體長具有互作影響(P值均小于0.05)。

    在幼蟾生長發(fā)育后期(從實(shí)驗(yàn)開始到之后的第112d)幼蟾體重和體長與密度均沒有直線相關(guān)性(r=0.1113,P=0.3812;r=0.1861,P=0.1409)(表2)。但體長與體重之間具有正相關(guān)(密度實(shí)驗(yàn):r=0.9363,P=0.0000,表2),兩者之間的直線回歸方程詳見表2。

    表1 以生長發(fā)育時(shí)間和密度為作用因素對中華蟾蜍幼蟾體重和體長的二因素方差分析

    注:當(dāng)P<0.05時(shí),差異顯著;差異顯著的變異來源用*表示

    表2 第112 d測量的體重、體長和密度之間的直線相關(guān)分析

    注:當(dāng)P<0.05時(shí),差異顯著,具相關(guān)性

    2.1幼蟾生長發(fā)育期、密度與體重的關(guān)系

    表3中各密度實(shí)驗(yàn)組中幼蟾的體重大多隨生長發(fā)育時(shí)間的增長而增加,但有部分時(shí)期體重隨時(shí)間增長并無顯著增加。其中,在密度為20只/m2的條件下,從第49d到第56d,以及第91d到第98d,幼蟾的平均體重在這兩個(gè)時(shí)間段的前后分別略有減少,但前后之間并無顯著差異(F1,30=1.738,P=0.1974;F1,23=0.023,P=0.8799),在其余時(shí)間段,幼蟾的體重都隨發(fā)育時(shí)間的增長而增加。在密度為40只/m2的條件下,從第35d到第42d,幼蟾的體重顯著減少(F1,38=4.781,P=0.0350),其余大部分時(shí)間段,其體重隨時(shí)間的增長而增加;但對全體實(shí)驗(yàn)幼蟾來說,從第35d到第42d,幼蟾的前后體重并無顯著差異(F1,158=0.487,P=0.4861)。在密度為60只/m2的條件下,從第35d到第42d,以及第49d到第56d,幼蟾的平均體重在這兩個(gè)時(shí)間段的前后分別略有減少,但前后之間并無顯著差異(F1,38=1.420,P=0.2408;F1,33=0.410,P=0.5266)。在密度為80只/m2的條件下,從第35d到第49d,以及第70d到第77d,幼蟾的平均體重在這兩個(gè)時(shí)間段的前后分別呈不顯著的降低,但前后之間并無顯著差異(F2,52=2.015,P=0.1436;F1,38=0.165,P=0.6872)。在第112d時(shí)(即冬眠前停止實(shí)驗(yàn)時(shí)),幼蟾的體重在不同密度組間差異不顯著(F3,60=1.380,P=0.2577),表明4種飼養(yǎng)密度對幼蟾生長發(fā)育期間的最終體重沒有影響。

    表3 在不同生長發(fā)育時(shí)間以密度為作用因素對中華蟾蜍幼蟾體重的單因素方差分析

    注:當(dāng)P<0.05時(shí),差異顯著;Tukey 多重比較(Tukey’sposthoctest),α=0.05,上標(biāo)不同的平均值差異顯著

    2.2在幼蟾不同發(fā)育期,密度與體長的關(guān)系

    表4顯示,各密度實(shí)驗(yàn)組中幼蟾的體長大多隨生長發(fā)育時(shí)間的增長而增加,但有部分時(shí)期,體長隨時(shí)間增長呈現(xiàn)出不顯著的減少。其中,在密度為20只/m2的條件下,從第49d到第56d,以及第91d到第98d,幼蟾的平均體長在這兩個(gè)時(shí)間段的前后分別略有減少,但前后之間的平均體長并無顯著差異(F1,30=0.87,P=0.359;F1,23=0.49,P=0.491),在其余時(shí)間段,幼蟾的體長均隨發(fā)育時(shí)間的增長而增加。在密度為40只/m2的條件下,從第35d到第42d,從第63d到第70d,以及第91d到第98d,幼蟾的平均體長在這3個(gè)時(shí)間段前后分別有不顯著的減少(F1,38=2.34,P=0.134;F1,38=0.03,P=0.858;F1,38=0.004,P=0.944),其余時(shí)間段,其體長隨時(shí)間的增長而增加。在密度為60只/m2的條件下,從第35d到第42d,以及第49d

    表4 在不同生長發(fā)育時(shí)間以密度為作用因素對中華蟾蜍幼蟾體長的單因素方差分析

    注:當(dāng)P<0.05時(shí),差異顯著;Tukey 多重比較(Tukey’sposthoctest),α=0.05,上標(biāo)不同的平均值差異顯著

    到第56 d,幼蟾的平均體長在這兩個(gè)時(shí)間段的前后分別具有不顯著減少(F1,38=2.07,P=0.159;F1,33=1.28,P=0.265)。在密度為80只/m2的條件下,從第35 d到第49 d,從第70 d到第77 d,以及第91 d到第105 d,幼蟾的平均體長在這3個(gè)時(shí)間段的前后分別呈不顯著的降低(F2,52=0.96,P=0.389;F1,38=0.009,P=0.924;F2,55=0.14,P=0.877)。在第112 d時(shí),幼蟾的體長在不同密度組間差異不顯著(F3,60=1.36,P=0.263),表明4種飼養(yǎng)密度對幼蟾生長發(fā)育期間的最終體長沒有影響。

    2.3中華蟾蜍幼蟾成活率

    表5為幼蟾在第112d時(shí)4個(gè)密度實(shí)驗(yàn)組的成活率。由于所有成活率數(shù)據(jù)經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)換成角度值后仍然不呈正態(tài)分布,因此無法對成活率數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。所以,表中只列出了各組幼蟾成活率的平均數(shù)和方差等描述性統(tǒng)計(jì)值,并未進(jìn)行差異顯著性分析。從表5可以看出,幼蟾的成活率隨飼養(yǎng)密度的增加而降低;當(dāng)飼養(yǎng)密度為20只/m2時(shí),幼蟾的成活率最高。在4個(gè)飼養(yǎng)密度中,幼蟾的每m2平均成活數(shù)均為6只。

    表5 中華蟾蜍幼蟾成活率

    2.4實(shí)驗(yàn)組和對照組幼蟾之間體重與體長的比較

    表6顯示,當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),實(shí)驗(yàn)組和對照組幼蟾之間平均體重和體長上均無顯著差異(F1,38=0.039,P=0.8453;F1,38=0.01,P=0.904)。表明實(shí)驗(yàn)時(shí)對幼蟾體重和體長等數(shù)據(jù)的測量,并不影響幼蟾的正常生長。

    表6 以組別為作用因素對中華蟾蜍幼蟾體重和體長的單因素方差分析

    注:當(dāng)P<0.05時(shí),差異顯著。

    3 討論

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,中華蟾蜍幼蟾的體重和體長在幼蟾期的大部分階段隨生長發(fā)育時(shí)間的增長而增加。在其中的某一發(fā)育階段,幼蟾體重和體長可能會隨發(fā)育期的增長而減少,但減少不顯著。盡管在密度為40只/m2的飼養(yǎng)條件下,幼蟾的體重從第35 d到第42 d有顯著的減少,但對全部實(shí)驗(yàn)幼蟾來說,幼蟾的體重在此期間前后并無顯著差異。出現(xiàn)以上情況的原因可能是取樣誤差,也可能是在此期間幼蟾的生長情況不佳。

    實(shí)驗(yàn)時(shí)對幼蟾進(jìn)行數(shù)據(jù)測量,對于幼蟾來說是一種外界刺激,經(jīng)檢驗(yàn)對幼蟾生長發(fā)育的影響沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此,本實(shí)驗(yàn)結(jié)果能夠反映幼蟾在人工飼養(yǎng)條件下的生長情況。盡管在幼蟾的整個(gè)實(shí)驗(yàn)期內(nèi),幼蟾平均體重和體長顯著受到飼養(yǎng)密度的影響,但在實(shí)驗(yàn)后期(尤其是第112 d),不同密度條件下的幼蟾在體重和體長方面均無顯著差異。以上情況的出現(xiàn),可能是由于在實(shí)驗(yàn)后期,實(shí)驗(yàn)幼蟾由于一定數(shù)量的死亡而導(dǎo)致飼養(yǎng)密度的下降,因此各密度梯度中的幼蟾生長指標(biāo)趨于一致。由于4種飼養(yǎng)密度的幼蟾在體重、體長和成活率等重要指標(biāo)上沒有差異,并且所有密度處理后的最終成活的幼蟾平均數(shù)都為6只/m2,出于幼蟾的飼養(yǎng)成本和養(yǎng)殖效率的考慮,在人工飼養(yǎng)中華蟾蜍幼蟾時(shí),最佳飼養(yǎng)密度以20只/m2為宜。李文健等[8]對棘腹蛙Ranaboulengeri的幼蛙進(jìn)行了人工試養(yǎng)研究,結(jié)果表明幼蛙的飼養(yǎng)密度在37~74只/m2時(shí)成活率在95%以上,并據(jù)此判定該密度范圍為最佳,該實(shí)驗(yàn)中幼蛙的最佳飼養(yǎng)密度高于本實(shí)驗(yàn)中幼蟾的最佳飼養(yǎng)密度。其原因可能與兩種動物的習(xí)性差異較大有關(guān)。

    4 結(jié)論

    由本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可得出以下結(jié)論:(1)中華蟾蜍在第一次冬眠前的成活率為7.9~30.0%;(2)中華蟾蜍幼蟾最適養(yǎng)殖密度為20只/m2。

    [1] 江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典:下冊[M].上海:上海人民出版社,1977:2713.

    [2] 費(fèi)梁,胡淑琴,葉昌媛,等.中國動物志:兩棲綱(中卷),無尾目[M].北京:科學(xué)出版社,2009.

    [3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:一部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:360.

    [4] 曾洋,張愛軍,文筱.干蟾皮的研究進(jìn)展[J].中國醫(yī)藥科學(xué),2011,1(15):29-31.

    [5] 王宏潔,楊立新,高波,等.高效液相色譜法測定不同種蟾皮中蟾蜍噻嚀的含量[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2012,19(11):44-45.

    [6] 喬淑芬.中華大蟾蜍生活習(xí)性及人工養(yǎng)殖場地選擇[J].通化師范學(xué)院學(xué)報(bào),2008,29(4):39-41.

    [7] 李軍德,趙群,康彥.密度與飼料對中華蟾蜍蝌蚪生長發(fā)育的影響[J].中國中藥雜志,2016,41(6):1001-1007.

    [8] 李文健,王智,張健華,等.棘腹蛙(RanaboulengeriGünther)[J].常德師范學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2001,13(4):76-78.

    Effects of Different Raising Densities on Toadlet Development ofBufogargarizans

    ZHAO Qun1,2,LI Junde1*,KANG Yan3,GAO Bo3,LI Denglin3,YANG Yan3

    (1.National Resource Center for Chinese Materia Medica,China Academy of Chinese Medical Sciences,State Key Laboratory Breeding Base of Dao-di Herbs,Beijng 100700,China; 2.West Anhui University,Liu’an 237012,China;3.Anhui China Resources Jinchan Pharmaceutical Co.,Ltd.,Huaibei 235000,China)

    Objective:The effects of four different raising densities on the toadlets growth ofBufogargarizanswere studied.Methods:The toadlets were fed respectively at different density of 20,40,60,and 80 toadlets per square meter.The body weight and snout-vent length were measured and recorded every seven days for 112 days.Results:(1)The survival rates of toadlet before the first hibernation period was from 7.9% to 30.0%;(2)The raising density had no effect on the body weight and snout-vent length of toadlet before first hibernation period,and the optimum raising density is 20 toadlets per square meter.Conclusion:The optimum raising density of toadlet was 20 toadlets per square meter.

    Bufogargarizans;toadlet;raising density;development

    中央本級重大增減支項(xiàng)目(2060302);蟾蜍規(guī)范化養(yǎng)殖技術(shù)研究(3-YFB2014005);安徽省高校省級自然科學(xué)研究項(xiàng)目(KJ2013B329)

    ] 李軍德,研究員,研究方向:藥用動物資源與動物藥材鑒定研究;E-mail:jundeli99@163.com

    10.13313/j.issn.1673-4890.2017.1.017

    2016-02-15)

    *[

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    意林(2017年8期)2017-05-02 17:40:37
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