C反應蛋白在犬病臨床上的應用

周紅蕾 李鵬昊 吳海濤 羅有文 （江蘇農牧科技職業(yè)學院 江蘇 泰州 225300）錢俞佳 （江蘇華創(chuàng)信諾醫(yī)藥科技有限公司 江蘇 泰州）

血常規(guī)檢測、C反應蛋白作為檢測犬感染性疾病的生物標志物，近幾年在寵物醫(yī)學臨床上應用越來越廣，C反應蛋白作為犬肝臟細胞合成的一種急性時相蛋白，是近兩年剛剛進入犬病臨床的一項炎性檢測指標，對于犬疾病的診療及預后判斷具有非常重大的意義，本文重點介紹了C反應蛋白的臨床意義及應用，對犬病臨床感染性疾病的診療工作有一定的意義。

隨著寵物診療行業(yè)的飛速發(fā)展，很多寵物臨床檢驗設備及技術也隨之得到很大程度的提高。其中感染(包括病毒、細菌等的病原學感染)可發(fā)生在臨床各科，寵物的任一部位，因此與感染有關的診斷技術和治療手段是所有寵物醫(yī)生均應掌握的基本功之一。在前幾年的寵物診療中診斷感染，主要依靠血常規(guī)檢驗技術，但是沒有任何一個生物標志物是絕對敏感又絕對特異的，不能單憑某個生物標志物的改變來診斷疾病，C反應蛋白是近幾年寵物診療工作中使用越來越多的一個檢驗指標。C反應蛋白(CRP)是機體發(fā)生炎癥時主要由肝臟細胞合成的一種急性時相蛋白[1～3]，由巨噬細胞釋放白細胞介素(ILs)等炎癥介質刺激肝臟細胞合成，淋巴細胞、單核細胞及局部炎癥性肺組織也能產生少量CRP[4]。CRP以糖蛋白的形式存在于血液中，由5個完全相同的單體以非共價鍵組成空間環(huán)狀球體，分子量為115kD[1]。CRP主要起到宿主對感染的防御，對炎癥細胞的吞噬及免疫調節(jié)[1，2]，對各種刺激因素包括感染、組織損傷、壞死均能迅速做出反應[2，5]。

1 C反應蛋白的結構

圖1 C反應蛋白結構圖

C反應蛋白(CRP)是在1930年由Tillet和Francis發(fā)現(xiàn)的蛋白質物質。最初他們觀察到一些急性病人的血清可與肺炎鏈球菌的莢膜C—多糖發(fā)生反應，所以將其命名為C反應蛋白。C反應蛋白是一種環(huán)狀五聚體蛋白，如圖1所示。其一級結構包含5個相同的亞單位(23KD)，亞單位間以非共價鍵相結合，每個弧單位在其表面都含有C反應蛋白配體結合位點(與配體的結合需Ca2+參與)，其另一面含有Clq及FcTR結合位點[6]。

2 C反應蛋白的生物學特點

C反應蛋白是機體非特異性免疫機制的一部分，主要由肝細胞在L-6、L-1β、TNF-α刺激下合成，炎癥局部巨噬細胞也可少量產生。正常合成率＜10mg/L，急性炎癥時＞10mg/L。作為有免疫防御特性的鈣結合蛋白，CRP的主要生物學功能是在Ca2+存在下與磷酸膽堿、DNA、組蛋白等結合。CRP可與凋亡壞死細胞膜脂質雙層結構破壞時暴露的磷脂或外部侵入的細菌、真菌、寄生蟲的細胞壁磷酸膽堿結合，激活補體，增強白細胞的吞噬作用，調節(jié)淋巴細胞或單核/巨噬系統(tǒng)功能，促進巨噬細胞組織因子的生成，促使內源性或外源性配體物質的清除。（1）識別外來物質，激活補體系統(tǒng)。（2）增強調理作用，增強吞噬細胞吞噬作用。（3）與血小板激活因子(RAF)結合，降低炎癥反應。（4）與染色體結合，消除壞死組織里的細胞DNA。

3 C反應蛋白的臨床指示意義

（1）血清CRP在感染發(fā)生后5～8h即開始升高，48h達到峰值，血漿半衰期19h，高峰值可達正常的數(shù)百倍。隨著感染控制它可在24～48h迅速下降，1周內恢復正常。CRP的水平和持續(xù)時間與感染程度呈正相關，CRP持續(xù)升高或再度升高提示臨床應重視病情的變化。（2）CRP在細菌與病毒感染的犬之間存在明顯差異。CRP在絕大多數(shù)病毒感染的血清濃度變化不大或不變，這是由于大多數(shù)病毒感染是在細胞內增殖進行，而完整的細胞膜上缺乏暴露的磷脂蛋白質，故不能觸發(fā)CRP的產生和結合。相反，直接創(chuàng)傷和多數(shù)細菌感染發(fā)生在細胞外，足以使細胞膜分離，暴露出膽堿磷酸和提拱CRP的附著點，通過L-6將信息傳遞給肝，并刺激肝產生有活性的CRP。（3）對細菌感染作抗生素治療時，動態(tài)檢測C-反應蛋白是最有用的手段。血液中的C-反應蛋白量隨著炎性因子的升高而增加，其中有數(shù)小時的延遲，活性淋巴細胞分泌的淋巴因子不久即降至正常，然而如治療無效，C-反應蛋白可維持在高濃度水平，感染加劇，則其濃度還會上升。動態(tài)監(jiān)測C-反應蛋白，比臨床體征更早作出并發(fā)癥警報和治療效果的判定。

4 C反應蛋白與血液白細胞對比

4.1 對炎癥的反應速度 白細胞反應速度升高較慢，長達36h才會有上升趨勢，治療后隨炎癥刺激消除而降低，但降低較慢。C反應蛋白炎癥反應后5～8h明顯上升；48h到達峰值，當炎癥被控制后C反應蛋白水平迅速降低。

4.2 影響因素 犬的自身機體抵抗力、時間差異、是否用藥以及年齡會影響白細胞的檢測。C反應蛋白不受機體抵抗力、時間差異、是否用藥所影響[7]。

4.3 對疾病的敏感度 白細胞數(shù)值范圍比較大，因犬的品種差異、年齡等因素使動物本身白細胞參考數(shù)不同，有少許的升高但是卻沒有超過正常數(shù)值，慢性細菌感染時，白細胞數(shù)值沒有明顯的上升，變化不顯著。C反應蛋白，影響因素比較少，炎癥反應數(shù)值比較靈敏，可以很好地用來檢測急性細菌感染及判定抗生素療效，在粒細胞缺乏或作免疫抑制療法時尤為適用。

5 C反應蛋白的臨床應用

5.1 C反應蛋白及白細胞在監(jiān)測肺炎治療過程中的應用阿拉斯加，3月齡，母犬，免疫齊全，主訴今日發(fā)現(xiàn)該犬咳嗽，飲食欲正常，大小便正常，自行喂服人用止咳藥，沒有好轉。體溫39℃，呼吸42次/分，脈搏156次/分。化驗犬瘟熱病毒、犬細小病毒、犬冠狀病毒均為陰性。拍攝X線片，肺內有炎性滲出，如圖2、圖3所示。根據(jù)藥敏試驗選擇抗生素進行輸液治療，并且定期檢測C反應蛋白及白細胞數(shù)值，如表1所示。根據(jù)相應檢查結果，確診該犬患有肺炎，第1天就診時白細胞尚在正常范圍內，而C反應蛋白檢測值已經超過

圖2 側位片肺內滲出

圖3 正位片肺內滲出

表1 白細胞(WBC)與C反應蛋白檢測

100mg/L，表明C反應蛋白對炎癥反應速度敏感。隨著治療藥物的使用及病情的發(fā)展，白細胞數(shù)值繼續(xù)上升，說明白細胞反應的遲滯性，直到第7天數(shù)值才下降，無法對抗生素的使用給出指導意見，在動態(tài)監(jiān)測過程中，C反應蛋白數(shù)值一直下降，這與X線片的呈現(xiàn)效果是一致的，說明了抗生素治療的有效性，對臨床用藥有相當大的指導意義。

5.2 C反應蛋白及白細胞在監(jiān)測腫瘤治療過程中的應用藏獒，9歲，公犬，42kg，右后肢外側皮膚一個腫物，破潰，腫脹，滲出，經細胞學檢查，初診為肥大細胞瘤，如圖4所示?？紤]手術切除，并病理送檢，術前術后的C反應蛋白及白細胞檢測情況如表2所示，術后第7天病理報告顯示為肥大細胞瘤，II級，化療開始。

圖4 肥大細胞

由于腫瘤破潰，術前和術后C反應蛋白一直很高，難以控制，術后第7天開始選用伊馬替尼口服化療，第9天時傷口開裂，繼而發(fā)生傷口紅腫，瘙癢嚴重，C反應蛋白持續(xù)升高，第13天的時候改服用帕拉丁，傷口逐漸消腫變小，瘙癢減輕，C反應蛋白數(shù)值逐漸下降，至第18天時，隔日給予一次帕拉丁，劑量逐漸遞減為0.5mg/kg，至第30天，傷口愈合良好，C反應蛋白數(shù)值在正常范圍內。從整個用藥化驗的過程來看，C反應蛋白的數(shù)值與犬的臨床表現(xiàn)高度一致，表明C反應蛋白在監(jiān)測惡性腫瘤治療時能正確指引合適的化療藥物，白細胞的數(shù)值也有一定的規(guī)律性，但是由于反應的遲滯性，對藥物使用的反應不是特別的敏感。

表2 白細胞(WBC)與C反應蛋白檢測

6 小結

C反應蛋白可以有效地鑒別寵物犬的細菌感染與病毒感染，可以反應疾病炎癥反應的程度，也可以對腫瘤疾病有良好的監(jiān)測和用藥指導。隨著寵物疾病診斷手段的發(fā)展，越來越多的寵物疾病被診斷出，C反應蛋白也期待在更多的疾病診斷、預后以及用藥指導方面發(fā)揮越來越多的作用。