何佳英 裴金霞
[摘要] 目的 分析200例無生機(jī)的未足月胎膜早破(Previable preterm premature rupture of the membranes,PPROM)孕婦的生殖道感染病原菌的分布及預(yù)后。 方法 選自2003年1月~2017年1月在我院就診的200例14~23周無生機(jī)兒PPROM者,知情選擇后強(qiáng)烈要求保胎者,明確診斷入組后予陰道宮頸分泌物解脲及人型支原體,衣原體,淋球菌,加德納菌,念珠菌,陰道毛滴蟲,鏈球菌等培養(yǎng)。 結(jié)果 200例中95例支原體陽性(其中89例解脲支原體陽性,39例人型支原體陽性,33例兩者都陽性),11例在衣原體陽性,7例淋球菌陽性,46例加德納菌陽性,45例假絲酵母菌陽性,31例B-鏈球菌陽性,滴蟲6例,17例病原菌監(jiān)測(cè)陰性。其中三種以上病原菌感染23例,兩種感染56例,一種感染104例,病原菌總感染率高達(dá)91.5%,而且病原菌感染種數(shù)越多,不良妊娠幾率越高且出現(xiàn)越早[1]。積極抗炎對(duì)癥治療后其中40例成功保胎至>23周,隨訪新生兒至一周歲內(nèi)均無明顯不良預(yù)后。 結(jié)論 對(duì)于未足月胎膜早破,需常規(guī)進(jìn)行陰道病原菌檢查,及時(shí)明確診斷,積極進(jìn)行抗感染治療或預(yù)防性抗生素治療對(duì)穩(wěn)定患者生殖道感染及擴(kuò)散,改善妊娠預(yù)后具有重要意義。
[關(guān)鍵詞] 無生機(jī)的未足月胎膜早破;生殖道感染;病原菌;抗感染;妊娠結(jié)局
[中圖分類號(hào)] R714.433? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701(2019)36-0056-04
Distribution and prognosis of genital tract pathogens in 200 pregnant women with previable preterm premature rupture of membranes
HE Jiaying PEI Jinxia
Department of Gynecology and Obstetrics, Hangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine, Hangzhou 310006, China
[Abstract] Objective To analyze the distribution and prognosis of genital tract pathogens in 200 pregnant women with previable preterm premature rupture of membranes (PPROM). Methods 200 patients with previable PPROM of 14-23 weeks in our hospital from January 2003 to January 2017 were consulted. After informed choice, the patients who strongly asked for preventing miscarriage were given vaginal cervical secretion cultures of ureaplasma and human mycoplasma, chlamydia, neisseria gonorrhoeae, gardnerella, candida, trichomonas vaginalis, streptococcus, etc. Results Of the 200 cases, 95 were positive for mycoplasma (89 of them were positive for ureaplasma urealyticum, 39 were positive for mycoplasma hominis, 33 were positive for both), 11 were positive for chlamydia, 7 were for neisseria gonorrhoeae, and 46 were for gardnerella, 45 cases were positive for candida, 31 cases were positive for B-streptococci, 6 cases were negative for trichomoniasis, and 17 cases were negative for pathogen detection. Among them, 23 cases were infected with more than three pathogens, 56 cases were infected with two kinds, and 104 cases were infected with one pathogen. The total infection rate of pathogens was as high as 91.5%. The more the number of pathogen infections was, the higher the probability of adverse pregnancy and the earlier of the occurrence of adverse pregnancy was. After active anti-inflammatory symptomatic treatment, 40 of them successfully survived to >23 weeks. There was no significant adverse prognosis in the follow-up of newborns to one year old. Conclusion For patients with premature rupture of fetal membranes, it is necessary to routinely perform vaginal pathogen examination. Timely and clear diagnosis, and active anti-infective treatment or prophylactic antibiotic treatment is of great significance for stabilizing genital tract infection and spread and improving pregnancy prognosis.
[Key words] Previable preterm premature rupture of membranes; Genital tract infection; Pathogen; Anti-infection; Pregnancy outcome
未足月胎膜早破(Preterm premature rupture of the membranes,PPROM)是指妊娠37周內(nèi)胎膜在臨產(chǎn)前自發(fā)性破裂。孕婦中的PPROM發(fā)生率約為3%,30%~40%的早產(chǎn)與PPROM有關(guān),其中25%出現(xiàn)在妊娠26周前[1]。又將孕周小于23周的PPROM稱為無生機(jī)的PPROM[2-3],目前國內(nèi)外多項(xiàng)研究結(jié)果表明生殖道病原微生物感染是引起胎膜早破的重要原因之一[4-5]。由于妊娠期體內(nèi)激素水平變化,陰道內(nèi)環(huán)境改變,陰道內(nèi)的正常菌群也隨之改變,導(dǎo)致陰道微生態(tài)環(huán)境遭受破壞,致使生殖道感染的概率增加,發(fā)病率雖僅10%,但因其易并發(fā)流產(chǎn),早產(chǎn)及宮內(nèi)感染,且時(shí)間越長,繼發(fā)絨毛膜羊膜炎風(fēng)險(xiǎn)越高[6],進(jìn)而危害母嬰健康而倍受重視。本研究旨在回顧性分析在我院確診及保胎的無生機(jī)的未足月胎膜早破孕婦生殖道感染病原菌分布和預(yù)后情況,為臨床診斷治療提供參考。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選自2003年1月~2017年1月在我院就診的14~23周PPROM 200例。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)孕周14~23周無生機(jī)兒[3];(2)臨床明確診斷破水[7];(3)知情了解風(fēng)險(xiǎn)后強(qiáng)烈要求保胎;(4)醫(yī)從性好,能配合相應(yīng)醫(yī)療檢查及治療。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)宮口已擴(kuò)張,宮頸機(jī)能不全者;(2)子宮畸形者;(3)多胎,胎位不正者;(4)羊水過少者;(5)醫(yī)源性破膜者;(6)已明確宮內(nèi)感染者;(7)繼續(xù)妊娠危及母嬰生命的嚴(yán)重并發(fā)癥患者[2]。入組前均詳細(xì)告知PPROM保胎的風(fēng)險(xiǎn),簽署同意書后堅(jiān)決要求保胎,入組者入院后均行陰道分泌物常規(guī)檢測(cè),支原體[(包括解脲支原體Ureaplasma urealyticum,UU)和人型支原體(Mycoplasma hominis,MH)]、衣原體(Chlamydia,CT)、淋球菌(Gonococcus,NG)、加德納菌(Gardnerella,GV)、B族鏈球菌(B-streptococcus,GBS)培養(yǎng)及假絲酵母菌,滴蟲常規(guī)鏡檢檢查。
1.2 診斷依據(jù)
(1)根據(jù)末次月經(jīng)和首次B超核實(shí)孕周14~23周;(2)患者自覺有不能控制的陰道流液,腹壓增加時(shí)更加明顯,量多少及持續(xù)時(shí)間不等;陰道窺視時(shí)見液體自宮頸流出或陰道后穹窿有含胎脂積液;(3)陰道液測(cè)PH試紙呈堿性;(4)陰道后穹窿液涂片可找到羊齒狀結(jié)晶;(5)對(duì)有疑問者,可通過測(cè)定宮頸-陰道分泌液中的胎兒纖維結(jié)合素(fFN)、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1(IGFBP-1)等方法予以確診。
1.3 標(biāo)本采集方法
孕婦取截石位,常規(guī)消毒外陰,擴(kuò)陰器充分暴露陰道壁及宮頸,對(duì)分泌物性狀和量、宮頸情況進(jìn)行觀察并做好記錄。采用3支無菌棉簽在距陰道外口5 cm陰道下1/3處取陰道分泌物做加德納菌、B-族鏈球菌培養(yǎng);棉球去除宮頸陰道部多余的分泌物,取另3支無菌棉簽各放置在宮頸管內(nèi)1~2 cm處,停留5 s后旋轉(zhuǎn)2~3圈后取出,實(shí)施支原體,衣原體,淋球菌培養(yǎng),然后進(jìn)行密封送檢。陰道毛滴蟲、陰道假絲酵母菌檢測(cè):無菌窺陰器暴露陰道,消毒棉簽蘸取無菌生理鹽水后取陰道側(cè)壁分泌物,將分泌物放在干凈的試管內(nèi),送檢驗(yàn)科常規(guī)鏡檢。
1.4 檢測(cè)方法
(1)加德納菌檢測(cè)采用免疫熒光法,取樣后即刻玻片固定后免疫熒光試劑染色,在37℃電熱恒溫水浴中孵育30 min后洗滌,在熒光顯微鏡100倍油鏡鏡檢。其中熒光試劑盒由深圳市邁科龍生物技術(shù)有限公司提供,電熱恒溫水浴槽由上海景邁儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)。(2)支原體檢測(cè)采用培養(yǎng)基培養(yǎng)法,主要是UU、MH兩種,標(biāo)本加入培養(yǎng)基中充分混勻,再放入加入監(jiān)測(cè)卡的各孔,蓋上監(jiān)測(cè)卡蓋,放37℃孵箱培養(yǎng),24 h和48 h后觀察結(jié)果,通過比色卡進(jìn)行定性判斷。試劑盒由珠海迪爾生物工程有限公司提供。(3)衣原體檢測(cè)采用乳膠法,采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析技術(shù),試劑含有被預(yù)先固定于膜上監(jiān)測(cè)區(qū)(T)的衣原體抗體通過檢測(cè)區(qū)顏色變化定性判斷。試劑盒由杭州艾博生物醫(yī)藥有限公司提供。(4)淋病奈瑟氏菌檢測(cè)采用巧克力瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)法定性判斷。試劑盒由由上??片敿挝⑸锛夹g(shù)有限公司提供。(5)B-族鏈球菌培養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)法,試劑由鄭州貝瑞特生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供的哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基。(6)陰道毛滴蟲、假絲酵母菌檢測(cè):取放在干凈的試管陰道分泌物,常規(guī)鏡檢,發(fā)現(xiàn)滴蟲、芽苞和假菌絲為陽性。
1.5 觀察指標(biāo)
分析200例入組患者生殖道感染病原菌種數(shù)構(gòu)成及比例,以及不同種數(shù)病原菌感染與妊娠結(jié)局關(guān)系,觀察160例妊娠丟失患者不同并發(fā)癥占比及關(guān)系,以及因感染導(dǎo)致妊娠丟失的121例患者感染病原菌種數(shù)對(duì)妊娠維持時(shí)長的影響。統(tǒng)計(jì)分析生殖道感染因素在PPROM妊娠結(jié)局中的影響[3]和預(yù)后[4]。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理,計(jì)數(shù)資料采用率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 感染病原菌種數(shù)及種類比例
支原體陽性患者中,其中89例UU陽性,39例MH陽性,33例UU和MH都陽性。其中三種以上病原菌感染23例,兩種感染56例,一種感染104例,17例患者以上病原菌培養(yǎng)陰性,病原菌總感染率高達(dá)91.5%。見表1。
表1? ?感染病原菌種數(shù)構(gòu)成及比例
2.2 感染病原菌種數(shù)與妊娠結(jié)局關(guān)系
200例中40例成功保胎至孕23周,其中三種病原菌以上感染的1例,兩種病原菌感染的6例,一種病原菌感染的21例,培養(yǎng)無以上病原菌感染的12例。兩種及以上病原菌感染與無病原菌感染者保胎成功率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),一種病原菌感染和無病原菌感染者保胎成功率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。3組不良妊娠發(fā)生率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。
表2? ?感染病原菌種數(shù)與妊娠結(jié)局關(guān)系[n(%)]
2.3 不良妊娠結(jié)局(妊娠丟失)和不同并發(fā)癥關(guān)系
妊娠丟失的160例因絨毛膜羊膜炎,持續(xù)陰道流液,胎盤早剝,流產(chǎn)及其他等因素導(dǎo)致終止妊娠,其中宮內(nèi)感染因素遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于非宮內(nèi)感染因素(宮內(nèi)感染占75.6%)。見表3。
2.4 121例絨毛膜羊膜炎感染導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局(妊娠丟失)感染病原菌種數(shù)與保胎時(shí)長關(guān)系
兩種及以上病原菌感染相比于一種病原菌感染者不良妊娠結(jié)局(妊娠丟失)出現(xiàn)的時(shí)間更早,保胎時(shí)長更短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ12=5.791,P1=0.016<0.05;χ22=6.854,P2=0.009<0.05)。
表4? ?121例感染導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局(妊娠丟失)感染病原菌種數(shù)與保胎時(shí)長關(guān)系[n(%)]
3 討論
妊娠期陰道環(huán)境和病原菌感染意義 正常女性陰道是一個(gè)存在多種不同類型的微生物且與機(jī)體內(nèi)分泌系統(tǒng)相互協(xié)調(diào)、互相制約的保持動(dòng)態(tài)平衡的微生態(tài)系統(tǒng)[8]。妊娠期由于免疫力受抑制及妊娠后雌激素水平上升,陰道內(nèi)糖原增加,黏膜充血水腫,屏障功能下降,這些均導(dǎo)致陰道內(nèi)微生態(tài)平衡被打破,菌群失調(diào),有利于加德納菌及一些厭氧菌的生長而出現(xiàn)生殖道機(jī)會(huì)性感染[9-12]。而下生殖道感染可能是胎膜早破(PPROM)最重要的因素[13],主要機(jī)制是病原菌破壞了胎膜的完整性,還可經(jīng)血行擴(kuò)散到胎盤、子宮,導(dǎo)致絨毛膜羊膜炎,感染部位的炎性細(xì)胞滲出,白細(xì)胞浸潤,胎膜組織水腫,纖維組織增生,致使胎膜脆性增加堅(jiān)韌度下降而引發(fā)胎膜早破[14]。羊膜腔感染的早期,絕大多數(shù)孕婦都處于亞臨床狀態(tài),無明顯臨床表現(xiàn)[15-16]。感染后可引起白介素-6、白介素-8、腫瘤壞死因子、前列腺素等促炎性遞質(zhì)的急劇釋放,這些均可導(dǎo)致胎膜早破以及流產(chǎn)、早產(chǎn)等[17],有國內(nèi)專家研究顯示,PPROM有70%的組織學(xué)羊膜炎發(fā)生率[18],30%~40%的PPROM有羊膜腔內(nèi)細(xì)菌生長,并且孕周不同,細(xì)菌的種類可能也有所不同;胎膜早破發(fā)生越早,感染細(xì)菌種類越多,感染率越高,羊水細(xì)菌培養(yǎng)陽性率越高,保胎風(fēng)險(xiǎn)就越大,成功率隨之也越低[19]。
本研究對(duì)14~23周200例PPROM者陰道細(xì)菌學(xué)分布及特點(diǎn)觀察,發(fā)現(xiàn)感染三種病原菌的大部分為支原體(UU,MH),合并有假絲酵母菌,加德納菌感染,從妊娠結(jié)局來看,感染兩種及以上病原菌的保胎成功率比感染一種或無病原菌感染者比較保胎成功率低(P<0.005)。從生殖道病原菌感染的分布情況分析,本案例下生殖道感染病原菌分布解脲支原體占44.5%,其次是加德納氏菌占23%,假絲酵母菌占22.5%,B族鏈球菌占15.5%,其他如衣原體,淋球菌,滴蟲感染率均不高。從不良妊娠結(jié)局和不同并發(fā)癥關(guān)系來看,宮內(nèi)感染因素遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于非宮內(nèi)感染因素,而且多種病原菌感染相比于一種病原菌感染者保胎時(shí)長更短妊娠丟失的時(shí)間更早,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
在感染所致胎膜早破的病原體中,多篇文獻(xiàn)資料證明支原體是引起胎膜早破的重要病原體之一,它是介于細(xì)菌和病毒之間,一類缺乏細(xì)胞壁、形態(tài)上呈高度多形性,以二分裂方式繁殖,能通過除菌濾器,在無生命培養(yǎng)基中生長繁殖的有獨(dú)特發(fā)育周期的最小的原核細(xì)胞型微生物[20],主要寄生于泌尿生殖道及生殖腺內(nèi)。有文獻(xiàn)報(bào)道,6%~75%的成人有無癥狀的支原體攜帶,在孕婦可達(dá)80%,因?yàn)闊o癥狀或癥狀不典型而延誤治療、繼發(fā)上行感染,引起蛻膜及絨毛膜炎,從而導(dǎo)致胎膜早破。也是產(chǎn)褥病和新生兒病發(fā)病率升高的重要因素。
妊娠期陰道糖原堆積,陰道酸堿度改變,念珠菌也是一種常見的妊娠期生殖道感染病原菌,有研究表明妊娠期婦女陰道念珠菌感染的發(fā)病率是非妊娠婦女的2倍。常引起患者生殖道內(nèi)較嚴(yán)重的炎癥反應(yīng),且因具有較強(qiáng)的侵襲力,可引起嚴(yán)重不良妊娠結(jié)局如流產(chǎn)、早產(chǎn)等[21]。
加德納菌(GV)也是導(dǎo)致PPROM的一種重要病原菌,是細(xì)菌性陰道病的重要病原菌,并與胎膜早破和輸卵管妊娠、早產(chǎn)等不良妊娠結(jié)局等關(guān)系密切[22]。GV陽性者多數(shù)合并支原體感染,GV單獨(dú)感染者少見。已有的藥敏試驗(yàn)表明,GV僅對(duì)滅滴靈、克林霉素等少數(shù)抗生素敏感,治療上也明顯有別于支原體感染、衣原體感染、淋病和念珠菌感染[23]。而且GV感染者中大多數(shù)合并支原體感染,治療GV感染應(yīng)聯(lián)合應(yīng)用抗支原體藥物。
該案例中外源性感染病原體中的衣原體,淋球菌,滴蟲各占5.5%,3.5%和3%,感染率不高,可能與孕前檢查比較重視有關(guān),孕后性生活明顯減少從而通過性接觸傳播減少也有關(guān)。
本研究胎膜早破患者會(huì)隨著時(shí)間的延長而顯著提高細(xì)菌上行感染母體的幾率,此時(shí)如果患者沒有得到有效干預(yù)可能會(huì)引發(fā)產(chǎn)褥感染,嚴(yán)重者會(huì)發(fā)生敗血癥、新生兒肺炎以及膿毒血癥等,對(duì)母體及新生兒造成嚴(yán)重影響[24]。而23周前的臨床胎膜早破因遠(yuǎn)離足月兒,繼續(xù)妊娠母嬰風(fēng)險(xiǎn)更是大大增加且保胎成功率明顯降低,所以大部分研究者都建議終止妊娠,國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道研究小于23周前早胎膜早破且繼續(xù)成功保胎文章極少,本文作者就十多年來收集的相關(guān)病例研究發(fā)現(xiàn)妊娠期生殖道感染是PPROM發(fā)生的主要原因,與PPROM互為因果,而且病原菌感染種類多少直接和保胎成功率成負(fù)相關(guān)。感染的病原菌種類越多,不良妊娠結(jié)局及并發(fā)癥往往越高,防止微生物感染成為預(yù)防PPROM發(fā)生及治療的重要手段及措施。
綜上所述,希望醫(yī)患雙方能重視孕前、孕期陰道病原菌的檢查及注意衛(wèi)生宣教,重視胎膜早破發(fā)生的預(yù)防與處理,監(jiān)測(cè)感染對(duì)妊娠結(jié)局的影響,并指導(dǎo)孕期用藥,可大大降低下生殖道感染對(duì)母嬰的不良妊娠結(jié)局以提高圍生期質(zhì)量,希望本文臨床工作經(jīng)驗(yàn)?zāi)転榕R床工作者提供參考依據(jù)。后續(xù)進(jìn)一步觀察PPROM成功保胎出生者與無PPROM孕婦出生者孩子在體格、智力、認(rèn)知及行為等方面比較有待于進(jìn)一步開展。
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(收稿日期:2019-09-12)