中藥商陸抗腫瘤作用研究進(jìn)展

李 玄,郭心靈,楊俊杰

本文描述的是被《中國(guó)藥典》2015 年版[1]收錄作為藥用的為商陸(PhytolaccaacinosaRoxb)和垂序商陸(P.americanaL).的干燥根。當(dāng)前除手術(shù)作為癌癥治療的主要手段外，化學(xué)藥物治療、放射治療方法和免疫細(xì)胞療法一直作為臨床抑制腫瘤生長(zhǎng)的重要手段。近年腫瘤的免疫細(xì)胞療法有部分已在海外上市。雖然其顯示短期數(shù)據(jù)良好，但存在不能控制有效復(fù)發(fā)率，治療窗窄，副作用難于處理，價(jià)格昂貴等問題；雖然存在這些問題，但其依然有希望作為癌癥治療的突破口。我國(guó)的傳統(tǒng)中藥商陸既有成分可以直接抑制某些腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，又有成分可以刺激淋巴細(xì)胞免疫細(xì)胞提高抗瘤活性，通過(guò)更深的研究或許可以為腫瘤的免疫細(xì)胞療法或是癌癥治療提供新的支持。

1 商陸的活性成分

商陸經(jīng)分離發(fā)現(xiàn)含有三萜皂苷類、揮發(fā)油、多糖、氨基酸，甾醇等化學(xué)成分。三萜皂苷為目前商陸被認(rèn)定的最主要的特征性成分，已分離鑒定的成分主要有：美商陸皂苷元，2-羥基商陸酸，商陸酸，商陸二酸A、B等，商陸皂苷元等多種皂苷類化合物[2]。揮發(fā)油成分主要為棕櫚酸和亞油酸：劉瑞娟等[3]利用水蒸氣蒸餾法提取結(jié)合GC-MS分析鑒定成分顯示：棕櫚酸(52.49%)和亞油酸(21.60%)，大于 2%的成分有6種。多糖類成分主要為商陸多糖-I(PAP-I)和商陸多糖-Ⅱ(PAP-Ⅱ)，可經(jīng)DEAE—纖維素分離獲得。此外，商陸中存在多種蛋白多肽類成分，包括：商陸素(PWM)，抗病毒蛋白(PAP)，單多肽鏈結(jié)構(gòu)的抗真菌蛋白(PAFP-R1和PAFP-R2)以及多種黃酮類，酚酸類，甾醇類化合物。

2 商陸抗腫瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究

目前商陸抗腫瘤活性研究主要有商陸多糖(PAP-I，PAP-II)、商陸皂苷(ES)、商陸抗病毒蛋白(PAP)三個(gè)集中點(diǎn)。多報(bào)導(dǎo)[4-6]稱醋制后的商陸細(xì)胞毒活性表達(dá)不明顯，但可以多途徑地增強(qiáng)機(jī)體的免疫細(xì)胞活性或直接刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生細(xì)胞因子而發(fā)揮間接腫瘤細(xì)胞毒性，具體情況如下。

早期報(bào)導(dǎo)[7]中，ES是一種T淋巴細(xì)胞分裂原。1983年Mosmann[8]報(bào)導(dǎo)小鼠IFN-γ、IL-2及LT是由TH(T1輔助細(xì)胞)合成的。中國(guó)商陸皂苷ES能誘生IFN-γ、IL-2及LT。而由這些細(xì)胞因子混合制成的MLF制品曾作為早期的二代細(xì)胞治療藥劑開展過(guò)臨床實(shí)驗(yàn)[4]。

王洪斌等[9]發(fā)現(xiàn)商陸多糖PAP-I在體外實(shí)驗(yàn)中能促進(jìn)刀豆球蛋白A(ConA)及脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖，刺激小鼠脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2 及集落刺激因子(CSF)，激活T淋巴細(xì)胞分泌IL-2、IL-3從而增強(qiáng)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)。另一項(xiàng)研究[10]發(fā)現(xiàn)PAP-II小劑量可顯著促進(jìn)絲裂原誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖，且PAP-II能顯著并呈劑量及時(shí)間依賴性促進(jìn)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生CSF。

湯杰印等[11]報(bào)導(dǎo)商陸皂苷甲(EsA) 通過(guò)下調(diào)p-ERK/2、AP-1表達(dá)，抑制了IL-1β誘導(dǎo)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(rGMC)增殖。

ZhangJP、QianDH等[12]報(bào)導(dǎo)商陸多糖PEP-I能夠顯著抑制移植性腫瘤S180生長(zhǎng)，促進(jìn)脾臟增生，提高T淋巴細(xì)胞和IL-2 的產(chǎn)生能力，使MΦ對(duì)S180 和L927 的細(xì)胞毒作用增強(qiáng)。

徐志工等[13]也曾報(bào)導(dǎo)商陸皂苷(ES)能增強(qiáng)脾細(xì)胞殺傷P815 和L929 腫瘤細(xì)胞活性及IL-2 誘導(dǎo)的LAK細(xì)胞活性，提高M(jìn)Φ對(duì)MethA的細(xì)胞毒活性，延長(zhǎng)腹水型小鼠的存活期，顯著抑制移植型腫瘤S180 ；同時(shí)由商陸誘生的多種淋巴因子混合制品對(duì)人肺癌細(xì)胞株、HeLa細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞株、Jurkat及Malt-4等細(xì)胞有不同程度的毒性作用，對(duì)人正常細(xì)胞(WISH細(xì)胞株)無(wú)毒性作用。

向莉等[14]發(fā)現(xiàn)商陸抗病毒蛋白(PAP)通過(guò)影響細(xì)胞周期調(diào)控蛋白表達(dá)使G0+G1期細(xì)胞比例增高，S期比例降低，從而改變了細(xì)胞周期分布，此外PAP上調(diào)FasL蛋白表達(dá),下調(diào)Fas蛋白表達(dá)，誘導(dǎo)人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251細(xì)胞凋亡。

董海東等[15]發(fā)現(xiàn)將商陸抗病毒蛋白(PAP)與單克隆抗體表面結(jié)合可顯示出極強(qiáng)的抗急性白血病細(xì)胞活性，能特異而高效地殺傷T細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞CEM，并可通過(guò)氯喹來(lái)提高PAP免疫毒素殺傷能力，在對(duì)抗原陰性的SP2/O細(xì)胞及正常細(xì)胞時(shí)殺滅作用較弱或無(wú)活性。說(shuō)明商陸對(duì)腫瘤細(xì)胞表面免疫相關(guān)分子的修飾作用也是其發(fā)揮細(xì)胞毒作用的途徑之一。

此外，袁素等[16]研究發(fā)現(xiàn)，商陸和土貝母、蛇六谷、貓尾木等藥材配伍，針對(duì)胸膜間皮瘤病人有很好的抗瘤作用，效果顯著。

3 商陸誘導(dǎo)調(diào)節(jié)細(xì)胞活動(dòng)的其它研究

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)是指具有生長(zhǎng)功能的子宮內(nèi)膜組織(腺體和間質(zhì)) 出現(xiàn)在子宮腔被覆內(nèi)膜及宮體肌層以外的其他部位，屬良性疾病，但具有侵襲、擴(kuò)散等惡性腫瘤的生長(zhǎng)特征[17]。商陸皂苷甲能抑制子宮內(nèi)膜異位癥引起的M2 型丙酮酸激酶、磷酸酰肌醇轉(zhuǎn)移蛋白和熱休克蛋白8 在子宮內(nèi)膜異位癥大鼠腹腔巨噬細(xì)胞中高表達(dá)，而磷酸甘油醛脫氫酶表達(dá)減少[18]。

龐軍等[19]通過(guò)將商陸水煎劑與原發(fā)性腎病綜合征(PNS)病人血清共培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)上清液中IL-6、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的量顯著降低，推導(dǎo)商陸水煎液可能通過(guò)降低血清中的可溶性白介素 2 受體(sIL-2R)使阿霉素腎病大鼠模型的蛋白排泄量減少，從而使得血清白蛋白量增高。

周倩等[20]報(bào)導(dǎo)大于100μg/mL濃度的商陸皂苷甲對(duì)HK-2 細(xì)胞有一定的毒性，其毒性機(jī)制與細(xì)胞氧化應(yīng)激，凋亡等相關(guān)。

4 商陸的其它藥理學(xué)應(yīng)用

4.1 商陸皂苷有瀉下，利尿，祛痰作用，商陸的多種不同炮制品均有不同程度的利尿作用；商陸皂苷祛痰作用略弱于經(jīng)水解后的商陸皂苷元，商陸皂苷元通過(guò)興奮舌神經(jīng)，反射性引起腺體分泌補(bǔ)足呼吸道粘膜，同時(shí)促進(jìn)了纖毛運(yùn)動(dòng)，從而使痰液易于排出[21]。其鉀鹽在保肝、降低門靜脈壓、補(bǔ)鉀方面有臨床效果。

4.2 商陸酸甲脂與二羥基商陸酸有抗炎，降轉(zhuǎn)氨酶等作用[22]；能緩解熱、紅、腫、痛等炎癥反應(yīng)以及減少炎癥滲出。

4.3 王琪[23]將生商陸切片置于高壓蒸鍋中蒸后烤干，碎成粉，壓片。兒童用量酌情減少，可治療包括尋常型銀屑病在內(nèi)的多種銀屑病；對(duì)全身性濕疹、玫瑰糠疹等也有一定的應(yīng)用價(jià)值。

4.4 商陸生物堿有弱的鎮(zhèn)咳作用；酸性商陸多糖對(duì)肝病患者有提高食欲、降脂作用。

4.5 有記載商陸有墮胎作用，同時(shí)有記載商陸鹽泥以酒調(diào)敷，或商陸與紫花地丁、忍冬藤一起搗爛，貼于瘡瘍腫毒未潰，石疽患處，有消腫拔毒作用。

4.6 綠莖商陸苗可作為野生蔬菜，制作商陸粥對(duì)肝硬化腹水患者進(jìn)行食療[24]。

4.7 商陸可制作成抗病毒農(nóng)藥，同時(shí)商陸可應(yīng)用于治理土壤錳污染[25]。

5 小 結(jié)

商陸藥理學(xué)活性眾多且已被開發(fā)用于治療多種疑難病癥。商陸在我國(guó)具有悠久的藥用歷史，臨床療效顯著，然而可能正因?yàn)槠涑煞值膹?fù)雜多效，使得商陸在我國(guó)雖然有著可大量栽培，資源豐富且易開發(fā)的優(yōu)勢(shì)，實(shí)際應(yīng)用卻遠(yuǎn)達(dá)不到理想中的狀態(tài)。

其具體原因可能歸咎于：一是商陸的藥理活性研究限定于個(gè)別化合物時(shí)，作用機(jī)制不明確；二是就算是對(duì)商陸提取出的個(gè)別化合物進(jìn)行研究，其藥用效用也可能具有多樣性，應(yīng)用于某些疾病時(shí)的毒理作用仍不明確；三是商陸提取出的單一化合物藥用效果可能會(huì)低于多成分混合，因研究?jī)r(jià)值降低，導(dǎo)致研究不全面。

因此，亟待解決的問題是如何在臨床治療實(shí)踐以及民間驗(yàn)方的基礎(chǔ)上，確切地闡明藥材商陸(某一炮制方法制得的商陸)針對(duì)某單一疾病的活性成分及其作用機(jī)制，并將其開發(fā)應(yīng)用于臨床。

腫瘤作為本文敘述的重點(diǎn)，是目前最困擾人類的疾病之一。從上述文獻(xiàn)中可看出商陸抗腫瘤的效應(yīng)途徑可大致分為三類。第一類，直接抑制：商陸多糖或商陸抗病毒蛋白，商陸皂苷甲等成分具有直接的抗腫瘤活性，抑制某些類型的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)；第二類，促進(jìn)免疫細(xì)胞生成：某些商陸多糖成分可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的生成，影響免疫細(xì)胞亞型的合成比率，起到對(duì)某些瘤類型抑制的作用；第三類，抗瘤輔助用藥[24]：中藥學(xué)應(yīng)用中可將商陸作為腫瘤治療的輔劑，主要因?yàn)槠渚哂欣蚪祲嚎寡椎淖饔?，同時(shí)能起到提高部分免疫的作用，作為輔劑能對(duì)主藥起很好的支撐作用。

商陸為有毒中藥，為了解除其毒性造成的適用范圍限制，商陸誘導(dǎo)的多細(xì)胞因子混合制品[25]對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性，僅對(duì)腫瘤細(xì)胞顯示活性這一特性對(duì)抗腫瘤篩選指導(dǎo)研究尤為重要；在保留活性成分的研究基礎(chǔ)上，需要進(jìn)一步解釋闡述商陸的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機(jī)制或免疫機(jī)制，積極建立穩(wěn)定可靠的純化制造以及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法。此外結(jié)合中藥化合物純化、淋巴細(xì)胞因子培養(yǎng)、結(jié)構(gòu)修飾等研究，達(dá)到為商陸減毒增效的研究目的，從而更好的為商陸的臨床安全及其廣泛合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。