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    重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗(H5N1Re-11株、Re-12株+H7N9Re-2)對(duì)蛋雞免疫效果抗體監(jiān)測(cè)以及安全性試驗(yàn)評(píng)估

    2019-02-22 11:05:26楊起賀榮富龍李叔偉
    飼料博覽 2019年12期
    關(guān)鍵詞:三價(jià)滴度活疫苗

    楊起賀,楊 浩,高 鵬,榮富龍,李叔偉

    (哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司,哈爾濱 150000)

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗(H5N1Re-11株、Re-12株+H7N9Re-2)滅活疫苗。

    抗體監(jiān)測(cè)試劑:禽流感H5N1 Re-11株和Re-12以及H7N9Re-2株抗原及陽(yáng)性血清,由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供,1%紅細(xì)胞懸液由哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司質(zhì)量管理部提供的SPF級(jí)公雞紅細(xì)胞。

    1.2 試驗(yàn)雞群

    黑龍江省哈爾濱市某蛋雞養(yǎng)殖場(chǎng),飼養(yǎng)量蛋雞1 500只,正常免疫雞群900只,300只不免疫重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗,300只做應(yīng)激實(shí)驗(yàn)。

    1.3 免疫劑量及方法

    首免:15日齡,免疫劑量0.3 mL·羽-1,頸部皮下注射。二免:45日齡,免疫劑量0.5 mL·羽-1,肌肉注射。三免:75日齡,免疫劑量0.5 mL·羽-1,肌肉注射。四免:100日齡,免疫劑量0.5 mL·羽-1,肌肉注射。

    1.4 血樣采集

    15日齡免疫前先測(cè)定基礎(chǔ)抗體,然后于29日齡(首免后2周)、36日齡(首免后3周)、43日齡(首免后4周)、52日齡(二免后1周)、59日齡(二免后2周)、66日齡(二免后3周)、73日齡(二免后4周)、82日齡(三免后1周)、89日齡(三免后2周)、 97日齡(三免后3周)、104日齡(三免后4周)、111日齡(三免后5周)、117日齡(四免后1周),每次分別每組采集10份血樣,離心制備血清并按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行紅細(xì)胞血凝抑制實(shí)驗(yàn)(HI)檢測(cè)抗體。

    1.5 檢測(cè)試劑和檢測(cè)方法

    試驗(yàn)均用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞血凝抑制實(shí)驗(yàn)(HI)進(jìn)行抗體檢測(cè),待檢血清HI抗體滴度≥4log2時(shí)為抗體合格。

    1.6 安全實(shí)驗(yàn)

    首次免疫15日齡接種H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗后,每天測(cè)定雞的體重。免疫接種后連續(xù)觀察20 d,記錄疫苗接種部位和全身反應(yīng)。

    1.7 應(yīng)激實(shí)驗(yàn)

    將300只雞分為5組,每組60只,A組15日齡接種0.3 mL,B組15日齡接種0.5 mL,C組75日齡接種0.5 mL,D組75日齡接種0.8 mL,F(xiàn)組75日齡接種1 mL。接種后通過(guò)吸收時(shí)間,精神狀態(tài),采食量觀察不同劑量H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗對(duì)雞群的應(yīng)激情況。

    2 試驗(yàn)結(jié)果

    2.1 免疫后各毒株抗體效長(zhǎng)規(guī)律

    免疫后各毒株抗體效長(zhǎng)規(guī)律見表1。

    表1 免疫后各毒株抗體效長(zhǎng)規(guī)律

    結(jié)果表明,蛋雞開產(chǎn)前選擇H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗進(jìn)行3次免疫,首免15日齡,二免45日齡,三免75日齡,選擇在不同日齡對(duì)雞群進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè),首次免疫14 d后抗體滴度>5 log2,59日齡也就是二免14日齡后,H5N1 Re-11、H5N1 Re-12、H7N9Re-2抗體滴度均>8 log2,對(duì)雞群有很好的保護(hù)作用。

    2.2 接種疫苗后雞體重變化

    接種疫苗后雞體重變化見表2。

    結(jié)果表明,免疫組與對(duì)照組的體重基本保持一致,差異不顯著(P>0.05),疫苗的接種并不影響雞的體重的增長(zhǎng)。注射疫苗后疫苗接種組和沒(méi)有接種疫苗組雞群的精神狀態(tài)無(wú)顯著差異(P>0.05),免疫雞精神食欲良好,無(wú)不良反映,證明本疫苗是安全的。

    2.3 應(yīng)激實(shí)驗(yàn)

    應(yīng)激實(shí)驗(yàn)見表3。

    結(jié)果表明,不同日齡的雞群接種不同劑量的重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗(H5 N1Re-11株、Re-12株+H7N9Re-2),從完全吸收時(shí)間、精神狀態(tài)、采食量方面來(lái)評(píng)價(jià)接種疫苗后對(duì)雞群應(yīng)激狀況,接種最大劑量1 mL時(shí),疫苗對(duì)雞群應(yīng)激影響是一過(guò)性的,2~3日齡可以恢復(fù)。由于是臨床上飼養(yǎng)的雞群,飼養(yǎng)管理、溫度、濕度等都會(huì)對(duì)雞群造成一定的影響,疫苗回溫也會(huì)對(duì)應(yīng)激產(chǎn)生影響,建議疫苗回溫時(shí)間1.5~2 h。

    表2 接種疫苗后雞體重變化

    表3 應(yīng)激實(shí)驗(yàn)

    3 討論

    3.1 抗體滴度消長(zhǎng)規(guī)律

    對(duì)于蛋雞,本試驗(yàn)選擇15、45、75日齡進(jìn)行3次免疫,首次免疫后14日齡H5 Re-11、H5 Re-12、H7Re-2抗體滴度>4log2,對(duì)雞群有保護(hù)力,二次免疫后14日齡H5 Re-11、H5 Re-12、H7Re-2抗體滴度>8log2,說(shuō)明對(duì)蛋雞有較好的保護(hù)力。

    2019年高致病性禽流感發(fā)生率較高,死亡率低,這反而給養(yǎng)殖戶帶來(lái)的損失要大一些,原因是由于死亡率低,養(yǎng)殖戶對(duì)高致病性禽流感重視程度不夠[1]。由于時(shí)間和條件所限,本試驗(yàn)沒(méi)有在開產(chǎn)前進(jìn)行第4次免疫,實(shí)際在現(xiàn)地預(yù)防禽流感時(shí),建議開產(chǎn)前免疫4次高致病性禽流感疫苗,這樣對(duì)開產(chǎn)前和產(chǎn)蛋高峰期的蛋雞都會(huì)有較好的保護(hù)力,來(lái)預(yù)防高致病性禽流感的發(fā)生。

    3.2 疫苗安全性

    養(yǎng)殖戶往往對(duì)禽流感疫苗的應(yīng)激反應(yīng)有所顧忌,尤其是在蛋雞開產(chǎn)后擔(dān)心加強(qiáng)接種高致病性禽流感疫苗會(huì)影響蛋雞的產(chǎn)蛋率[2]。本試驗(yàn)通過(guò)安全性試驗(yàn)和疫苗接種的應(yīng)激反應(yīng)觀察,沒(méi)有明顯異常,說(shuō)明重組禽流感病毒H5+H7亞型三價(jià)滅活疫苗對(duì)雞群沒(méi)有應(yīng)激作用,安全性高。

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