80種農(nóng)藥原藥急性毒性分析

謝 晶，李羨筠，鄭艷艷，梁恒秋，梁丹玉

（廣西壯族自治區(qū)職業(yè)病防治研究院，南寧 530021）

WHO首份預(yù)防自殺報(bào)告指出：農(nóng)藥中毒是全球最為常見的自殺方法之一[1]。全球每年至少有300萬人發(fā)生嚴(yán)重的急性農(nóng)藥中毒，致死率較高，僅亞洲農(nóng)村地區(qū)每年就有30萬人死于農(nóng)藥中毒[2]。我國2008—2014年急性農(nóng)藥中毒共發(fā)生18 975例，年平均發(fā)生2 711例[3]。農(nóng)藥中毒已成為全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。急性毒性試驗(yàn)作為農(nóng)藥毒理學(xué)安全性評(píng)價(jià)的第一階段，對(duì)農(nóng)藥的毒性評(píng)估起關(guān)鍵性作用。本試驗(yàn)采用農(nóng)藥毒理學(xué)急性毒性試驗(yàn)方法，對(duì)殺蟲劑、除草劑、殺菌劑的急性毒性進(jìn)行分析比較，為其他毒性試驗(yàn)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 受試物

80種農(nóng)藥原藥，包括殺蟲劑（19種）、除草劑（41種）、殺菌劑（20種）。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康成年大鼠（SPF級(jí)），體重180～220 g，用于急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、急性吸入毒性試驗(yàn)（簡(jiǎn)稱“經(jīng)口、吸入”）；體重200～300 g，用于急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)（簡(jiǎn)稱“經(jīng)皮”）。新西蘭大白兔（普通級(jí)），體重2.0～3.0 kg，用于眼刺激試驗(yàn)、急性皮膚刺激試驗(yàn)（簡(jiǎn)稱“眼刺、皮刺”）。豚鼠（普通級(jí)），體重250～300g，用于皮膚變態(tài)反應(yīng)（致敏）試驗(yàn)（簡(jiǎn)稱“致敏”）。大鼠、兔檢疫3 d，豚鼠檢疫6 d，無異常即可用于試驗(yàn)，大鼠灌胃前禁食16 h左右。

1.3 方法

按照《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗(yàn)方法》（GB 15670—1995）中急性毒性試驗(yàn)方法進(jìn)行經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入、眼刺、皮刺、致敏試驗(yàn)，數(shù)據(jù)分析采用SPSS 13.0軟件。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

大鼠急性毒性判定標(biāo)準(zhǔn)按照《農(nóng)藥登記資料規(guī)定》（2007年版）中產(chǎn)品毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，其他結(jié)果評(píng)定均參照《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗(yàn)方法》。若大鼠出現(xiàn)雌、雄不同毒級(jí)時(shí)，以最高毒級(jí)為準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入試驗(yàn)結(jié)果賦值標(biāo)準(zhǔn)：1級(jí)，微毒；2級(jí)，低毒；3級(jí)，中等毒；4級(jí)，高毒；5級(jí)，劇毒。眼刺試驗(yàn)結(jié)果賦值標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)，無刺激性；1級(jí)，輕度刺激性；2級(jí)，輕度至中度刺激性；3級(jí)，中度刺激性；4級(jí)，中度至重度刺激性；5級(jí)，重度刺激性。皮刺試驗(yàn)結(jié)果賦值標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)，無刺激性；1級(jí)，輕度刺激性；2級(jí)，中度刺激性；3級(jí)，重度刺激性。致敏試驗(yàn)賦值標(biāo)準(zhǔn)：1級(jí)，弱致敏物；2級(jí)，輕度致敏物；3級(jí)，中度致敏物；4級(jí)，強(qiáng)致敏物；5級(jí)，極強(qiáng)致敏物。

各受試農(nóng)藥毒性試驗(yàn)結(jié)果見表1～表3。

表1 19種殺蟲劑急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

表2 41種除草劑急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

表3 20種殺菌劑急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

2.2 急性經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入毒性試驗(yàn)結(jié)果分析

受試農(nóng)藥急性經(jīng)口毒性以低毒為主，其次是微毒，少部分是中等毒；所測(cè)農(nóng)藥中，中等毒殺蟲劑數(shù)量最多，其后依次為殺菌劑、除草劑。SPSS趨勢(shì)檢驗(yàn)結(jié)果為x2=6.816，P=0.010。說明3類農(nóng)藥經(jīng)口毒性分布不同，殺蟲劑隨毒級(jí)增大數(shù)量增多；殺菌劑隨毒級(jí)增大數(shù)量減少；除草劑以低毒為主，其次是微毒，僅炔草酯為中等毒，試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表4。

表4 大鼠急性經(jīng)口試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

大鼠急性經(jīng)皮毒性除殺蟲劑甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽為中等毒，其他試驗(yàn)農(nóng)藥均為低毒。SPSS趨勢(shì)檢驗(yàn)結(jié)果為x2=2.199，P=0.227。說明3類農(nóng)藥經(jīng)皮毒性無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。各農(nóng)藥急性吸入毒性均為低毒。

2.3 兔眼刺激、皮膚刺激，豚鼠致敏試驗(yàn)結(jié)果分析

兔眼刺激試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)見表5。供試農(nóng)藥中，殺蟲劑對(duì)兔眼的刺激性隨刺激程度加強(qiáng)數(shù)量呈遞減趨勢(shì)；除草劑以無刺激性為主，其次是輕度刺激性、中度刺激性。殺菌劑以無刺激性居多，但殺菌劑克菌丹對(duì)兔眼具有重度刺激性，且21 d眼刺激癥狀未恢復(fù)。SPSS趨勢(shì)檢驗(yàn)結(jié)果為x2=0.181，P=0.681，說明3類農(nóng)藥對(duì)兔眼的刺激強(qiáng)度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。

表5 兔眼刺激試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

各農(nóng)藥對(duì)兔皮膚刺激癥狀均在染毒后14 d消失，兔急性皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果見表6。供試農(nóng)藥中殺蟲劑、殺菌劑對(duì)兔皮膚多無刺激性，少數(shù)為輕度刺激性；除草劑對(duì)兔皮膚均無刺激性。SPSS趨勢(shì)檢驗(yàn)結(jié)果為x2=0.850，P=0.421。說明所測(cè)3類農(nóng)藥對(duì)兔皮膚刺激強(qiáng)度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差別。受檢農(nóng)藥均為弱致敏物。

表6 兔急性皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)

3 討論

本次研究顯示：受試農(nóng)藥急性經(jīng)口毒性以低毒為主，其次是微毒，少數(shù)是中等毒。受試農(nóng)藥中，經(jīng)口毒性為中等毒的殺蟲劑數(shù)量較多；除草劑以低毒為主，其次是微毒，僅1個(gè)品種為中等毒。除殺蟲劑甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽急性經(jīng)皮毒性為中等毒，其他受試農(nóng)藥均為低毒。受試農(nóng)藥的急性吸入毒性均為低毒。孫新友等[4]研究結(jié)果顯示：91種農(nóng)藥制劑對(duì)家蠶急性毒性試驗(yàn)中，殺蟲劑中等及以上毒性品種超過90%，且所有劇毒品種均為殺蟲劑；供試的12種除草劑均對(duì)家蠶低毒。殺蟲劑毒性最高，與本次試驗(yàn)結(jié)果一致。2011年1月至2015年12月間，宜賓市某醫(yī)院收治的1 556例農(nóng)藥中毒病例中，死亡35例，病死率為2.25%。其中，引起中毒者死亡的農(nóng)藥多為殺蟲劑和除草劑，分別致死17例和16例，兩者死亡病例占總中毒死亡病例的94.29%[5]。本次試驗(yàn)中，中等毒農(nóng)藥殺蟲劑數(shù)量高于殺菌劑，除草劑數(shù)量最少，涉及的品種包括殺蟲劑二溴磷、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、殺螟丹、殺蟲單、阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、氟蟲腈，殺菌劑三環(huán)唑、乙蒜素，除草劑炔草酯。以上農(nóng)藥毒性偏高的殺蟲劑類別為有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、氨基甲酸酯類、抗生素類。其中，有機(jī)磷類殺蟲劑是引起急性中毒數(shù)量最多的農(nóng)藥類別，其在動(dòng)物體內(nèi)與膽堿酯酶結(jié)合，使乙酰膽堿在體內(nèi)過量堆積，激活膽堿能受體（毒蕈堿或煙堿受體），從而對(duì)哺乳動(dòng)物產(chǎn)生毒性[6]。針對(duì)以上農(nóng)藥，接觸者要注意自我安全防護(hù)。

本次研究還顯示：受試農(nóng)藥對(duì)兔眼、皮膚以無刺激性為主，其次是輕度刺激性；受試農(nóng)藥對(duì)兔眼還存在輕度至中度、中度、重度刺激性，引起兔眼中度刺激的農(nóng)藥品種包括二溴磷、滅草松、2,4-滴、麥草畏、2甲4氯。除滅草松對(duì)兔眼和皮膚存在中等刺激性有明確報(bào)道外[7]，其他農(nóng)藥對(duì)兔眼的刺激性報(bào)道甚少。2,4-滴為具有苯氧羧酸結(jié)構(gòu)的合成激素類除草劑，其較強(qiáng)的內(nèi)吸傳導(dǎo)性可能是導(dǎo)致兔眼刺激癥狀嚴(yán)重的原因。麥草畏是選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型苗后除草劑，其持效期長(zhǎng)，會(huì)使試驗(yàn)動(dòng)物體重減輕，肝臟受損，雌性容易流產(chǎn)，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)造成失明[8]。2甲4氯屬于有機(jī)氯類除草劑，為具有選擇性的內(nèi)吸傳導(dǎo)型莖葉除草劑。急性、亞慢性試驗(yàn)結(jié)果顯示，其對(duì)肝臟產(chǎn)生一定程度的損害[9]。

供試80種農(nóng)藥原藥急性毒性以低毒為主，少數(shù)為中等毒。農(nóng)藥使用者要規(guī)范農(nóng)藥施用，妥善保管和存放農(nóng)藥，加強(qiáng)個(gè)體防護(hù)；農(nóng)藥生產(chǎn)者應(yīng)研發(fā)高效、微毒、低殘留農(nóng)藥，以降低農(nóng)藥對(duì)健康的損害。